නිෂ්පාදන

1. 1.පසුබිම

නයිට්‍රොෆුරන් යනු කෘත්‍රිම පුළුල් වර්ණාවලී ප්‍රතිජීවක වන අතර, එහි විශිෂ්ට ප්‍රතිබැක්ටීරීය සහ ඖෂධීය ගුණ සඳහා සත්ව නිෂ්පාදනයේ නිතර භාවිතා වේ.ඌරන්, කුකුළු මස් සහ ජලජ නිෂ්පාදනයේ වර්ධන ප්‍රවර්ධකයින් ලෙසද ඒවා භාවිතා කර ඇත.රසායනාගාර සතුන් සමඟ කරන ලද දිගුකාලීන අධ්‍යයනයන්හි දී මාපිය ඖෂධ සහ ඒවායේ පරිවෘත්තීය පිළිකා කාරක සහ විකෘති ලක්ෂණ පෙන්නුම් කරන බව පෙන්වා දී ඇත.මෙය ආහාර නිෂ්පාදනය සඳහා භාවිතා කරන සතුන්ට ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා නයිට්‍රොෆුරන් තහනම් කිරීමට හේතු වී තිබේ.නයිට්‍රොෆුරන් ඖෂධ වන ෆුරල්ටඩෝන්, නයිට්‍රොෆුරන්ටොයින් සහ නයිට්‍රොෆුරාසෝන් 1993 දී යුරෝපා සංගමයේ ආහාර සත්ව නිෂ්පාදනය සඳහා භාවිතය තහනම් කරන ලද අතර ෆුරාසොලිඩෝන් භාවිතය 1995 දී තහනම් කරන ලදී.

නයිට්‍රොෆුරන් ඖෂධ අපද්‍රව්‍ය විශ්ලේෂණය කිරීම නයිට්‍රොෆුරාන් මව් ඖෂධවල පටක බැඳුණු පරිවෘත්තීය හඳුනාගැනීම මත පදනම් විය යුතුය.මව් ඖෂධ ඉතා වේගයෙන් පරිවෘත්තීය වන අතර පටක බැඳී ඇති නයිට්‍රොෆුරන් පරිවෘත්තීය දිගු කාලයක් රඳවා තබා ගන්නා බැවින්, මෙම පරිවෘත්තීය නයිට්‍රොෆුරාන් අපයෝජනය හඳුනා ගැනීමේ ඉලක්කය ලෙස භාවිතා කරයි, ඒවාට ෆුරාසොලිඩෝන් පරිවෘත්තීය (AOZ), ෆුරල්ටාඩෝන් පරිවෘත්තීය (AMOZ) ඇතුළත් වේ. ), Nitrofurantoin metabolite (AHD) සහ Nitrofurazone metabolite (SEM).

AOZ-අපද්‍රව්‍ය බොහෝ විට තීරණය වන්නේ LC-MS හෝ LC-MS/MS මගිනි.එන්සයිම ප්රතිශක්තිකරණ, වර්ණදේහ ක්රම සමඟ සසඳන විට, සංවේදීතාව, හඳුනාගැනීමේ සීමාව, තාක්ෂණික උපකරණ සහ කාල අවශ්යතාවය සම්බන්ධයෙන් සැලකිය යුතු වාසි පෙන්නුම් කරයි.(කාල ​​පිරිවැය: විනාඩි 45)

1. 2.පරීක්ෂණ මූලධර්මය

මෙම ELISA කට්ටලය නිර්මාණය කර ඇත්තේ වක්‍ර තරඟකාරී එන්සයිම ප්‍රතිශක්තිකරණයේ මූලධර්මය මත පදනම්ව AOZ හඳුනාගැනීම සඳහාය.මයික්‍රොටයිටර් ළිං කැප්චර් BSA-සම්බන්ධිත ප්‍රතිදේහජනක වලින් ආලේප කර ඇත.නියැදියේ AOZ එකතු කරන ලද ප්‍රතිදේහ සඳහා මයික්‍රොටයිටර් තහඩුව මත ආලේප කර ඇති ප්‍රතිදේහජනක සමඟ තරඟ කරයි.එන්සයිම සංයෝජන එකතු කිරීමෙන් පසුව, වර්ණදේහ උපස්ථරයක් භාවිතා කරනු ලබන අතර, වර්ණාවලීක්ෂ ෆොටෝමීටරයකින් සංඥාව මනිනු ලැබේ.අවශෝෂණය සාම්පලයේ AOZ සාන්ද්‍රණයට ප්‍රතිලෝමව සමානුපාතික වේ.

1. 3.අයදුම්පත්

මෙම කට්ටලය AOZ අපද්‍රව්‍යවල ප්‍රමාණාත්මක සහ ගුණාත්මක විශ්ලේෂණය සඳහා භාවිතා කළ හැකඇනිමා පටක(මාංශ පේශි, අක්මාව ආදිය), මී පැණි.

1. 4.හරස් ප්රතික්රියා

ෆුරාසොලිඩෝන් පරිවෘත්තීය (AOZ)……………………..100%

ෆුරල්ටඩෝන් පරිවෘත්තීය (AMOZ)……………………<0.1%

නයිට්‍රොෆුරන්ටොයින් පරිවෘත්තීය (AHD)……………………<0.1%

නයිට්‍රොෆුරාසෝන් පරිවෘත්තීය (SEM)……………………………………<0.1%

ෆුරාසොලිඩෝන් ……………………………………………… 16.3%

ෆුරල්ටඩෝන්………………………………………………<1%

නයිට්‍රොෆුරන්ටොයින් ………………………………………………<1%

නයිට්‍රොෆුරාසෝන්……………………………………………………<1%

1. 5.අවශ්ය ද්රව්ය

5.1උපකරණ

----Microtiter තහඩු වර්ණාවලීක්ෂය (450nm/630nm)

----භමක වාෂ්පකාරක හෝ නයිට්‍රජන් වියළන උපකරණ

---- සමජාතීයකාරක / බඩවැලේ

----ෂේකර්

----වෝටෙක්ස් මික්සර්

---- කේන්ද්රාපසාරී

----විශ්ලේෂණාත්මක ශේෂය (ප්රේරණය: 0.01g)

----උපාධිගත පයිප්ප: 10ml

----රබර් පයිප්ප බල්බය

----පරිමාමිතික නළය: 100ml

----වීදුරු නළය: 10ml

----පොලිස්ටිරින් කේන්ද්රාපසාරී නල: 2ml, 50ml

----Micropipettes: 20ul-200ul, 100ul-1000ul,

250ul-multipipette

5.2ප්රතික්රියාකාරක

----එතිල් ඇසිටේට් (AR)

----n-හෙක්සේන් (හෝ n-heptane) (AR)

----ඩිපොටෑසියම් හයිඩ්‍රජන් පොස්පේට් ට්‍රයිහයිඩ්‍රේට්

(K₂HPO₄.3H₂O) (AR)

----සාන්ද්‍රිත හයිඩ්‍රොක්ලෝරික් අම්ලය (HCl, AR)

-----මෙතනෝල්

----සෝඩියම් හයිඩ්‍රොක්සයිඩ් (NaOH, AR)

----ඩයෝනීකරණය කළ ජලය

1. 6.කට්ටල සංරචක

l ප්‍රතිදේහජනක, ළිං 96කින් ආලේප කරන ලද මයික්‍රොටයිටර් තහඩුව

l සම්මත විසඳුම් (6 බෝතල්, 1ml/බෝතලය)

0ppb,0.025ppb,0.075ppb,0.225ppb,0.675ppb,2.025ppb

l ස්පයිකින් සම්මත පාලනය : (1ml/බෝතලය)........100ppb

l සාන්ද්‍ර එන්සයිම සංයුජ 1ml........ රතු කැප්

l එන්සයිම සංයෝජන තනුක 10ml........ හරිත තොප්පිය

l උපස්ථරයක් මිලිලීටර් 7ක් ……………………………………………… සුදු තොප්පිය

l උපස්ථරය B 7ml…………………………………………….. රතු තොප්පිය

l නැවතුම් ද්‍රාවණය 7ml…………………………………………. කහ තොප්පිය

l 20 × සාන්ද්‍ර වොෂ් ද්‍රාවණය 40ml

…………………………………………… විනිවිද පෙනෙන තොප්පිය

l 2×සාන්ද්‍රිත නිස්සාරණ ද්‍රාවණය 60ml....නිල් පියන

l 2-Nitrobenzaldehyde 15.1mg……………… සුදු කැප්

1. 7.ප්රතික්රියාකාරක සකස් කිරීම

විසඳුමක් 1: ව්යුත්පන්න ප්රතික්රියාකාරක:

නයිට්‍රොබෙන්සාල්ඩිහයිඩ් 2 ක් ඇති බෝතලයට මෙතනෝල් මිලි ලීටර් 10 ක් එකතු කර දිය කරන්න.(10mM සාන්ද්‍රණයෙන්).

විසඳුමක් 2: 0.1MK₂HPO₄විසඳුමක්:

බර 22.8g K₂HPO₄.3H₂O සිට 1L දක්වා ඩියෝනීකරණය කළ ජලය විසුරුවා හැරීමට.

විසඳුමක් 3: 1M HCl විසඳුම

8.3ml සාන්ද්‍ර හයිඩ්‍රොක්ලෝරික් අම්ලය විසුරුවා හරින්න 100ml දක්වා deionized ජලය සමග.

විසඳුම 4:1M NaOH විසඳුම

4g NaOH මිලිලීටර් 100ක් ඩියෝනීකරණය කළ ජලය සමග දියකරන්න.

විසඳුම 5: නිස්සාරණය විසඳුම:

2×සාන්ද්‍රිත නිස්සාරණ ද්‍රාවණය 1:1 පරිමා අනුපාතයෙන් ඩියෝනීකෘත ජලය සමග තනුක කරන්න.මෙම ද්‍රාවණය සෙල්සියස් අංශක 4 ට මාස 1ක් සංරක්ෂණය කළ හැකි අතර, එය සාම්පල නිස්සාරණය කිරීමට භාවිත කෙරේ.

විසඳුමක් 6: සෝදන විසඳුම:

20× සාන්ද්‍ර වොෂ් ද්‍රාවණය ඩියෝනීකරණය කළ ජලය සමඟ 1:19 පරිමාවේ සලාකයේ තනුක කරන්න, එය තහඩු සේදීම සඳහා භාවිතා කරනු ඇත.මෙම තනුක ද්‍රාවණය අංශක 4 ට මාස 1 ක් සංරක්ෂණය කළ හැකිය.

1. 8.නියැදි සූදානම

8.1මෙහෙයුමට පෙර දැනුම්දීම සහ පූර්වාරක්ෂාවන්:

අ) කරුණාකර අත්හදා බැලීමේ දී එක වර ඉඟි භාවිතා කරන්න, සහ විවිධ ප්‍රතික්‍රියාකාරක අවශෝෂණය කරන විට ඉඟි වෙනස් කරන්න.

ආ) සියලුම පර්යේෂණාත්මක උපකරණ පිරිසිදු බවට වග බලා ගන්න.

ඇ) ව්‍යුත්පන්න ප්‍රතික්‍රියාකාරකය 2-8℃ දී මාස තුනක් සඳහා සංරක්ෂණය කළ හැක;

d) HCl ද්‍රාවණය කාමර උෂ්ණත්වයේ දී මාස 3ක් සංරක්ෂණය කළ හැක;

e) NaOH ද්‍රාවණය කාමර උෂ්ණත්වයේ දී මාස 3ක් සඳහා සංරක්ෂණය කළ හැක;

f) ප්‍රතිකාර නොකළ සාම්පල කැටි කර තබන්න (-20℃);

g) ප්‍රතිකාර කළ සාම්පල අඳුරේ 2-8℃ වලදී පැය 24ක් සංරක්ෂණය කළ හැක.

8.2 සත්ව පටක සහ අක්මා සාම්පල:

---- සමජාතීයකාරකයක් සමඟ සාම්පල සමජාතීය කරන්න;

---- බර 1.0± 0.05g සමජාතීය පටක සාම්පල 50ml ෙපොලිස්ටිරින් කේන්ද්රාපසාරී නලයට.4ml deionized ජලය, 0.5ml 1M HCl ද්‍රාවණය සහ 100ul ව්‍යුත්පන්න ප්‍රතික්‍රියාකාරක එකතු කරන්න (විසඳුම 1 බලන්න).විනාඩි 2ක් සොලවන්න.

---- රාත්‍රියේ 37℃ ට ඉන්කියුබේට් කරන්න (පැ. 16 පමණ);

---- 5ml 0.1MK එකතු කරන්න₂HPO₄ (විසඳුමක්2), 0.4ml 1M NaOH (විසඳුමක්4) සහ එතිල් ඇසිටේට් 5ml.තත්පර 30 ක් සඳහා දැඩි ලෙස සොලවන්න;

---- විනාඩි 10 ක් සඳහා කාමර උෂ්ණත්වයේ (20-25℃) කේන්ද්‍රාපසාරී, අවම වශයෙන් 3000g;

---- 50-60 ℃ නයිට්‍රජන් වායුව හෝ භ්‍රමණ වාෂ්පීකරණය සමඟ වියළන්න, 10ml පිරිසිදු වීදුරු බටයකට සුපිරි කාබනික අවධියෙන් 2.5ml ගන්න;

---- වියළි ඉතිරි කොටස 1ml n-hexane (හෝ n- heptane) සමග දියකර, 30s සඳහා සුලිය, 1ml නිස්සාරණ ද්‍රාවණයක් එක් කරන්න (විසඳුමක්5), සුළි 1min, සම්පූර්ණයෙන්ම මිශ්ර.

---- කාමර උෂ්ණත්වයේ දී කේන්ද්රාපසාරී (20-25^oC) විනාඩි 5 ක්, අවම වශයෙන් 3000g;

---- සුපිරි කාබනික අවධිය ඉවත් කරන්න;විශ්ලේෂණය සඳහා උපස්ථර ජල අවධියෙන් 50μl ගන්න.

8.4 මී පැණි

---- සමජාතීය මී පැණි නියැදියෙන් 1.0± 0.05g බරින් මිලිලීටර් 50 ක ෙපොලිස්ටිරින් කේන්ද්‍රාපසාරී නලයකට;

----ඩීයෝනීකෘත ජලය 4ml, 0.5ml 1M HCl එකතු කරන්න (විසඳුමක්3) සහ 100μl ව්‍යුත්පන්න ප්‍රතික්‍රියාකාරක (විසඳුමක්1);මිනිත්තු 2 ක් සම්පූර්ණයෙන්ම සොලවන්න;

---- රාත්‍රියේ 37℃ ට ඉන්කියුබේට් කරන්න (පැ. 16 පමණ);

---- 5ml 0.1MK එකතු කරන්න₂HPO₄ (විසඳුමක්2), 0.4ml 1M NaOH (විසඳුමක්4) සහ 5ml එතිල් ඇසිටේට්, 30s සඳහා දැඩි ලෙස සොලවන්න;

----කාමර උෂ්ණත්වයේ දී කේන්ද්‍රාපසාරී (20-25℃) විනාඩි 10ක්, අවම වශයෙන් 3000g;

---- සුපිරිසිදු කාබනික අවධියෙන් මිලිලීටර් 2.5ක් මිලිලීටර් 10ක පිරිසිදු වීදුරු බටයකට ගෙන, 50-60℃ නයිට්‍රජන් වායුවකින් හෝ භ්‍රමණ වාෂ්පීකරණයකින් වියළා ගන්න;

---- වියළි ඉතිරි කොටස 1ml n-hexane (හෝ n- heptane) සමඟ දියකර, 30s සඳහා සුලිය, 1ml නිස්සාරණ ද්‍රාවණයක් එක් කරන්න (විසඳුමක්5), සුළි 1min, සම්පූර්ණයෙන්ම මිශ්ර.

----කාමර උෂ්ණත්වයේ කේන්ද්‍රාපසාරී (20-25^oC) විනාඩි 10 ක්, අවම වශයෙන් ග්රෑම් 3000;

----අධික කාබනික අවධිය ඉවත් කරන්න;විශ්ලේෂණය සඳහා උපස්ථර ජල අවධියෙන් 50μl ගන්න.

1. 9.විශ්ලේෂණ ක්රියාවලිය

9.1පරීක්ෂණයට පෙර දැනුම් දෙන්න

9.1.1 සියලුම ප්‍රතික්‍රියාකාරක සහ මයික්‍රොවේල් කාමර උෂ්ණත්වයේ (20-25℃) ඇති බවට වග බලා ගන්න.

9.1.2 භාවිතා කළ වහාම ඉතිරි සියලුම ප්‍රතික්‍රියාකාරක 2-8℃ වෙත ආපසු එවන්න.

9.1.3 මයික්‍රොවේල් නිවැරදිව සේදීම විශ්ලේෂණ ක්‍රියාවලියේ වැදගත් පියවරකි;එය ELISA විශ්ලේෂණයේ ප්‍රතිනිෂ්පාදනය සඳහා වැදගත් සාධකයකි.

9.1.4 ඉන්කියුබේෂන් අතරතුර ආලෝකයෙන් වළකින්න සහ මයික්‍රොවේල් ආවරණය කරන්න.

9.2 පරීක්ෂණ පියවර

9.2.1 සියලුම ප්‍රතික්‍රියාකාරක කාමර උෂ්ණත්වයේ (20-25℃) විනාඩි 30කට වැඩි කාලයක් පිටතට ගෙන, භාවිතයට පෙර සමජාතීය කරන්න.

9.2.2 අවශ්‍ය මයික්‍රොවේල් ලබාගෙන ඉතිරිය සෙල්සියස් අංශක 2-8 ට සිප්-ලොක් බෑගයට වහාම ආපසු එවන්න.

9.2.3 සාන්ද්‍ර වොෂ් ද්‍රාවණය සහ සාන්ද්‍ර නිස්සාරණ ද්‍රාවණය භාවිතයට පෙර කාමර උෂ්ණත්වයේ පවතින පරිදි නැවත උණුසුම් කළ යුතුය.

9.2.4ගණන:සෑම මයික්‍රොවෙල් පිහිටීමක්ම අංකනය කර ඇති අතර සියලුම ප්‍රමිති සහ සාම්පල අනුපිටපත් වලින් ධාවනය කළ යුතුය.ප්‍රමිති සහ සාම්පල ස්ථාන වාර්තා කරන්න.

9.2.5සාන්ද්ර ගත ප්රතිදේහ ද්රාවණය තනුක කිරීම: 1:10 (1 ගුණයකින් සාන්ද්‍රිත එන්සයිම ද්‍රාවණය: 10 ගුණයකින් එන්සයිම සංයුජ තනුක ද්‍රාවණය) එන්සයිම සංයුජ තනුක සමඟ සාන්ද්‍රිත එන්සයිම ද්‍රාවණය තනුක කරන්න.

9.2.6සම්මත ද්‍රාවණය / නියැදිය සහ එන්සයිම සංයෝජන ද්‍රාවණය එක් කරන්න: සම්මත ද්‍රාවණයෙන් 50µl හෝ සකස් කළ නියැදිය අනුරූප ළිංවලට එක් කරන්න, 50µl එන්සයිම සංයෝජන ද්‍රාවණය එකතු කරන්න.පිඟාන අතින් සොලවා මෘදු ලෙස මිශ්‍ර කර පියනක් සමඟ සෙල්සියස් අංශක 25 ට මිනිත්තු 30 ක් පුර්වාගත කරන්න.

9.2.7සෝදන්න: කවරය මෘදු ලෙස ඉවත් කර ළිංවලින් දියර වත් කර මයික්‍රෝවේල් 250µl තනුක කළ සේදුම් ද්‍රාවණයකින් සෝදා හරින්න (විසඳුමක්6) තත්පර 10 ක පරතරයකින් 4-5 වතාවක්.අවශෝෂක කඩදාසි සමඟ අවශේෂ ජලය අවශෝෂණය කරන්න (ඉතිරි වායු බුබුල භාවිතයට නොගත් ඉඟියකින් ඉවත් කළ හැකිය).

9.2.8වර්ණ ගැන්වීම: සෑම ළිඳකටම 50µl උපස්ථර ද්‍රාවණය A සහ ​​50ul උපස්ථර ද්‍රාවණය B එක් කරන්න.පිඟාන අතින් රොක් කිරීමෙන් මෘදු මිශ්‍ර කර ආවරණයක් සහිතව සෙල්සියස් අංශක 25 ට මිනිත්තු 15 ක් පුර්ව තනන්න (12.8 බලන්න).

9.2.11මනින්න: සෑම ළිඳකටම නැවතුම් ද්‍රාවණය 50µl එකතු කරන්න.තහඩුව අතින් රොක් කිරීමෙන් මෘදු මිශ්‍ර කර 450nm හිදී අවශෝෂණය මැනීම (එය යෝජනා කළේ ද්විත්ව තරංග ආයාමය 450/630nm සමඟ මැනීමයි. නැවතුම් ද්‍රාවණය එකතු කිරීමෙන් පසු මිනිත්තු 5ක් ඇතුළත ප්‍රතිඵලය කියවන්න.)

10 ප්රතිපල

10.1ප්රතිශත අවශෝෂණය

සම්මතයන් සහ සාම්පල සඳහා ලබාගත් අවශෝෂණ අගයන්හි මධ්යන්ය අගයන් පළමු සම්මතයේ (ශුන්ය සම්මතයේ) අවශෝෂණ අගයෙන් බෙදනු ලබන අතර 100% කින් ගුණ කරනු ලැබේ.ශුන්‍ය ප්‍රමිතිය 100% ට සමාන වන අතර අවශෝෂණ අගයන් ප්‍රතිශත වලින් උපුටා දක්වා ඇත.

=

B ——අවශෝෂණ සම්මතය (හෝ නියැදිය)

B0 ——අවශෝෂණ ශුන්‍ය සම්මතය

10.2සම්මත වක්රය

----සම්මත වක්‍රයක් ඇඳීමට: ප්‍රමිතිවල අවශෝෂණ අගය y-අක්ෂ ලෙස ගන්න, AOZ සම්මත ද්‍රාවණයේ (ppb) සාන්ද්‍රණයේ අර්ධ ලඝුගණක x-අක්ෂය ලෙස ගන්න.

----ක්‍රමාංකන වක්‍රයෙන් කියවිය හැකි එක් එක් නියැදියක (ppb) AOZ සාන්ද්‍රණය අනුගමනය කරන එක් එක් සාම්පලයේ අනුරූප තනුක සාධකය මගින් ගුණ කරනු ලබන අතර නියැදියේ සැබෑ සාන්ද්‍රණය ලබා ගනී.

කරුණාකර සටහන් කරන්න:

සියලුම දත්ත අඩු කිරීම් සඳහා විශේෂ මෘදුකාංගයක් නිර්මාණය කර ඇති අතර, එය ඉල්ලීම මත සැපයිය හැකිය.

තනුක සාධකය…………………………………………………… 2

10.සංවේදීතාව, නිරවද්යතාව සහ නිරවද්යතාව

සංවේදීතාව: 0.025ppb

හඳුනාගැනීමේ සීමාව:

පටක (මාංශ පේශී, අක්මාව)……………………………… 0.1ppb

මීපැණි ---------------------------------------------- -0.1ppb

නිරවද්යතාව:

සත්ව පටක (මාංශ පේශී සහ අක්මාව)……………………………… 100 ± 20%

මී පැණි …………………………………………………… 100 ± 20%

නිරවද්යතාව:ELISA කට්ටලයේ CV 10% ට වඩා අඩුය.

11.දැනුම්දීම

12.1 ප්‍රතික්‍රියාකාරක සහ සාම්පල කාමර උෂ්ණත්වයට (20-25℃) නියාමනය කර නොමැති නම් ප්‍රමිති සහ සාම්පල සඳහා ලබාගත් අවශෝෂණ අගයන්හි මධ්‍යන්‍ය අගයන් අඩු කරනු ලැබේ.

12.2 අසාර්ථක ප්‍රතිනිෂ්පාදනය වැළැක්වීම සඳහා පියවර අතර මයික්‍රොවේල් වියළීමට ඉඩ නොතබන්න සහ මයික්‍රොවේල් රඳවනයට තට්ටු කළ වහාම ඊළඟ පියවර ක්‍රියාත්මක කරන්න.

12.3 භාවිතයට පෙර එක් එක් ප්‍රතික්‍රියාකාරකය මෘදු ලෙස සොලවන්න.

12.4 ඔබේ සම නැවතුම් ද්‍රාවණයෙන් ඈත් කර තබන්න, මන්ද එය 0.5MH වේ₂SO₄විසඳුමක්.

12.5 කල් ඉකුත් වූ කට්ටල භාවිතා නොකරන්න.විවිධ කාණ්ඩවල ප්‍රතික්‍රියාකාරක හුවමාරු නොකරන්න, එසේ නොමැතිනම් එය සංවේදීතාව අඩු කරයි.

12.6 ගබඩා තත්ත්වය: ELISA කට්ටල 2-8℃ දී තබා ගන්න, කැටි නොකරන්න.විවේක මයික්‍රොවෙල් තහඩු මුද්‍රා තබන්න, සියලුම ඉන්කියුබේෂන් වලදී සෘජු හිරු එළියෙන් වළකින්න.මයික්රොටයිටර් තහඩු ආවරණය කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.

12.7 උපස්ථර ද්‍රාවණය වර්ණ බවට පත් වුවහොත් එය අත්හැරිය යුතුය.ශුන්‍ය ප්‍රමිතියේ අවශෝෂණ අගය (450/630nm) 0.5 (A450nm<0.5) ට අඩු නම් ප්‍රතික්‍රියාකාරක නරක් විය හැක.

12.8 උපස්ථර ද්‍රාවණය එකතු කිරීමෙන් පසු වර්ණ ප්‍රතික්‍රියාවට මිනිත්තු 15ක් අවශ්‍ය වේ;වර්ණය නිශ්චය කළ නොහැකි තරම් සැහැල්ලු නම්, ඔබට පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කාලය විනාඩි 20ක් හෝ ඊට වැඩි කාලයක් දීර්ඝ කළ හැක., කිසිවිටකත් විනාඩි 25ක් නොඉක්මවිය හැක. ඊට ප්‍රතිවිරුද්ධව, ඉන්කියුබේෂන් කාලය නිසි ලෙස කෙටි කරන්න.

12.9 ප්‍රශස්ත ප්‍රතික්‍රියා උෂ්ණත්වය 25℃ වේ.ඉහළ හෝ අඩු උෂ්ණත්වය සංවේදීතාවයේ සහ අවශෝෂණ අගයන්හි වෙනස්කම් වලට තුඩු දෙනු ඇත.

12.ගබඩා තත්ත්වය සහ ගබඩා කාලය

ගබඩා තත්ත්වය: 2-8℃.

ගබඩා කාලය: මාස 12.