ઉત્પાદન

1. 1.પૃષ્ઠભૂમિ

નાઇટ્રોફ્યુરાન્સ એ કૃત્રિમ બ્રોડ-સ્પેક્ટ્રમ એન્ટિબાયોટિક્સ છે, જે તેના ઉત્તમ એન્ટિબેક્ટેરિયલ અને ફાર્માકોકાઇનેટિક ગુણધર્મો માટે પ્રાણી ઉત્પાદનમાં વારંવાર ઉપયોગમાં લેવાય છે.તેઓનો ઉપયોગ ડુક્કર, મરઘાં અને જળચર ઉત્પાદનમાં વૃદ્ધિ પ્રમોટર્સ તરીકે પણ થતો હતો.પ્રયોગશાળાના પ્રાણીઓ સાથેના લાંબા ગાળાના અભ્યાસમાં સૂચવવામાં આવ્યું છે કે પિતૃ દવાઓ અને તેમના ચયાપચયમાં કાર્સિનોજેનિક અને મ્યુટેજેનિક લાક્ષણિકતાઓ જોવા મળે છે.આના કારણે ખાદ્ય ઉત્પાદન માટે વપરાતા પ્રાણીઓની સારવાર માટે નાઈટ્રોફ્યુરાન્સ પર પ્રતિબંધ મૂકવામાં આવ્યો છે.નાઈટ્રોફ્યુરાન દવાઓ ફ્યુરાલ્ટાડોન, નાઈટ્રોફ્યુરાન્ટોઈન અને નાઈટ્રોફ્યુરાઝોન પર 1993માં EUમાં ખાદ્ય પ્રાણીઓના ઉત્પાદનમાં ઉપયોગ કરવા પર પ્રતિબંધ મૂકવામાં આવ્યો હતો અને 1995માં ફ્યુરાઝોલિડોનનો ઉપયોગ પ્રતિબંધિત કરવામાં આવ્યો હતો.

નાઇટ્રોફ્યુરાન દવાઓના અવશેષોનું વિશ્લેષણ નાઇટ્રોફ્યુરન પેરેન્ટ દવાઓના પેશી બંધાયેલ ચયાપચયની શોધ પર આધારિત હોવું જરૂરી છે.કારણ કે પિતૃ દવાઓ ખૂબ જ ઝડપથી ચયાપચય કરે છે, અને પેશી બંધાયેલ નાઇટ્રોફ્યુરાન ચયાપચય લાંબા સમય સુધી જાળવી રાખશે, આ ચયાપચયનો ઉપયોગ નાઇટ્રોફ્યુરાન્સના દુરુપયોગની તપાસમાં લક્ષ્ય તરીકે થાય છે, જેમાં ફુરાઝોલિડોન મેટાબોલિટ (AOZ), ફ્યુરાટાડોન મેટાબોલિટ (AMOZ) નો સમાવેશ થાય છે. ), નાઇટ્રોફ્યુરાન્ટોઇન મેટાબોલાઇટ (AHD) અને નાઇટ્રોફ્યુરાઝોન મેટાબોલાઇટ (SEM).

AOZ-અવશેષો સામાન્ય રીતે LC-MS અથવા LC-MS/MS દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે.એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોએસેઝ, ક્રોમેટોગ્રાફિક પદ્ધતિઓની તુલનામાં, સંવેદનશીલતા, તપાસ મર્યાદા, તકનીકી સાધનો અને સમયની જરૂરિયાતને લગતા નોંધપાત્ર ફાયદા દર્શાવે છે.(સમય ખર્ચ: 45 મિનિટ)

1. 2.પરીક્ષણ સિદ્ધાંત

આ ELISA કિટ પરોક્ષ-સ્પર્ધાત્મક એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસેના સિદ્ધાંતના આધારે AOZ શોધવા માટે બનાવવામાં આવી છે.માઇક્રોટાઇટર કુવાઓ કેપ્ચર BSA-લિંક્ડ એન્ટિજેન સાથે કોટેડ છે.નમૂનામાં AOZ એ એન્ટિબોડી ઉમેરવા માટે માઇક્રોટાઇટર પ્લેટ પર કોટેડ એન્ટિજેન સાથે સ્પર્ધા કરે છે.એન્ઝાઇમ કન્જુગેટના ઉમેરા પછી, ક્રોમોજેનિક સબસ્ટ્રેટનો ઉપયોગ થાય છે અને સિગ્નલને સ્પેક્ટ્રોફોટોમીટર દ્વારા માપવામાં આવે છે.નમૂનામાં AOZ સાંદ્રતા માટે શોષણ વિપરિત પ્રમાણસર છે.

1. 3.અરજીઓ

આ કીટનો ઉપયોગ AOZ અવશેષોના માત્રાત્મક અને ગુણાત્મક વિશ્લેષણમાં થઈ શકે છેએનિમા પેશીઓ(સ્નાયુ, યકૃત વગેરે), મધ.

1. 4.ક્રોસ-પ્રતિક્રિયાઓ

ફુરાઝોલિડોન મેટાબોલાઇટ (AOZ)………………………..100%

ફ્યુરલટાડોન મેટાબોલાઇટ (AMOZ)………………………<0.1%

નાઇટ્રોફ્યુરેન્ટોઇન મેટાબોલાઇટ (AHD)………………………<0.1%

નાઇટ્રોફ્યુરાઝોન મેટાબોલાઇટ (SEM)………………………………<0.1%

ફુરાઝોલિડોન ………………………………………………….. 16.3%

ફ્યુરાલ્ટાડોન …………………………………………….…<1%

નાઈટ્રોફ્યુરેન્ટોઈન ………………………………………………………<1%

નાઇટ્રોફ્યુરાઝોન………………………………………………………<1%

1. 5.જરૂરી સામગ્રી

5.1સાધનો

----માઈક્રોટાઈટર પ્લેટ સ્પેક્ટ્રોફોટોમીટર (450nm/630nm)

----રોટરી બાષ્પીભવક અથવા નાઇટ્રોજન સૂકવવાના સાધનો

----હોમોજેનાઇઝર/સ્ટોમેકર

---- શેકર

----વોર્ટેક્સ મિક્સર

----સેન્ટ્રીફ્યુજ

---- વિશ્લેષણાત્મક સંતુલન (ઇન્ડક્ટન્સ: 0.01 ગ્રામ)

----ગ્રેજ્યુએટેડ પીપેટ: 10ml

----રબર પિપેટ બલ્બ

----વોલ્યુમેટ્રિક ફ્લાસ્ક: 100ml

----ગ્લાસ ફ્લાસ્ક: 10ml

----પોલીસ્ટાયરીન સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબ: 2ml, 50ml

----માઈક્રોપીપેટ્સ: 20ul-200ul, 100ul-1000ul,

250ul-મલ્ટીપીપેટ

5.2રીએજન્ટ્સ

----ઇથિલ એસીટેટ (AR)

-----એન-હેક્સેન (અથવા એન-હેપ્ટેન) (એઆર)

----ડીપોટેશિયમ હાઇડ્રોજન ફોસ્ફેટ ટ્રાઇહાઇડ્રેટ

(K₂HPO₄.3એચ₂O) (AR)

----કેન્દ્રિત હાઇડ્રોક્લોરિક એસિડ (HCl, AR)

-----મેથેનોલ

----સોડિયમ હાઇડ્રોક્સાઇડ (NaOH, AR)

---- ડીયોનાઇઝ્ડ પાણી

1. 6.કિટ ઘટકો

l એન્ટિજેન સાથે કોટેડ માઇક્રોટાઇટર પ્લેટ, 96 કૂવા

l માનક સોલ્યુશન્સ (6 બોટલ, 1ml/બોટલ)

0ppb,0.025ppb,0.075ppb,0.225ppb,0.675ppb,2.025ppb

l સ્પાઇકીંગ સ્ટાન્ડર્ડ કંટ્રોલ : (1ml/બોટલ)......100ppb

l સંકેન્દ્રિત એન્ઝાઇમ કન્જુગેટ 1 મિલી.......લાલ કેપ

l એન્ઝાઇમ કન્જુગેટ મંદ 10 મિલી ………..ગ્રીન કેપ

l સબસ્ટ્રેટ A 7ml………………………………………….. સફેદ કેપ

l સબસ્ટ્રેટ B 7ml…………………………………………..લાલ કેપ

l સ્ટોપ સોલ્યુશન 7ml……………………………… પીળી કેપ

l 20×કેન્દ્રિત ધોવાનું દ્રાવણ 40ml

…………………………………….……પારદર્શક ટોપી

l 2×કેન્દ્રિત નિષ્કર્ષણ ઉકેલ 60ml….બ્લુ કેપ

l 2-નાઇટ્રોબેન્ઝાલ્ડીહાઇડ 15.1 એમજી……………… વ્હાઇટ કેપ

1. 7.રીએજન્ટ્સ તૈયારી

ઉકેલ 1: વ્યુત્પન્ન રીએજન્ટ:

2-નાઈટ્રોબેન્ઝાલ્ડીહાઈડ ધરાવતી બોટલમાં 10ml મિથેનોલ ઉમેરો અને ઓગાળી લો.(10 એમએમની સાંદ્રતા પર).

ઉકેલ 2: 0.1MK₂HPO₄ઉકેલ:

વજન 22.8g K₂HPO₄.3એચ₂ઓગળવા માટે ડીયોનાઇઝ્ડ પાણીના O થી 1L.

ઉકેલ 3: 1M HCl સોલ્યુશન

8.3ml સંકેન્દ્રિત હાઇડ્રોક્લોરિક એસિડ ઓગાળો ડીયોનાઇઝ્ડ પાણી સાથે 100ml.

ઉકેલ 4:1M NaOH સોલ્યુશન

100ml ડીયોનાઇઝ્ડ પાણી સાથે 4g NaOH ઓગાળો.

ઉકેલ 5: નિષ્કર્ષણ ઉકેલ:

1:1 ના વોલ્યુમ રેશિયોમાં ડીયોનાઇઝ્ડ પાણી સાથે 2×કેન્દ્રિત નિષ્કર્ષણ દ્રાવણને પાતળું કરો.આ સોલ્યુશનને 1 મહિના માટે 4℃ પર સાચવી શકાય છે, જેનો ઉપયોગ નમૂનાઓ કાઢવા માટે કરવામાં આવશે.

ઉકેલ 6: ધોવાનું સોલ્યુશન:

1:19 ના જથ્થાના રેશનમાં ડીયોનાઇઝ્ડ પાણી સાથે 20×કેન્દ્રિત ધોવાનું દ્રાવણ પાતળું કરો, જેનો ઉપયોગ પ્લેટો ધોવા માટે કરવામાં આવશે.આ પાતળું સોલ્યુશન 4℃ તાપમાને 1 મહિના માટે સાચવી શકાય છે.

1. 8.નમૂના તૈયારીઓ

8.1ઓપરેશન પહેલા સૂચના અને સાવચેતીઓ:

a) કૃપા કરીને પ્રયોગમાં એક જ ટીપ્સનો ઉપયોગ કરો અને વિવિધ રીએજન્ટને શોષતી વખતે ટીપ્સ બદલો.

b) ખાતરી કરો કે તમામ પ્રાયોગિક સાધનો સ્વચ્છ છે.

c) ડેરિવેટિવ રીએજન્ટને ત્રણ મહિના માટે 2-8℃ પર સાચવી શકાય છે;

d) HCl દ્રાવણને ઓરડાના તાપમાને 3 મહિના સુધી સાચવી શકાય છે;

e) NaOH સોલ્યુશનને ઓરડાના તાપમાને 3 મહિના માટે સાચવી શકાય છે;

f) સારવાર ન કરાયેલ નમૂનાઓને ફ્રીઝમાં રાખો(-20℃);

g) સારવાર કરાયેલા નમૂનાઓ 24 કલાક માટે 2-8℃ અંધારામાં સાચવી શકાય છે.

8.2 પશુ પેશી અને યકૃતના નમૂનાઓ:

---- હોમોજેનાઇઝર સાથે નમૂનાઓને એકરૂપ બનાવો;

---- 50ml પોલિસ્ટરીન સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબમાં હોમોજેનાઇઝ્ડ પેશીના નમૂનાનું 1.0±0.05g વજન.4ml ડીયોનાઇઝ્ડ પાણી, 0.5ml 1M HCl સોલ્યુશન અને 100ul ડેરિવેટિવ રીએજન્ટ ઉમેરો (સોલ્યુશન 1 જુઓ).તેને 2 મિનિટ માટે હલાવો.

---- રાતોરાત 37℃ તાપમાને સેવન કરો (લગભગ 16 કલાક);

---- 5ml 0.1MK ઉમેરો₂HPO₄ (ઉકેલ2), 0.4ml 1M NaOH (ઉકેલ4) અને 5ml ઇથિલ એસીટેટ.30s માટે ઉગ્રતાથી હલાવો;

---- ઓરડાના તાપમાને (20-25℃) 10 મિનિટ માટે સેન્ટ્રીફ્યુજ, ઓછામાં ઓછું 3000 ગ્રામ;

---- સુપરનેટન્ટ ઓર્ગેનિક તબક્કાના 2.5ml ને 10ml સ્વચ્છ કાચની ટ્યુબમાં લો, 50-60℃ નાઈટ્રોજન ગેસ અથવા રોટરી બાષ્પીભવક સાથે સૂકવો;

---- શુષ્ક બચેલાને 1ml n-hexane (અથવા n-heptane), 30s માટે વમળ સાથે ઓગાળો, 1ml નિષ્કર્ષણ સોલ્યુશન ઉમેરો (ઉકેલ5), વમળ 1 મિનિટ, સંપૂર્ણપણે ભળી દો.

---- ઓરડાના તાપમાને સેન્ટ્રીફ્યુજ (20-25^oસી) 5 મિનિટ માટે, ઓછામાં ઓછું 3000 ગ્રામ;

---- સુપરનેટન્ટ કાર્બનિક તબક્કાને દૂર કરો;પરખ માટે સબસ્ટ્રેટ પાણીના તબક્કામાંથી 50μl લો.

8.4 મધ

---- એક 50ml પોલિસ્ટરીન સેન્ટ્રીફ્યુજ ટ્યુબમાં હોમોજનાઇઝ્ડ મધના નમૂનાનું 1.0±0.05g વજન કરો;

----4ml ડીયોનાઇઝ્ડ પાણી ઉમેરો, 0.5ml 1M HCl (ઉકેલ3) અને 100μl ડેરિવેટિવ રીએજન્ટ (ઉકેલ1);2 મિનિટ માટે સંપૂર્ણપણે હલાવો;

---- રાતોરાત 37℃ પર સેવન કરો (લગભગ 16 કલાક);

----5ml 0.1MK ઉમેરો₂HPO₄ (ઉકેલ2), 0.4ml 1M NaOH (ઉકેલ4) અને 5ml ઇથિલ એસીટેટ, 30 સેકંડ સુધી ઉગ્રતાથી હલાવો;

----10 મિનિટ માટે ઓરડાના તાપમાને (20-25℃) સેન્ટ્રીફ્યુજ, ઓછામાં ઓછું 3000g;

----સુપરનેટન્ટ ઓર્ગેનિક તબક્કાના 2.5mlને 10ml સ્વચ્છ કાચની ટ્યુબમાં લો, 50-60℃ નાઈટ્રોજન ગેસ અથવા રોટરી બાષ્પીભવક સાથે સૂકવો;

---- શુષ્ક બચેલાને 1ml n-hexane (અથવા n-heptane), 30s માટે વમળ સાથે ઓગાળો, 1ml નિષ્કર્ષણ સોલ્યુશન ઉમેરો (ઉકેલ5), વમળ 1 મિનિટ, સંપૂર્ણપણે ભળી દો.

---- ઓરડાના તાપમાને સેન્ટ્રીફ્યુજ (20-25^oસી) 10 મિનિટ માટે, ઓછામાં ઓછું 3000 ગ્રામ;

----સુપરનેટન્ટ કાર્બનિક તબક્કાને દૂર કરો;પરખ માટે સબસ્ટ્રેટ પાણીના તબક્કામાંથી 50μl લો.

1. 9.પરીક્ષા પ્રક્રિયા

9.1પરીક્ષા પહેલાં નોટિસ

9.1.1 ખાતરી કરો કે બધા રીએજન્ટ્સ અને માઇક્રોવેલ ઓરડાના તાપમાને (20-25℃) છે.

9.1.2 ઉપયોગ કર્યા પછી તરત જ બાકીના તમામ રીએજન્ટ્સને 2-8℃ પર પાછા ફરો.

9.1.3 માઇક્રોવેલને યોગ્ય રીતે ધોવા એ પરીક્ષાની પ્રક્રિયામાં એક મહત્વપૂર્ણ પગલું છે;ELISA વિશ્લેષણની પુનઃઉત્પાદનક્ષમતા માટે તે મહત્વપૂર્ણ પરિબળ છે.

9.1.4 ઇન્ક્યુબેશન દરમિયાન પ્રકાશને ટાળો અને માઇક્રોવેલને આવરી લો.

9.2 પરીક્ષણ પગલાં

9.2.1 ઓરડાના તાપમાને (20-25℃) બધા રીએજન્ટ્સને 30 મિનિટથી વધુ સમય માટે બહાર કાઢો, ઉપયોગ કરતા પહેલા એકરૂપ બનાવો.

9.2.2 જરૂરી માઇક્રોવેલ મેળવો અને બાકીનાને 2-8℃ પર તરત જ ઝિપ-લોક બેગમાં પરત કરો.

9.2.3 કોન્સન્ટ્રેટેડ વોશ સોલ્યુશન અને કોન્સન્ટ્રેટેડ એક્સટ્રેક્શન સોલ્યુશનને ઉપયોગ કરતા પહેલા ઓરડાના તાપમાને ફરીથી ગરમ કરવું જોઈએ.

9.2.4નંબર:દરેક માઇક્રોવેલ પોઝિશનને ક્રમાંકિત કરો અને તમામ ધોરણો અને નમૂનાઓ ડુપ્લિકેટમાં ચલાવવા જોઈએ.ધોરણો અને નમૂનાઓની સ્થિતિ રેકોર્ડ કરો.

9.2.5કેન્દ્રિત એન્ટિબોડી સોલ્યુશનનું મંદન: સંકેન્દ્રિત એન્ઝાઇમ સોલ્યુશનને 1:10 (1 ફોલ્ડ કોન્સન્ટ્રેટેડ એન્ઝાઇમ સોલ્યુશન: 10 ફોલ્ડ એન્ઝાઇમ કન્જુગેટ ડિલ્યુઅન્ટ્સ) ના વોલ્યુમ રેશિયોમાં એન્ઝાઇમ કન્જુગેટ દ્રાવણ સાથે પાતળું કરો.

9.2.6સ્ટાન્ડર્ડ સોલ્યુશન/ સેમ્પલ અને એન્ઝાઇમ કન્જુગેટ સોલ્યુશન ઉમેરો: 50µl પ્રમાણભૂત દ્રાવણ અથવા તૈયાર કરેલ નમૂનાને અનુરૂપ કુવાઓમાં ઉમેરો, 50µl એન્ઝાઇમ સંયોજક દ્રાવણ ઉમેરો.પ્લેટને મેન્યુઅલી હલાવીને હળવા હાથે મિક્સ કરો અને કવર સાથે 25°C પર 30 મિનિટ માટે પકાવો.

9.2.7ધોવું: કવરને હળવેથી દૂર કરો અને કુવાઓમાંથી પ્રવાહી રેડો અને માઇક્રોવેલને 250µl પાતળું ધોવાનું સોલ્યુશન વડે કોગળા કરો (ઉકેલ6) 4-5 વખત 10 સે.ના અંતરાલ પર.અવશેષ પાણીને શોષક કાગળ વડે શોષી લો (બાકીના હવાના બબલને ન વપરાયેલ ટીપથી દૂર કરી શકાય છે).

9.2.8રંગ: દરેક કૂવામાં 50µl સબસ્ટ્રેટ સોલ્યુશન A અને 50µl સબસ્ટ્રેટ સોલ્યુશન B ઉમેરો.પ્લેટને મેન્યુઅલી રોકીને હળવા હાથે મિક્સ કરો અને કવર સાથે 25°C પર 15 મિનિટ માટે પકાવો (જુઓ 12.8).

9.2.11માપ: દરેક કૂવામાં 50µl સ્ટોપ સોલ્યુશન ઉમેરો.પ્લેટને મેન્યુઅલી રોકીને હળવેથી મિક્સ કરો અને શોષકતાને 450nm પર માપો (તે 450/630nmની ડ્યુઅલ-વેવલન્થ સાથે માપવાનું સૂચન કરે છે. સ્ટોપ સોલ્યુશન ઉમેર્યા પછી 5 મિનિટની અંદર પરિણામ વાંચો.)

10 પરિણામો

10.1શોષણની ટકાવારી

ધોરણો અને નમૂનાઓ માટે મેળવેલા શોષક મૂલ્યોના સરેરાશ મૂલ્યોને પ્રથમ ધોરણ (શૂન્ય ધોરણ) ના શોષક મૂલ્ય દ્વારા વિભાજિત કરવામાં આવે છે અને 100% દ્વારા ગુણાકાર કરવામાં આવે છે.શૂન્ય ધોરણ આમ 100% ની બરાબર બનાવવામાં આવે છે અને શોષક મૂલ્યો ટકાવારીમાં ટાંકવામાં આવે છે.

=

B ——શોષક ધોરણ (અથવા નમૂના)

B0 ——શોષક શૂન્ય ધોરણ

10.2પ્રમાણભૂત વળાંક

---- પ્રમાણભૂત વળાંક દોરવા માટે: ધોરણોના શોષક મૂલ્યને y-અક્ષ તરીકે લો, એઓઝેડ સ્ટાન્ડર્ડ સોલ્યુશન (ppb) ની સાંદ્રતાના અર્ધ લઘુગણકને x-અક્ષ તરીકે લો.

----દરેક નમૂના (ppb) ની AOZ સાંદ્રતા, જે કેલિબ્રેશન કર્વમાંથી વાંચી શકાય છે, તેને અનુસરવામાં આવતા દરેક નમૂનાના અનુરૂપ મંદન પરિબળ દ્વારા ગુણાકાર કરવામાં આવે છે, અને નમૂનાની વાસ્તવિક સાંદ્રતા પ્રાપ્ત થાય છે.

મહેરબાની કરીને નોંધ કરો:

તમામ ડેટા ઘટાડવા માટે વિશેષ સોફ્ટવેર વિકસાવવામાં આવ્યું છે, જે વિનંતી પર પ્રદાન કરી શકાય છે.

મંદન પરિબળ………………………………………..……2

10.સંવેદનશીલતા, ચોકસાઈ અને ચોકસાઈ

સંવેદનશીલતા: 0.025ppb

તપાસ મર્યાદા:

પેશી (સ્નાયુ, યકૃત) ………………………… 0.1ppb

મધ ------------------------------------------------- -0.1ppb

ચોકસાઈ:

પશુ પેશી (સ્નાયુ અને યકૃત) ………………………100±20%

મધ ………………………………………………… 100±20%

ચોકસાઇ:ELISA કિટનું CV 10% કરતા ઓછું છે.

11.નોટિસ

12.1 ધોરણો અને નમૂનાઓ માટે મેળવેલા શોષક મૂલ્યોના સરેરાશ મૂલ્યોમાં ઘટાડો થશે જો રીએજન્ટ્સ અને નમૂનાઓ ઓરડાના તાપમાને (20-25℃) પર નિયમન કરવામાં આવ્યાં નથી.

12.2 અસફળ પુનઃઉત્પાદનક્ષમતાને ટાળવા અને માઇક્રોવેલ ધારકને ટેપ કર્યા પછી તરત જ આગળનું પગલું ચલાવવા માટે પગલાંઓ વચ્ચે માઇક્રોવેલને સૂકવવા ન દો.

12.3 ઉપયોગ કરતા પહેલા દરેક રીએજન્ટને હળવા હાથે હલાવો.

12.4 તમારી ત્વચાને સ્ટોપ સોલ્યુશનથી દૂર રાખો કારણ કે તે 0.5MH છે₂SO₄ઉકેલ

12.5 જૂની કીટનો ઉપયોગ કરશો નહીં.વિવિધ બેચના રીએજન્ટ્સનું વિનિમય કરશો નહીં, નહીં તો તે સંવેદનશીલતા ગુમાવશે.

12.6 સ્ટોરેજની સ્થિતિ: ELISA કિટ્સને 2-8℃ પર રાખો, ફ્રીઝ ન કરો.બાકીની માઈક્રોવેલ પ્લેટોને સીલ કરો, તમામ ઇન્ક્યુબેશન દરમિયાન સીધો સૂર્યપ્રકાશ ટાળો.માઇક્રોટાઇટર પ્લેટોને આવરી લેવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે.

12.7 સબસ્ટ્રેટ સોલ્યુશન જો રંગ કરે તો તેને છોડી દેવો જોઈએ.જો શૂન્ય ધોરણનું શોષક મૂલ્ય (450/630nm) 0.5 (A450nm<0.5) કરતાં ઓછું હોય તો રીએજન્ટ્સ બગડી શકે છે.

12.8 સબસ્ટ્રેટ સોલ્યુશન ઉમેર્યા પછી રંગીન પ્રતિક્રિયાને 15 મિનિટની જરૂર છે;જો રંગ નક્કી કરવા માટે ખૂબ જ હળવો હોય તો તમે સેવનનો સમય 20 મિનિટ કે તેથી વધુ લંબાવી શકો છો., 25 મિનિટથી વધુ નહીં. તેનાથી વિપરિત, ઉષ્ણતામાન સમયને યોગ્ય રીતે ટૂંકો કરો.

12.9 શ્રેષ્ઠ પ્રતિક્રિયા તાપમાન 25℃ છે.ઉચ્ચ અથવા નીચું તાપમાન સંવેદનશીલતા અને શોષક મૂલ્યોમાં ફેરફાર તરફ દોરી જશે.

12.સંગ્રહ સ્થિતિ અને સંગ્રહ સમયગાળો

સંગ્રહ સ્થિતિ: 2-8℃.

સંગ્રહ સમયગાળો: 12 મહિના.