Furazolidone metabolite (AOZ) ၏ Quantitative Analysis for Competitive Enzyme Immunoassay Kit
- ၁။နောက်ခံ
Nitrofurans များသည် ၎င်း၏ အစွမ်းထက်သော ဘက်တီးရီးယားနှင့် ဆေးဝါးထုတ်လုပ်ရေးဆိုင်ရာ ဂုဏ်သတ္တိများအတွက် တိရိစ္ဆာန်များ ထုတ်လုပ်မှုတွင် မကြာခဏ အသုံးပြုလေ့ရှိသော ဓာတု ကျယ်ပြန့်ရောင်စဉ် ပဋိဇီဝဆေးများ ဖြစ်သည်။၎င်းတို့ကို ဝက်၊ ကြက်နှင့် ရေထွက်ပစ္စည်း ထုတ်လုပ်မှုတွင် ကြီးထွားမြှင့်တင်သူများအဖြစ်လည်း အသုံးပြုခဲ့သည်။ဓာတ်ခွဲခန်းတိရစ္ဆာန်များနှင့် ရေရှည်လေ့လာမှုများတွင် မိခင်ဆေးဝါးများနှင့် ၎င်းတို့၏ ဇီဝဖြစ်စဉ်များသည် ကင်ဆာဖြစ်စေနိုင်သော လက္ခဏာများနှင့် ဗီဇပြောင်းလဲခြင်းလက္ခဏာများကို ပြသခဲ့ကြောင်း ညွှန်ပြခဲ့သည်။ယင်းကြောင့် အစားအစာထုတ်လုပ်ရာတွင် အသုံးပြုသည့် တိရစ္ဆာန်များကို ကုသရန်အတွက် နိုက်ထရိုဖူရန်များကို တားမြစ်ခဲ့သည်။nitrofuran ဆေးဝါးများ furaltadone၊ nitrofurantoin နှင့် nitrofurazone တို့ကို EU တွင် ၁၉၉၃ ခုနှစ်တွင် အစားအသောက် တိရစ္ဆာန်ထုတ်လုပ်မှုတွင် အသုံးပြုခြင်းမှ တားမြစ်ခဲ့ပြီး furazolidone ကို ၁၉၉၅ ခုနှစ်တွင် တားမြစ်ခဲ့သည်။
nitrofuran ဆေးဝါးအကြွင်းအကျန်များကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းသည် nitrofuran ပင်မဆေးများ၏ တစ်သျှူးများ ချည်နှောင်ထားသော metabolites များကို ရှာဖွေတွေ့ရှိမှုအပေါ် အခြေခံရန် လိုအပ်သည်။မိခင်ဆေးများသည် အလွန်လျင်မြန်စွာ ဇီဝဖြစ်စဉ်ကို ချေဖျက်နိုင်ပြီး တစ်ရှူးများတွင် ချည်ထားသော nitrofuran ဇီဝဖြစ်စဉ်များကို အချိန်ကြာမြင့်စွာ ထိန်းသိမ်းထားသောကြောင့် Furazolidone metabolite (AOZ)၊ Furaltadone metabolite (AMOZ) အပါအဝင် nitrofuran များကို အလွဲသုံးစားလုပ်ခြင်းကို ဖော်ထုတ်ရာတွင် ပစ်မှတ်အဖြစ် အသုံးပြုပါသည်။ ), Nitrofurantoin metabolite (AHD) နှင့် Nitrofurazone metabolite (SEM)။
AOZ-အကြွင်းအကျန်များကို LC-MS သို့မဟုတ် LC-MS/MS က အများဆုံး ဆုံးဖြတ်သည်။Enzyme immunoassays သည် chromatographic နည်းလမ်းများနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက အာရုံခံနိုင်စွမ်း၊ ထောက်လှမ်းမှု ကန့်သတ်ချက်၊ နည်းပညာဆိုင်ရာ စက်ကိရိယာများနှင့် အချိန်လိုအပ်ချက်တို့နှင့် စပ်လျဉ်းသည့် အားသာချက်များကို ပြသသည်။(အချိန် ၄၅ မိနစ်)
- ၂။စာမေးပွဲမူလ
ဤ ELISA ကိရိယာအစုံသည် သွယ်ဝိုက်ယှဉ်ပြိုင်နိုင်သောအင်ဇိုင်း immunoassay ၏နိယာမအပေါ်အခြေခံ၍ AOZ ကိုရှာဖွေရန်ဒီဇိုင်းပြုလုပ်ထားသည်။မိုက်ခရိုတီတာရေတွင်းများကို ဖမ်းယူ BSA-ချိတ်ဆက်ထားသော အန်တီဂျင်ဖြင့် ဖုံးအုပ်ထားသည်။နမူနာတွင် AOZ သည် ထည့်သွင်းထားသော ပဋိပစ္စည်းအတွက် microtiter plate ပေါ်ရှိ antigen နှင့် ယှဉ်ပြိုင်သည်။အင်ဇိုင်းပေါင်းစပ်ပြီးနောက်၊ chromogenic substrate ကိုအသုံးပြုပြီး signal ကို spectrophotometer ဖြင့်တိုင်းတာသည်။စုပ်ယူမှုသည် နမူနာရှိ AOZ ပြင်းအားနှင့် ပြောင်းပြန်အချိုးကျသည်။
- ၃။လျှောက်လွှာများ
ဤကိရိယာကို AOZ အကြွင်းအကျန်များ၏ အရေအတွက်နှင့် အရည်အသွေးပိုင်းခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုတွင် အသုံးပြုနိုင်သည်။anima တစ်ရှူးများ(ကြွက်သား၊ အသည်းစသည်) ပျားရည်။
- ၄။အပြန်အလှန်တုံ့ပြန်မှုများ
Furazolidone metabolite (AOZ) …………………………..100%
Furaltadone ဇီဝဖြစ်စဉ် (AMOZ) ……………………<0.1%
Nitrofurantoin ဇီဝဖြစ်စဉ် (AHD) ……………………<0.1%
Nitrofurazone ဇီဝဖြစ်စဉ် (SEM) …………………………………<0.1%
Furazolidone ………………………………………………………… ၁၆.၃ ရာခိုင်နှုန်း
Furaltadone ……………………………………………….<1%
Nitrofurantoin ……………………………………………….…<1%
Nitrofurazone ………………………………………………<1%
- ၅။လိုအပ်သောပစ္စည်းများ
၅.၁ပစ္စည်းတွေ
---- Microtiter plate spectrophotometer (450nm/630nm)
---- Rotary evaporator သို့မဟုတ် နိုက်ထရိုဂျင် အခြောက်ခံကိရိယာများ
----Homogenizer / အစာအိမ်
---- Shaker
---- Vortex ရောနှောစက်
---- အာရုံစူးစိုက်မှု
---- ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာလက်ကျန် (inductance: 0.01g)
---- Graduated pipette: 10ml
---- ရော်ဘာပိုက်လုံး မီးသီး
---- Volumetric ဓာတ်ဘူး: 100ml
---- ဖန်ဘူး: 10ml
----Polystyrene centrifuge tube: 2ml၊ 50ml
----Micropipettes: 20ul-200ul၊ 100ul-1000ul၊
250ul-multipipette
၅.၂ဓာတ်ပစ္စည်းများ
---- Ethyl acetate (AR)
----n-hexane (သို့မဟုတ် n-heptane) (AR)
---- Dipotassium ဟိုက်ဒရိုဂျင် ဖော့စဖိတ် trihydrate
(K2HPO4.3H2O) (AR)
---- စုစည်းထားသော ဟိုက်ဒရိုကလိုရစ်အက်ဆစ် (HCl, AR)
----- မီသနော
---- ဆိုဒီယမ်ဟိုက်ဒရောဆိုဒ် (NaOH၊ AR)
---- Deionized ရေ
- ၆။Kit အစိတ်အပိုင်းများ
l အန်တီဂျင်ဖြင့် ဖုံးအုပ်ထားသော Microtiter ပန်းကန်၊ ရေတွင်း ၉၆ ခု
l စံဖြေရှင်းချက် (၆ ပုလင်း၊ ၁ မီလီလီတာ/ပုလင်း)
0ppb၊0.025ppb၊0.075ppb၊0.225ppb၊0.675ppb၊2.025ppb
l Spiking standard control : (1ml/ပုလင်း) .......100ppb
l စုစည်းထားသော အင်ဇိုင်းပေါင်း 1ml ...... အနီထုပ်
l Enzyme conjugate diluents 10ml………..အစိမ်းထုပ်
l Substrate A 7ml ………………………………………………….. အဖြူထုပ်
l Substrate B 7ml ………………………………………………….….. အနီထုပ်
l Stop solution 7ml………………………………… အဝါရောင်ထုပ်
l 20× စုစည်းထားသော လက်ဆေးရည် 40ml
………………………………………………………… ပွင့်လင်းထုပ်
l 2× စုစည်းထားသော ထုတ်ယူမှုဖြေရှင်းချက် 60ml….အပြာထုပ်
l 2-Nitrobenzaldehyde 15.1mg………………အဖြူထုပ်
- ၇။ဓါတ်ကူပစ္စည်း အဘိတ်
ဖြေရှင်းချက် 1: ဆင်းသက်သော ဓာတ်ပစ္စည်းများ-
Nitrobenzaldehyde 2-Nitrobenzaldehyde ပါရှိသော မီသနော 10ml ကို ပုလင်းထဲသို့ ထည့်ပြီး အရည်ဖျော်ပါ။(10mM ၏အာရုံစူးစိုက်မှုမှာ) ။
ဖြေရှင်းချက် 2: 0.1MK2HPO4ဖြေရှင်းချက်-
အလေးချိန် 22.8g K2HPO4.3H2O to 1L of deionized water ကို အရည်ဖျော်ပါ။
ဖြေရှင်းချက် 3: 1M HCl ဖြေရှင်းချက်
8.3ml စုစည်းထားသော ဟိုက်ဒရိုကလိုရစ်အက်ဆစ် အရည်ပျော် 100ml သို့ deionized ရေနှင့်။
ဖြေရှင်းချက် 4-1M NaOH ဖြေရှင်းချက်
4g NaOH ကို 100ml deionized ရေဖြင့် အရည်ဖျော်ပါ။
ဖြေရှင်းချက် ၅: ထုတ်ယူမှုဖြေရှင်းချက်
ထုထည် အချိုးအစား 1:1 တွင် 2× စုစည်းထားသော ထုတ်ယူရည်ကို ဒိုင်းယွန်နစ်ရေဖြင့် ရောမွှေပါ။နမူနာထုတ်ယူရန်အတွက် အသုံးပြုမည့် ဤဖြေရှင်းချက်ကို 4 ℃ တွင် 1 လကြာ ထိန်းသိမ်းထားနိုင်သည်။
ဖြေရှင်းချက် 6: လက်ဆေးနည်း
ပန်းကန်ဆေးရန်အတွက် အသုံးပြုမည့် ပမာဏ 1:19 အချိုးအစား 20× ကွန်မြူနတီဆေးရည်ကို ဒိုင်းယွန်ဆန်သောရေဖြင့် ဖျန်းပေးပါ။ဤအရည်ကို 4 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင် 1 လကြာထိန်းသိမ်းထားနိုင်သည်။
- ၈။နမူနာပြင်ဆင်မှုများ
၈.၁လုပ်ငန်းမစမီ သတိပေးချက်များနှင့် ကြိုတင်ကာကွယ်မှုများ
က) စမ်းသပ်မှုတွင် တစ်ကြိမ်တည်း အကြံပြုချက်များကို အသုံးပြုပြီး မတူညီသော ဓာတ်ပစ္စည်းများကို စုပ်ယူသည့်အခါ အကြံပြုချက်များကို ပြောင်းလဲပါ။
ခ) စမ်းသပ်ကိရိယာအားလုံး သန့်ရှင်းကြောင်း သေချာပါစေ။
ဂ) ဆင်းသက်လာသော ဓာတ်ပစ္စည်းများကို 2-8 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင် သုံးလကြာ ထိန်းသိမ်းထားနိုင်သည်။
ဃ) HCl ဖြေရှင်းချက်ကို အခန်းအပူချိန်တွင် ၃ လကြာ ထိန်းသိမ်းထားနိုင်သည်။
င) NaOH ဖြေရှင်းချက်ကို အခန်းအပူချိန်တွင် ၃ လကြာ ထိန်းသိမ်းထားနိုင်သည်။
f) မကုသရသေးသောနမူနာများကို အေးခဲ(-20 ℃);
g) ကုသထားသောနမူနာများကို အမှောင်ထဲတွင် 2-8 ℃ တွင် 24 နာရီကြာ ထိန်းသိမ်းထားနိုင်သည်။
8.2 တိရစ္ဆာန်တစ်ရှူးနှင့် အသည်းနမူနာများ-
---- နမူနာများကို homogenizer ဖြင့် တစ်သားတည်းဖြစ်အောင်ပြုလုပ်ပါ။
---- အလေးချိန် 1.0±0.05g ရှိသော တစ်ရှူးနမူနာကို 50ml polystyrene centrifuge ပြွန်ထဲသို့ တစ်သားတည်းဖြစ်စေသော အလေးချိန်။4ml deionized water၊ 0.5ml 1M HCl solution နှင့် 100ul derivative reagent (ဖြေရှင်းချက် 1 ကိုကြည့်ပါ) ထည့်ပါ။2 မိနစ်လောက်လှုပ်ပေးပါ။
---- 37 ℃ ညအိပ် (16 နာရီခန့်);
---- 5ml 0.1MK ထည့်ပါ။2HPO4 (ဖြေရှင်းချက်2), 0.4ml 1M NaOH (၊ဖြေရှင်းချက်4) နှင့် 5ml ethyl acetate ။30 နှစ်များအတွက်ပြင်းထန်စွာလှုပ်ခါ;
---- အခန်းအပူချိန် (20-25 ℃) တွင် 10 မိနစ်၊ အနည်းဆုံး 3000g၊
---- နိုက်ထရိုဂျင်ဓာတ်ငွေ့ သို့မဟုတ် 50-60 ℃ နိုက်ထရိုဂျင်ဓာတ်ငွေ့ သို့မဟုတ် rotary evaporator ဖြင့် အခြောက်ခံသော 10ml သန့်ရှင်းသောဖန်ပြွန်တစ်ခုထဲသို့ 2.5ml ၏ 2.5ml ကိုယူပါ။
---- အခြောက်လှန်းထားသော အကြွင်းအကျန်များကို 1ml n-hexane (သို့မဟုတ် n- heptane) ဖြင့် နှစ် 30 နှစ်ကြာ ရေပြန်ရည် 1ml ထုတ်ယူပြီး ပေါင်းထည့်ပါ။ဖြေရှင်းချက်5) vortex 1min, လုံးဝရောမွှေပါ။
---- အခန်းအပူချိန်တွင် အာရုံစူးစိုက်မှု (20-25)oဂ) 5 မိနစ်အတွက်အနည်းဆုံး 3000g;
---- supernatant အော်ဂဲနစ်အဆင့်ကို ဖယ်ရှားပါ။စစ်ဆေးမှုအတွက် ဆပ်စထရိတ်ရေ၏ 50μl ကိုယူပါ။
8.4 ပျားရည်
---- 1.0±0.05g အလေးချိန် 50ml polystyrene centrifuge ပြွန်ထဲသို့ တစ်သားတည်းဖြစ်စေသော ပျားရည်နမူနာကို အလေးချိန်၊
---- 4ml deionized ရေ 0.5ml 1M HCl (ဖြေရှင်းချက်3) နှင့် 100μl ဆင်းသက်လာသော ဓာတ်ပစ္စည်းများ (ဖြေရှင်းချက်1);လုံးဝ 2 မိနစ်လှုပ်ခါ;
---- 37 ℃ ညအိပ် (16 နာရီခန့်);
---- 5ml 0.1MK ထည့်ပါ။2HPO4 (ဖြေရှင်းချက်2), 0.4ml 1M NaOH (၊ဖြေရှင်းချက်4) နှင့် 5ml ethyl acetate, 30 နှစ်များအတွက်ပြင်းထန်စွာလှုပ်ခါ;
---- အခန်းအပူချိန် (20-25 ℃) တွင် 10 မိနစ်၊ အနည်းဆုံး 3000g၊
---- 50-60 ℃ နိုက်ထရိုဂျင်ဓာတ်ငွေ့ သို့မဟုတ် rotary evaporator ဖြင့် အခြောက်ခံသော 10ml သန့်ရှင်းသောဖန်ပြွန်တစ်ခုထဲသို့ 2.5ml ကို supernatant အော်ဂဲနစ်အဆင့်ကို ယူပါ။
----အခြောက်အကြွင်းကို 1ml n-hexane (သို့မဟုတ် n- heptane) ဖြင့် နှစ် 30 နှစ်ကြာ ရေပြန်ရည် 1ml ထုတ်ယူပြီး ပေါင်းထည့်ပါ။ဖြေရှင်းချက်5) vortex 1min, လုံးဝရောမွှေပါ။
---- အခန်းအပူချိန်တွင် အာရုံစူးစိုက်မှု (20-25)oဂ) 10 မိနစ်အတွက်အနည်းဆုံး 3000g;
---- supernatant အော်ဂဲနစ်အဆင့်ကို ဖယ်ရှားပါ။စစ်ဆေးမှုအတွက် ဆပ်စထရိတ်ရေ၏ 50μl ကိုယူပါ။
- ၉။စစ်ဆေးမှုလုပ်ငန်းစဉ်
၉.၁မစစ်ဆေးမီ သတိထားပါ။
9.1.1 ဓာတ်ပစ္စည်းများနှင့် မိုက်ခရိုဝဲလ်များအားလုံးကို အခန်းအပူချိန် (20-25 ℃) တွင် သေချာပါစေ။
9.1.2 အသုံးပြုပြီးနောက် ကျန်ရှိသော ဓါတ်အားလုံးကို 2-8 ℃ သို့ ပြန်ပေးပါ။
9.1.3 မိုက်ခရိုဝဲလ်များကို မှန်ကန်စွာဆေးကြောခြင်းသည် စစ်ဆေးမှုလုပ်ငန်းစဉ်တွင် အရေးကြီးသောအဆင့်တစ်ခုဖြစ်သည်။၎င်းသည် ELISA ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု၏ မျိုးပွားနိုင်စွမ်းအတွက် အရေးကြီးသောအချက်ဖြစ်သည်။
9.1.4 ပေါက်ဖွားစဉ်အတွင်း အလင်းရောင်ကို ရှောင်ကြဉ်ပြီး မိုက်ခရိုဝဲလ်များကို ဖုံးအုပ်ပါ။
9.2 စစ်ဆေးမှုအဆင့်များ
9.2.1 မိနစ် 30 ကျော်ကြာ အခန်းအပူချိန် (20-25 ℃) တွင် ဓါတ်ကူပစ္စည်းအားလုံးကို ဖယ်ထုတ်ပြီး အသုံးမပြုမီ တစ်သားတည်းဖြစ်စေပါ။
9.2.2 လိုအပ်သော မိုက်ခရိုဝဲလ်များကိုထုတ်ယူပြီး ကျန်ကြွင်းသောအရာများကို ဇစ်သော့အိတ်ထဲသို့ 2-8 ℃ ချက်ခြင်းပြန်ပေးပါ။
9.2.3 စုစည်းထားသော လက်ဆေးရည်နှင့် စုစည်းထားသော ထုတ်ယူသည့်အရည်ကို အသုံးမပြုမီ အခန်းအပူချိန်တွင် ပြန်လည်နွေးထွေးစေသင့်သည်။
၉.၂.၄နံပါတ်-microwell ရာထူးတိုင်းကို ရေတွက်ပြီး စံနှုန်းများနှင့် နမူနာများအားလုံးကို ပွားနေရပါမည်။စံချိန်စံညွှန်းများနှင့် နမူနာရာထူးများကို မှတ်တမ်းတင်ပါ။
၉.၂.၅စုစည်းထားသော ပဋိပစ္စည်းဖြေရှင်းချက်ကို ရောချခြင်း။: စုစည်းထားသော အင်ဇိုင်းဖြေရှင်းချက်ကို 1:10 (1 ခေါက်စုစည်းထားသော အင်ဇိုင်းဖြေရှင်းချက်- 10 ခေါက် အင်ဇိုင်း conjugate diluents) ၏ ထုထည်အချိုးတွင် အင်ဇိုင်း conjugate diluents နှင့် အရော။
၉.၂.၆စံဖြေရှင်းချက်/နမူနာနှင့် အင်ဇိုင်းပေါင်းစပ်ဖြေရှင်းချက်ထည့်ပါ။: သက်ဆိုင်ရာရေတွင်းများတွင် စံဖြေရှင်းချက် 50µl သို့မဟုတ် ပြင်ဆင်ထားသောနမူနာကိုထည့်ပါ၊ 50µl အင်ဇိုင်းပေါင်းစပ်ဖြေရှင်းချက်ထည့်ပါ။ပန်းကန်ပြားကို လက်ဖြင့်လှုပ်ခြင်းဖြင့် ညင်သာစွာရောမွှေပြီး 25 ℃ တွင် မိနစ် 30 ကြာ အဖုံးအုပ်ထားပါ။
၉.၂.၇ရေဆေးပါ။: အဖုံးကို ညင်သာစွာဖယ်ရှားပြီး ရေတွင်းထဲကအရည်ကို လောင်းချပြီး 250µl ဖျော်ရည်ဖြင့် မိုက်ခရိုဝဲလ်များကို ဆေးကြောပါ (ဖြေရှင်းချက်6) 10s ၏ကြားတွင် 4-5 ကြိမ်။ကျန်ရှိသောရေကို စုပ်စက္ကူဖြင့် စုပ်ယူပါ (ကျန်သောလေပူဖောင်းများကို အသုံးမပြုသော ထိပ်ဖျားဖြင့် ဖယ်ရှားနိုင်သည်)။
၉.၂.၈အရောင်ခြယ်ခြင်း။: ရေတွင်းတစ်ခုစီတွင် 50µl ဆပ်ပြာရည် A နှင့် 50ul အလွှာ B ကို ထည့်ပါ။ပန်းကန်ပြားကို လက်ဖြင့်လှုပ်ပြီး ညင်သာစွာရောမွှေပြီး အဖုံးဖုံးဖြင့် 25 ℃ တွင် 15 မိနစ်ကြာ မီးဖုတ်ပါ (12.8 ကိုကြည့်ပါ)။
၉.၂.၁၁တိုင်းတာသည်။- ရေတွင်းတစ်ခုစီတွင် ရပ်တန့်ဖြေရှင်းချက် 50µl ကိုထည့်ပါ။ပန်းကန်ပြားကို ကိုယ်တိုင်လှုပ်ပြီး ညင်သာစွာ ရောမွှေပြီး စုပ်ယူမှုကို 450nm ဖြင့် တိုင်းတာခြင်း (၎င်းသည် လှိုင်းအလျား 450/630nm ၏ လှိုင်းအလျားနှစ်ခုဖြင့် တိုင်းတာရန် အကြံပြုထားသည်။ stop solution ပေါင်းထည့်ပြီးနောက် 5 မိနစ်အတွင်း ရလဒ်ကို ဖတ်ပါ။)
10 ရလဒ်များ
၁၀.၁ရာခိုင်နှုန်းစုပ်ယူမှု
စံနှုန်းများအတွက် ရရှိသော စုပ်ယူမှုတန်ဖိုးများ၏ ပျမ်းမျှတန်ဖိုးများနှင့် နမူနာများကို ပထမစံနှုန်း (သုညစံ) ၏ စုပ်ယူမှုတန်ဖိုးဖြင့် ပိုင်းခြားပြီး 100% ဖြင့် မြှောက်ထားသည်။ထို့ကြောင့် သုညစံနှုန်းကို 100% နှင့် ညီစေပြီး စုပ်ယူမှုတန်ဖိုးများကို ရာခိုင်နှုန်းများဖြင့် ကိုးကားထားသည်။
=
B —စုပ်ယူမှုစံနှုန်း (သို့မဟုတ်နမူနာ)
B0 — စုပ်ယူမှု သုညစံ
၁၀.၂Standard Curve
---- စံမျဉ်းကွေးတစ်ခုဆွဲရန်- y-ဝင်ရိုးအဖြစ် စံနှုန်းများ၏ စုပ်ယူမှုတန်ဖိုး၊ AOZ စံအဖြေ (ppb) ၏ အာရုံစူးစိုက်မှု၏ တစ်ပိုင်းလော့ဂရစ်သမ်ကို x-ဝင်ရိုးအဖြစ် ယူပါ။
---- နမူနာတစ်ခုစီ၏ AOZ အာရုံစူးစိုက်မှု (ppb) ကို ချိန်ညှိမျဉ်းကွေးမှ ဖတ်နိုင်သော AOZ အာရုံစူးစိုက်မှုသည် နမူနာတစ်ခုစီ၏ သက်ဆိုင်ရာ dilution factor ဖြင့် မြှောက်ပြီး နမူနာ၏ အမှန်တကယ်စူးစိုက်မှုကို ရရှိသည်။
သတိပြုပါ-
တောင်းဆိုမှုအရ ပံ့ပိုးပေးနိုင်သည့် အချက်အလက်အားလုံးကို လျှော့ချရန်အတွက် အထူးဆော့ဖ်ဝဲကို တီထွင်ထားပါသည်။
Dilution factor…………………………………………..…… ၂
၁၀။အာရုံခံနိုင်စွမ်း၊ တိကျမှုနှင့် တိကျမှု
ထိလွယ်ရှလွယ်: 0.025ppb
ထောက်လှမ်းကန့်သတ်ချက်-
တစ်ရှူး (ကြွက်သား၊ အသည်း)…………………………0.1ppb
ဟန်နီ -------------------------------------------------- -0.1ppb
တိကျမှု-
တိရိစ္ဆာန်တစ်သျှူး (ကြွက်သားနှင့် အသည်း) ……………………100±20%
ဟန်နီ ………………………………..………………. 100±20%
တိကျမှု-ELISA kit ၏ CV သည် 10% ထက်နည်းသည်။
၁၁။အသိပေးစာ
12.1 စံချိန်စံညွှန်းများအတွက် ရရှိသော စုပ်ယူမှုတန်ဖိုးများနှင့် နမူနာများကို အခန်းအပူချိန် (20-25 ℃) တွင် ဓါတ်ပြုခြင်းနှင့် နမူနာများကို ထိန်းညှိခြင်းမပြုပါက ပျမ်းမျှတန်ဖိုးများ လျော့ကျသွားမည်ဖြစ်သည်။
12.2 မအောင်မြင်သော မျိုးပွားမှုကို ရှောင်ရှားရန်နှင့် microwells ကိုင်ဆောင်ထားသူကို နှိပ်ပြီးနောက် နောက်တဆင့်ကို ချက်ချင်းလုပ်ဆောင်ရန် မိုက်ခရိုဝဲလ်များကို အဆင့်များကြားတွင် ခြောက်အောင် ခွင့်မပြုပါနှင့်။
12.3 အသုံးမပြုမီ ဓါတ်ပစ္စည်းတစ်ခုစီကို ညင်သာစွာလှုပ်ယမ်းပါ။
12.4 ၎င်းသည် 0.5MH ဖြစ်သောကြောင့် သင့်အရေပြားကို ရပ်တန့်ထားသော အဖြေနှင့် ဝေးဝေးထားပါ။2SO4ဖြေရှင်းချက်။
12.5 ကိရိယာအစုံအလင်ကို ခေတ်မမီပါနှင့်။မတူညီသောအသုတ်များ၏ ဓာတ်ပစ္စည်းများကို မလဲလှယ်ပါနှင့်၊ သို့မဟုတ်ပါက sensitivity ကျဆင်းသွားမည်ဖြစ်သည်။
12.6 သိုလှောင်မှုအခြေအနေ- ELISA kits များကို 2-8 ℃ တွင် ထားပါ၊ အေးခဲမနေပါနှင့်။အလုံပိတ် မိုက်ခရိုဝဲလ်ပြားများကို အလုံပိတ်၊ ပေါက်ဖွားစဉ်အတွင်း နေရောင်ခြည် တည့်တည့်ကို ရှောင်ပါ။မိုက်ခရိုတီတာပြားများကို ဖုံးအုပ်ရန် အကြံပြုထားသည်။
12.7 အရောင်ပြောင်းပါက ဆပ်ပြာရည်ကို စွန့်ပစ်သင့်သည်။သုညစံ၏ စုပ်ယူမှုတန်ဖိုး (450/630nm) သည် 0.5 (A450nm<0.5) ထက်နည်းပါက ဓာတ်ပစ္စည်းများသည် ယိုယွင်းသွားနိုင်သည်။
12.8 အရောင်အသွေး တုံ့ပြန်မှု သည် ဆပ်ပြာရည် ပေါင်းထည့်ပြီးနောက် 15 မိနစ် လိုအပ်သည်။အရောင်ဖျော့လွန်းပါက ပေါက်ဖွားချိန်ကို မိနစ် 20 သို့မဟုတ် ထို့ထက်ပို၍ ရှည်နိုင်သည်။၊ 25 မိနစ်ထက် မကျော်လွန်ဘဲ ပေါက်ဖွားချိန်ကို စနစ်တကျ တိုစေပါ။
12.9 အကောင်းဆုံးတုံ့ပြန်မှုအပူချိန် 25 ℃။မြင့်မားသော သို့မဟုတ် နိမ့်သော အပူချိန်သည် အာရုံခံနိုင်စွမ်းနှင့် စုပ်ယူမှုတန်ဖိုးများ အပြောင်းအလဲများဆီသို့ ဦးတည်သွားမည်ဖြစ်သည်။
၁၂။သိုလှောင်မှုအခြေအနေနှင့် သိုလှောင်မှုကာလ
သိုလှောင်မှုအခြေအနေ: 2-8 ℃။
သိုလှောင်မှုကာလ: 12 လ.