ਫੁਰਾਜ਼ੋਲਿਡੋਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ (AOZ) ਦੇ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਪ੍ਰਤੀਯੋਗੀ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਇਮਯੂਨੋਸੈਸ ਕਿੱਟ
- 1.ਪਿਛੋਕੜ
ਨਾਈਟਰੋਫੁਰਨਸ ਸਿੰਥੈਟਿਕ ਵਿਆਪਕ-ਸਪੈਕਟ੍ਰਮ ਐਂਟੀਬਾਇਓਟਿਕਸ ਹਨ, ਜੋ ਇਸਦੇ ਸ਼ਾਨਦਾਰ ਐਂਟੀਬੈਕਟੀਰੀਅਲ ਅਤੇ ਫਾਰਮਾਕੋਕਿਨੇਟਿਕ ਗੁਣਾਂ ਲਈ ਅਕਸਰ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਉਤਪਾਦਨ ਵਿੱਚ ਕੰਮ ਕਰਦੇ ਹਨ।ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਸੂਰ, ਪੋਲਟਰੀ ਅਤੇ ਜਲਜੀ ਉਤਪਾਦਨ ਵਿੱਚ ਵਿਕਾਸ ਪ੍ਰਮੋਟਰਾਂ ਵਜੋਂ ਵੀ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਸੀ।ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਦੇ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਦੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਵਿੱਚ ਸੰਕੇਤ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਹੈ ਕਿ ਮਾਤਾ-ਪਿਤਾ ਦੀਆਂ ਦਵਾਈਆਂ ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਦੇ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਕਾਰਸੀਨੋਜਨਿਕ ਅਤੇ ਪਰਿਵਰਤਨਸ਼ੀਲ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਨਾਲ ਭੋਜਨ ਉਤਪਾਦਨ ਲਈ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਇਲਾਜ ਲਈ ਨਾਈਟ੍ਰੋਫਿਊਰਨ ਦੀ ਮਨਾਹੀ ਹੋ ਗਈ ਹੈ।ਨਾਈਟ੍ਰੋਫੁਰਾਨ ਡਰੱਗਜ਼ ਫੁਰਲਟਾਡੋਨ, ਨਾਈਟ੍ਰੋਫੂਰੈਂਟੋਇਨ ਅਤੇ ਨਾਈਟਰੋਫਿਊਰਾਜ਼ੋਨ ਨੂੰ 1993 ਵਿੱਚ ਈਯੂ ਵਿੱਚ ਭੋਜਨ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਉਤਪਾਦਨ ਵਿੱਚ ਵਰਤਣ 'ਤੇ ਪਾਬੰਦੀ ਲਗਾਈ ਗਈ ਸੀ, ਅਤੇ 1995 ਵਿੱਚ ਫੁਰਾਜ਼ੋਲੀਡੋਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੀ ਮਨਾਹੀ ਸੀ।
ਨਾਈਟ੍ਰੋਫਿਊਰਨ ਦਵਾਈਆਂ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨਾਈਟ੍ਰੋਫੁਰਾਨ ਦੀਆਂ ਮੂਲ ਦਵਾਈਆਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ-ਬਾਊਂਡ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੀ ਖੋਜ 'ਤੇ ਆਧਾਰਿਤ ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਕਿਉਂਕਿ ਮੂਲ ਦਵਾਈਆਂ ਬਹੁਤ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਪਾਚਕ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ, ਅਤੇ ਟਿਸ਼ੂ ਨਾਲ ਜੁੜੇ ਨਾਈਟ੍ਰੋਫੁਰਾਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਬਰਕਰਾਰ ਰਹਿਣਗੇ, ਇਹਨਾਂ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਨੂੰ ਨਾਈਟ੍ਰੋਫੁਰਾਨ ਦੀ ਦੁਰਵਰਤੋਂ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਟੀਚੇ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਫੁਰਾਜ਼ੋਲਿਡੋਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ (ਏਓਜ਼), ਫੁਰਾਲਟਾਡੋਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ (ਏਐਮਓਜ਼ੈਡ) ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ। ), ਨਾਈਟਰੋਫੁਰੈਂਟੋਇਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ (ਏਐਚਡੀ) ਅਤੇ ਨਾਈਟਰੋਫੁਰਜ਼ੋਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ (ਐਸਈਐਮ)।
AOZ- ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਨੂੰ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ LC-MS ਜਾਂ LC-MS/MS ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿਚ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਇਮਯੂਨੋਏਸੇਸ, ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ, ਖੋਜ ਸੀਮਾ, ਤਕਨੀਕੀ ਉਪਕਰਣ ਅਤੇ ਸਮੇਂ ਦੀ ਲੋੜ ਦੇ ਸੰਬੰਧ ਵਿਚ ਕਾਫ਼ੀ ਫਾਇਦੇ ਦਿਖਾਉਂਦੇ ਹਨ।(ਸਮਾਂ ਲਾਗਤ: 45 ਮਿੰਟ)
- 2.ਟੈਸਟ ਦਾ ਸਿਧਾਂਤ
ਇਹ ELISA ਕਿੱਟ ਅਸਿੱਧੇ-ਮੁਕਾਬਲੇ ਵਾਲੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਇਮਯੂਨੋਐਸੇ ਦੇ ਸਿਧਾਂਤ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ AOZ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ।ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਾਈਟਰ ਖੂਹ ਕੈਪਚਰ BSA-ਲਿੰਕਡ ਐਂਟੀਜੇਨ ਨਾਲ ਲੇਪ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ AOZ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਲਈ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਾਈਟਰ ਪਲੇਟ 'ਤੇ ਕੋਟ ਕੀਤੇ ਐਂਟੀਜੇਨ ਨਾਲ ਮੁਕਾਬਲਾ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਕੰਜੂਗੇਟ ਦੇ ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਕ੍ਰੋਮੋਜਨਿਕ ਸਬਸਟਰੇਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਸਿਗਨਲ ਨੂੰ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ ਦੁਆਰਾ ਮਾਪਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਸਮਾਈ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ AOZ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਉਲਟ ਅਨੁਪਾਤੀ ਹੈ।
- 3.ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ
ਇਸ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ AOZ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਦੇ ਗਿਣਾਤਮਕ ਅਤੇ ਗੁਣਾਤਮਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਵਿੱਚ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਐਨੀਮਾ ਟਿਸ਼ੂ(ਮਾਸਪੇਸ਼ੀ, ਜਿਗਰ ਆਦਿ), ਸ਼ਹਿਦ.
- 4.ਅੰਤਰ-ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ
ਫੁਰਾਜ਼ੋਲੀਡੋਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ (AOZ)………………………..100%
ਫੁਰਲਟਾਡੋਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ (AMOZ)………………………<0.1%
ਨਾਈਟ੍ਰੋਫੁਰੈਂਟੋਇਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ (ਏਐਚਡੀ)………………………<0.1%
ਨਾਈਟਰੋਫਿਊਰਾਜ਼ੋਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ (SEM)………………………………<0.1%
ਫੁਰਾਜ਼ੋਲੀਡੋਨ …………………………………………………… 16.3%
ਫੁਰਲਟਾਡੋਨ …………………………………………………….<1%
ਨਾਈਟ੍ਰੋਫੁਰੈਂਟੋਇਨ………………………………………………………<1%
ਨਾਈਟ੍ਰੋਫਿਊਰਾਜ਼ੋਨ………………………………………………………1%
- 5.ਸਮੱਗਰੀ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ
5.1ਉਪਕਰਨ
----ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਾਈਟਰ ਪਲੇਟ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ (450nm/630nm)
----ਰੋਟਰੀ ਵਾਸ਼ਪੀਕਰਨ ਜਾਂ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਸੁਕਾਉਣ ਵਾਲੇ ਯੰਤਰ
----ਹੋਮੋਜਨਾਈਜ਼ਰ/ਸਟੋਮਾਕਰ
----ਸ਼ੇਕਰ
----ਵੋਰਟੈਕਸ ਮਿਕਸਰ
----ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਜ
---- ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣਾਤਮਕ ਸੰਤੁਲਨ (ਇੰਡਕਟੈਂਸ: 0.01 ਗ੍ਰਾਮ)
---- ਗ੍ਰੈਜੂਏਟਿਡ ਪਾਈਪੇਟ: 10 ਮਿ.ਲੀ
----ਰਬੜ ਪਾਈਪੇਟ ਬਲਬ
---- ਵੌਲਯੂਮੈਟ੍ਰਿਕ ਫਲਾਸਕ: 100 ਮਿ.ਲੀ
---- ਗਲਾਸ ਫਲਾਸਕ: 10 ਮਿ.ਲੀ
----ਪੌਲੀਸਟੀਰੀਨ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬ: 2ml, 50ml
----ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਿਪੇਟਸ: 20ul-200ul, 100ul-1000ul,
250ul-ਮਲਟੀਪਿਪੇਟ
5.2ਰੀਐਜੈਂਟਸ
----ਈਥਾਈਲ ਐਸੀਟੇਟ (AR)
----n-ਹੈਕਸੇਨ (ਜਾਂ n-ਹੇਪਟੇਨ) (AR)
----ਡਿਪੋਟਾਸ਼ੀਅਮ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਫਾਸਫੇਟ ਟ੍ਰਾਈਹਾਈਡਰੇਟ
(K2HPO4.3 ਐੱਚ2ਓ) (ਏਆਰ)
----ਕੇਂਦਰਿਤ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਲੋਰਿਕ ਐਸਿਡ (HCl, AR)
----- ਮਿਥੇਨੌਲ
----ਸੋਡੀਅਮ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸਾਈਡ (NaOH, AR)
---- ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ
- 6.ਕਿੱਟ ਦੇ ਹਿੱਸੇ
l ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਾਈਟਰ ਪਲੇਟ ਐਂਟੀਜੇਨ, 96 ਖੂਹ ਨਾਲ ਲੇਪ ਕੀਤੀ ਗਈ
l ਮਿਆਰੀ ਹੱਲ (6 ਬੋਤਲਾਂ, 1 ਮਿ.ਲੀ./ਬੋਤਲ)
0ppb,0.025ppb,0.075ppb,0.225ppb,0.675ppb,2.025ppb
l ਸਪਾਈਕਿੰਗ ਸਟੈਂਡਰਡ ਕੰਟਰੋਲ: (1 ਮਿ.ਲੀ./ਬੋਤਲ) .......100ppb
l ਕੇਂਦਰਿਤ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਸੰਯੁਕਤ 1 ਮਿ.ਲੀ.......ਲਾਲ ਕੈਪ
l ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਕਨਜੁਗੇਟ ਡਾਇਲੁਐਂਟ 10 ਮਿ.ਲੀ.………..ਗਰੀਨ ਕੈਪ
l ਸਬਸਟਰੇਟ A 7 ਮਿ.ਲੀ.………………………………………….. ਸਫੈਦ ਕੈਪ
l ਸਬਸਟਰੇਟ ਬੀ 7 ਮਿ.ਲੀ.…………………………………………..ਲਾਲ ਕੈਪ
l ਸਟਾਪ ਘੋਲ 7ml……………………………… ਪੀਲੀ ਕੈਪ
l 20×ਕੇਂਦਰਿਤ ਧੋਣ ਦਾ ਹੱਲ 40 ਮਿ.ਲੀ
…………………………………………… ਪਾਰਦਰਸ਼ੀ ਕੈਪ
l 2×ਕੇਂਦਰਿਤ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਹੱਲ 60ml….ਨੀਲੀ ਕੈਪ
l 2-ਨਾਈਟਰੋਬੈਂਜ਼ਲਡੀਹਾਈਡ 15.1mg……………… ਸਫੈਦ ਕੈਪ
- 7.Reagents ਦੀ ਤਿਆਰੀ
ਦਾ ਹੱਲ 1: ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ ਰੀਐਜੈਂਟ:
2-ਨਾਈਟਰੋਬੈਂਜ਼ਲਡੀਹਾਈਡ ਵਾਲੀ ਬੋਤਲ ਵਿੱਚ 10 ਮਿ.ਲੀ. ਮੀਥੇਨੌਲ ਪਾਓ ਅਤੇ ਘੋਲ ਦਿਓ।(10mm ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ 'ਤੇ).
ਦਾ ਹੱਲ 2: 0.1MK2HPO4ਦਾ ਹੱਲ:
ਵਜ਼ਨ 22.8 ਗ੍ਰਾਮ ਕੇ2HPO4.3 ਐੱਚ2O ਤੋਂ 1L ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ ਨੂੰ ਘੁਲਣ ਲਈ।
ਦਾ ਹੱਲ 3: 1M HCl ਦਾ ਹੱਲ
8.3ml ਸੰਘਣਾ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਲੋਰਿਕ ਐਸਿਡ ਨੂੰ ਭੰਗ ਕਰੋ ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ ਨਾਲ 100 ਮਿ.ਲੀ.
ਹੱਲ 4:1M NaOH ਹੱਲ
4g NaOH ਨੂੰ 100ml ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ ਨਾਲ ਘੋਲੋ।
ਹੱਲ 5: ਕੱਢਣ ਦਾ ਹੱਲ:
1:1 ਦੇ ਵਾਲੀਅਮ ਅਨੁਪਾਤ ਵਿੱਚ ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ ਨਾਲ 2×ਕੇਂਦਰਿਤ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਘੋਲ ਨੂੰ ਪਤਲਾ ਕਰੋ।ਇਸ ਘੋਲ ਨੂੰ 4℃ 'ਤੇ 1 ਮਹੀਨੇ ਲਈ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨਮੂਨੇ ਕੱਢਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਵੇਗੀ।
ਦਾ ਹੱਲ 6: ਧੋਣ ਦਾ ਹੱਲ:
1:19 ਦੇ ਵਾਲੀਅਮ ਰਾਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ ਨਾਲ 20×ਕੇਂਦਰਿਤ ਧੋਣ ਵਾਲੇ ਘੋਲ ਨੂੰ ਪਤਲਾ ਕਰੋ, ਜਿਸਦੀ ਵਰਤੋਂ ਪਲੇਟਾਂ ਨੂੰ ਧੋਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਵੇਗੀ।ਇਸ ਪਤਲੇ ਘੋਲ ਨੂੰ 4℃ 'ਤੇ 1 ਮਹੀਨੇ ਲਈ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
- 8.ਨਮੂਨਾ ਤਿਆਰੀਆਂ
8.1ਕਾਰਵਾਈ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਨੋਟਿਸ ਅਤੇ ਸਾਵਧਾਨੀਆਂ:
a) ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਯੋਗ ਵਿੱਚ ਇੱਕ-ਬੰਦ ਸੁਝਾਅ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਰੀਐਜੈਂਟ ਨੂੰ ਜਜ਼ਬ ਕਰਨ ਵੇਲੇ ਸੁਝਾਅ ਬਦਲੋ।
b) ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ ਕਿ ਸਾਰੇ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਯੰਤਰ ਸਾਫ਼ ਹਨ।
c) ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ ਰੀਐਜੈਂਟ ਨੂੰ ਤਿੰਨ ਮਹੀਨਿਆਂ ਲਈ 2-8℃ 'ਤੇ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ;
d) HCl ਘੋਲ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 3 ਮਹੀਨਿਆਂ ਲਈ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਰੱਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ;
e) NaOH ਘੋਲ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 3 ਮਹੀਨਿਆਂ ਲਈ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ;
f) ਇਲਾਜ ਨਾ ਕੀਤੇ ਗਏ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਫ੍ਰੀਜ਼ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ (-20℃);
g) ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਹਨੇਰੇ ਵਿੱਚ 2-8℃ 'ਤੇ 24 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਰੱਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
8.2 ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ ਅਤੇ ਜਿਗਰ ਦੇ ਨਮੂਨੇ:
----ਹੋਮੋਜਨਾਈਜ਼ਰ ਨਾਲ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਸਮਰੂਪ ਕਰੋ;
----ਵੇਜ਼ਨ 1.0±0.05g ਸਮਰੂਪ ਟਿਸ਼ੂ ਨਮੂਨੇ ਦਾ 50ml ਪੋਲੀਸਟੀਰੀਨ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ।4ml ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ, 0.5ml 1M HCl ਘੋਲ ਅਤੇ 100ul ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ ਰੀਐਜੈਂਟ (ਸਾਲ 1 ਦੇਖੋ) ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।ਇਸ ਨੂੰ 2 ਮਿੰਟ ਲਈ ਹਿਲਾਓ।
---- ਰਾਤੋ ਰਾਤ 37℃ 'ਤੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ (ਲਗਭਗ 16 ਘੰਟੇ);
---- 5ml 0.1MK ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ2HPO4 (ਦਾ ਹੱਲ2), 0.4ml 1M NaOH (ਦਾ ਹੱਲ4) ਅਤੇ 5ml ਐਥਾਈਲ ਐਸੀਟੇਟ।30s ਲਈ ਜ਼ੋਰਦਾਰ ਹਿਲਾਓ;
---- 10 ਮਿੰਟ ਲਈ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (20-25℃) 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ, ਘੱਟੋ-ਘੱਟ 3000 ਗ੍ਰਾਮ;
---- ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਆਰਗੈਨਿਕ ਪੜਾਅ ਦੇ 2.5ml ਨੂੰ 10ml ਸਾਫ਼ ਕੱਚ ਦੀ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਲਓ, 50-60℃ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਗੈਸ ਜਾਂ ਰੋਟਰੀ ਈਵੇਪੋਰੇਟਰ ਨਾਲ ਸੁੱਕੋ;
---- ਸੁੱਕੇ ਬਚੇ ਹੋਏ ਹਿੱਸੇ ਨੂੰ 1ml n-hexane (ਜਾਂ n- heptane), 30s ਲਈ vortex ਨਾਲ ਘੋਲ ਦਿਓ, 1ml ਕੱਢਣ ਵਾਲਾ ਘੋਲ ਸ਼ਾਮਿਲ ਕਰੋ (ਦਾ ਹੱਲ5), ਵੋਰਟੈਕਸ 1 ਮਿੰਟ, ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ।
---- ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ (20-25oC) 5 ਮਿੰਟ ਲਈ, ਘੱਟੋ ਘੱਟ 3000 ਗ੍ਰਾਮ;
---- ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਜੈਵਿਕ ਪੜਾਅ ਨੂੰ ਹਟਾਓ;ਪਰਖ ਲਈ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਾਟਰ ਪੜਾਅ ਦਾ 50μl ਲਓ।
੮.੪ ਸ਼ਹਿਦ
----ਇੱਕ 50ml ਪੋਲੀਸਟੀਰੀਨ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਸਮਰੂਪ ਸ਼ਹਿਦ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦਾ 1.0±0.05 ਗ੍ਰਾਮ ਵਜ਼ਨ;
---- 4ml ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ, 0.5ml 1M HCl (ਦਾ ਹੱਲ3) ਅਤੇ 100μl ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ ਰੀਐਜੈਂਟ (ਦਾ ਹੱਲ1);2 ਮਿੰਟ ਲਈ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਿਲਾਓ;
---- ਰਾਤੋ ਰਾਤ 37 ℃ 'ਤੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ (ਲਗਭਗ 16 ਘੰਟੇ);
----5ml 0.1MK ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ2HPO4 (ਦਾ ਹੱਲ2), 0.4ml 1M NaOH (ਦਾ ਹੱਲ4) ਅਤੇ 5ml ਐਥਾਈਲ ਐਸੀਟੇਟ, 30s ਲਈ ਜ਼ੋਰ ਨਾਲ ਹਿਲਾਓ;
----10 ਮਿੰਟ ਲਈ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (20-25℃) 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ, ਘੱਟੋ-ਘੱਟ 3000 ਗ੍ਰਾਮ;
----ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਆਰਗੈਨਿਕ ਪੜਾਅ ਦੇ 2.5ml ਨੂੰ ਇੱਕ 10ml ਸਾਫ਼ ਕੱਚ ਦੀ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਲਓ, 50-60℃ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਗੈਸ ਜਾਂ ਰੋਟਰੀ ਈਵੇਪੋਰੇਟਰ ਨਾਲ ਸੁੱਕੋ;
----ਸੁੱਕੇ ਬਚੇ ਹੋਏ ਹਿੱਸੇ ਨੂੰ 1ml n-hexane (ਜਾਂ n- heptane), 30s ਲਈ vortex ਨਾਲ ਘੋਲ ਦਿਓ, 1ml ਕੱਢਣ ਵਾਲਾ ਘੋਲ ਸ਼ਾਮਿਲ ਕਰੋ (ਦਾ ਹੱਲ5), ਵੋਰਟੈਕਸ 1 ਮਿੰਟ, ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ।
---- ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ (20-25oC) 10 ਮਿੰਟ ਲਈ, ਘੱਟੋ ਘੱਟ 3000 ਗ੍ਰਾਮ;
----ਸਪਰਨੇਟੈਂਟ ਜੈਵਿਕ ਪੜਾਅ ਨੂੰ ਹਟਾਓ;ਪਰਖ ਲਈ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਾਟਰ ਪੜਾਅ ਦਾ 50μl ਲਓ।
- 9.ਜਾਂਚ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ
9.1ਜਾਂਚ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਨੋਟਿਸ ਕਰੋ
9.1.1 ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ ਕਿ ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟ ਅਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੇਲ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (20-25℃) 'ਤੇ ਹਨ।
9.1.2 ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਤੁਰੰਤ ਬਾਅਦ ਬਾਕੀ ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟਾਂ ਨੂੰ 2-8℃ 'ਤੇ ਵਾਪਸ ਕਰੋ।
9.1.3 ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਧੋਣਾ ਪਰਖ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਕਦਮ ਹੈ;ਇਹ ELISA ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੀ ਪ੍ਰਜਨਨਯੋਗਤਾ ਲਈ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਕਾਰਕ ਹੈ।
9.1.4 ਪ੍ਰਕਾਸ਼ ਤੋਂ ਬਚੋ ਅਤੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਹੋਣ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੇਲਾਂ ਨੂੰ ਢੱਕੋ।
9.2 ਜਾਂਚ ਦੇ ਪੜਾਅ
9.2.1 ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (20-25℃) 'ਤੇ 30 ਮਿੰਟ ਤੋਂ ਵੱਧ ਸਮੇਂ ਲਈ ਬਾਹਰ ਕੱਢੋ, ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਇਕਸਾਰ ਬਣਾਓ।
9.2.2 ਲੋੜੀਂਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਬਾਹਰ ਕੱਢੋ ਅਤੇ ਬਾਕੀ ਨੂੰ ਤੁਰੰਤ 2-8℃ 'ਤੇ ਜ਼ਿਪ-ਲਾਕ ਬੈਗ ਵਿੱਚ ਵਾਪਸ ਕਰੋ।
9.2.3 ਸੰਘਣੇ ਧੋਣ ਵਾਲੇ ਘੋਲ ਅਤੇ ਸੰਘਣੇ ਕੱਢਣ ਵਾਲੇ ਘੋਲ ਨੂੰ ਵਰਤਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਹੋਣ ਲਈ ਦੁਬਾਰਾ ਗਰਮ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
9.2.4ਗਿਣਤੀ:ਹਰੇਕ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੈੱਲ ਪੋਜੀਸ਼ਨਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ ਅਤੇ ਸਾਰੇ ਮਿਆਰ ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਡੁਪਲੀਕੇਟ ਵਿੱਚ ਚਲਾਏ ਜਾਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ।ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਅਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਨੂੰ ਰਿਕਾਰਡ ਕਰੋ।
9.2.5ਕੇਂਦਰਿਤ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਘੋਲ ਦਾ ਪਤਲਾ: ਕੇਂਦਰਿਤ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਘੋਲ ਨੂੰ 1:10 (1 ਗੁਣਾ ਕੇਂਦਰਿਤ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਘੋਲ: 10 ਗੁਣਾ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਕਨਜੁਗੇਟ ਡਾਇਲੁਐਂਟਸ) ਦੇ ਆਇਤਨ ਅਨੁਪਾਤ ਵਿੱਚ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਕਨਜੁਗੇਟ ਡਾਇਲੁਐਂਟਸ ਨਾਲ ਪਤਲਾ ਕਰੋ।
9.2.6ਮਿਆਰੀ ਘੋਲ/ਨਮੂਨਾ ਅਤੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਸੰਯੁਕਤ ਹੱਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ: 50µl ਸਟੈਂਡਰਡ ਘੋਲ ਜਾਂ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਸੰਬੰਧਿਤ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, 50µl ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਕੰਜੂਗੇਟ ਘੋਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਹੱਥੀਂ ਹਿਲਾ ਕੇ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਮਿਲਾਓ ਅਤੇ ਢੱਕਣ ਦੇ ਨਾਲ 25 ℃ 'ਤੇ 30 ਮਿੰਟ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ।
9.2.7ਧੋਵੋ: ਢੱਕਣ ਨੂੰ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਹਟਾਓ ਅਤੇ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਤਰਲ ਡੋਲ੍ਹ ਦਿਓ ਅਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੈੱਲਾਂ ਨੂੰ 250µl ਪਤਲੇ ਵਾਸ਼ ਘੋਲ ਨਾਲ ਕੁਰਲੀ ਕਰੋ (ਦਾ ਹੱਲ6) 4-5 ਵਾਰ ਲਈ 10s ਦੇ ਅੰਤਰਾਲ 'ਤੇ.ਬਚੇ ਹੋਏ ਪਾਣੀ ਨੂੰ ਸੋਖਣ ਵਾਲੇ ਕਾਗਜ਼ ਨਾਲ ਜਜ਼ਬ ਕਰੋ (ਬਾਕੀ ਹਵਾ ਦੇ ਬੁਲਬੁਲੇ ਨੂੰ ਅਣਵਰਤੀ ਟਿਪ ਨਾਲ ਖਤਮ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ)।
9.2.8ਰੰਗ: ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 50µl ਸਬਸਟਰੇਟ ਘੋਲ A ਅਤੇ 50µl ਸਬਸਟਰੇਟ ਘੋਲ B ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਹੱਥੀਂ ਹਿਲਾ ਕੇ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਮਿਕਸ ਕਰੋ ਅਤੇ ਕਵਰ ਦੇ ਨਾਲ 25℃ 'ਤੇ 15 ਮਿੰਟ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ (ਵੇਖੋ 12.8)।
੯.੨.੧੧ਮਾਪ: ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 50µl ਸਟਾਪ ਘੋਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਹੱਥੀਂ ਹਿਲਾ ਕੇ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਮਿਕਸ ਕਰੋ ਅਤੇ 450nm 'ਤੇ ਸਮਾਈ ਨੂੰ ਮਾਪੋ (ਇਹ 450/630nm ਦੀ ਦੋਹਰੀ ਤਰੰਗ-ਲੰਬਾਈ ਨਾਲ ਮਾਪਣ ਦਾ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦਾ ਹੈ। ਸਟਾਪ ਘੋਲ ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ 5 ਮਿੰਟ ਦੇ ਅੰਦਰ ਨਤੀਜਾ ਪੜ੍ਹੋ।)
10 ਨਤੀਜੇ
10.1ਪ੍ਰਤਿਸ਼ਤ ਸਮਾਈ
ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਅਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਸੋਖਣ ਮੁੱਲਾਂ ਦੇ ਔਸਤ ਮੁੱਲਾਂ ਨੂੰ ਪਹਿਲੇ ਸਟੈਂਡਰਡ (ਜ਼ੀਰੋ ਸਟੈਂਡਰਡ) ਦੇ ਸੋਖਣ ਮੁੱਲ ਨਾਲ ਵੰਡਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ 100% ਨਾਲ ਗੁਣਾ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਜ਼ੀਰੋ ਸਟੈਂਡਰਡ ਨੂੰ 100% ਦੇ ਬਰਾਬਰ ਬਣਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸਮਾਈ ਮੁੱਲਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤ ਵਿੱਚ ਹਵਾਲਾ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
=
ਬੀ ——ਸ਼ੋਸ਼ਣ ਮਿਆਰ (ਜਾਂ ਨਮੂਨਾ)
B0 ——ਸ਼ੋਸ਼ਣ ਜ਼ੀਰੋ ਸਟੈਂਡਰਡ
10.2ਮਿਆਰੀ ਕਰਵ
----ਇੱਕ ਮਿਆਰੀ ਕਰਵ ਖਿੱਚਣ ਲਈ: y-ਧੁਰੇ ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਾਨਕਾਂ ਦੇ ਸੋਖਣ ਮੁੱਲ ਨੂੰ x-ਧੁਰੇ ਵਜੋਂ AOZ ਸਟੈਂਡਰਡ ਹੱਲ (ppb) ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦਾ ਅਰਧ ਲਘੂਗਣਕ ਲਓ।
----ਹਰੇਕ ਨਮੂਨੇ (ppb) ਦੀ AOZ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ, ਜਿਸ ਨੂੰ ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਕਰਵ ਤੋਂ ਪੜ੍ਹਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਨੂੰ ਹਰੇਕ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰੀ ਪਤਲੇਪਣ ਕਾਰਕ ਨਾਲ ਗੁਣਾ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਅਸਲ ਇਕਾਗਰਤਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਧਿਆਨ ਦਿਓ:
ਸਾਰੇ ਡੇਟਾ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਲਈ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਸਾਫਟਵੇਅਰ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ, ਜੋ ਬੇਨਤੀ ਕਰਨ 'ਤੇ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਪਤਲਾ ਕਾਰਕ………………………………………….……2
10.ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ, ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ
ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ: 0.025ppb
ਖੋਜ ਸੀਮਾ:
ਟਿਸ਼ੂ (ਮਾਸਪੇਸ਼ੀ, ਜਿਗਰ) ………………………… 0.1ppb
ਸ਼ਹਿਦ ------------------------------------------------- -0.1ppb
ਸ਼ੁੱਧਤਾ:
ਪਸ਼ੂ ਟਿਸ਼ੂ (ਮਾਸਪੇਸ਼ੀਆਂ ਅਤੇ ਜਿਗਰ)………………………100±20%
ਸ਼ਹਿਦ……………………………………………………… 100±20%
ਸ਼ੁੱਧਤਾ:ELISA ਕਿੱਟ ਦਾ CV 10% ਤੋਂ ਘੱਟ ਹੈ।
11.ਨੋਟਿਸ
12.1 ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਅਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਸੋਖਣ ਮੁੱਲਾਂ ਦੇ ਔਸਤ ਮੁੱਲ ਘਟਾਏ ਜਾਣਗੇ ਜੇਕਰ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (20-25℃) ਤੱਕ ਨਿਯੰਤ੍ਰਿਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ।
12.2 ਅਸਫ਼ਲ ਪੁਨਰ-ਉਤਪਾਦਨ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਕਦਮਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਸੁੱਕਣ ਨਾ ਦਿਓ ਅਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੈੱਲ ਹੋਲਡਰ ਨੂੰ ਟੈਪ ਕਰਨ ਤੋਂ ਤੁਰੰਤ ਬਾਅਦ ਅਗਲਾ ਕਦਮ ਚਲਾਓ।
12.3 ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਹਰੇਕ ਰੀਐਜੈਂਟ ਨੂੰ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਹਿਲਾਓ।
12.4 ਆਪਣੀ ਚਮੜੀ ਨੂੰ ਸਟਾਪ ਘੋਲ ਤੋਂ ਦੂਰ ਰੱਖੋ ਕਿਉਂਕਿ ਇਹ 0.5MH ਹੈ2SO4ਦਾ ਹੱਲ.
12.5 ਪੁਰਾਣੀਆਂ ਕਿੱਟਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨਾ ਕਰੋ।ਵੱਖ-ਵੱਖ ਬੈਚਾਂ ਦੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਦਾ ਆਦਾਨ-ਪ੍ਰਦਾਨ ਨਾ ਕਰੋ, ਨਹੀਂ ਤਾਂ ਇਹ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਘਟਾ ਦੇਵੇਗਾ।
12.6 ਸਟੋਰੇਜ਼ ਦੀ ਸਥਿਤੀ: ELISA ਕਿੱਟਾਂ ਨੂੰ 2-8℃ 'ਤੇ ਰੱਖੋ, ਫ੍ਰੀਜ਼ ਨਾ ਕਰੋ।ਬਾਕੀ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੇਲ ਪਲੇਟਾਂ ਨੂੰ ਸੀਲ ਕਰੋ, ਸਾਰੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਹੋਣ ਦੌਰਾਨ ਸਿੱਧੀ ਧੁੱਪ ਤੋਂ ਬਚੋ।ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਾਈਟਰ ਪਲੇਟਾਂ ਨੂੰ ਢੱਕਣ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
12.7 ਸਬਸਟਰੇਟ ਘੋਲ ਨੂੰ ਛੱਡ ਦੇਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਜੇਕਰ ਇਹ ਰੰਗ ਬਦਲਦਾ ਹੈ।ਜੇ ਜ਼ੀਰੋ ਸਟੈਂਡਰਡ ਦਾ ਸੋਖਣ ਮੁੱਲ (450/630nm) 0.5 (A450nm<0.5) ਤੋਂ ਘੱਟ ਹੈ ਤਾਂ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਵਿਗੜ ਸਕਦੇ ਹਨ।
12.8 ਸਬਸਟਰੇਟ ਘੋਲ ਨੂੰ ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਰੰਗੀਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ 15 ਮਿੰਟ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ;ਤੁਸੀਂ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਹੋਣ ਦੇ ਸਮੇਂ ਨੂੰ 20 ਮਿੰਟ ਜਾਂ ਇਸ ਤੋਂ ਵੱਧ ਲੰਮਾ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹੋ ਜੇਕਰ ਰੰਗ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਬਹੁਤ ਹਲਕਾ ਹੈ।, ਕਦੇ ਵੀ 25 ਮਿੰਟ ਤੋਂ ਵੱਧ ਨਾ ਹੋਵੇ। ਇਸ ਦੇ ਉਲਟ, ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਸਮੇਂ ਨੂੰ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਛੋਟਾ ਕਰੋ।
12.9 ਅਨੁਕੂਲ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 25℃ ਹੈ।ਵੱਧ ਜਾਂ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਅਤੇ ਸੋਖਣ ਮੁੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਵੇਗਾ।
12.ਸਟੋਰੇਜ਼ ਸਥਿਤੀ ਅਤੇ ਸਟੋਰੇਜ਼ ਦੀ ਮਿਆਦ
ਸਟੋਰੇਜ਼ ਸਥਿਤੀ: 2-8℃.
ਸਟੋਰੇਜ ਦੀ ਮਿਆਦ: 12 ਮਹੀਨੇ.