ஃபுராசோலிடோன் மெட்டாபொலைட்டின் (AOZ) அளவு பகுப்பாய்வுக்கான போட்டி என்சைம் இம்யூனோசே கிட்
- 1.பின்னணி
நைட்ரோஃபுரான்கள் செயற்கையான பரந்த-ஸ்பெக்ட்ரம் நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பிகள் ஆகும், அவை அதன் சிறந்த பாக்டீரியா எதிர்ப்பு மற்றும் பார்மகோகினெடிக் பண்புகளுக்காக விலங்கு உற்பத்தியில் அடிக்கடி பயன்படுத்தப்படுகின்றன.அவை பன்றி, கோழி மற்றும் நீர்வாழ் உற்பத்தியில் வளர்ச்சி ஊக்கிகளாகவும் பயன்படுத்தப்பட்டன.ஆய்வக விலங்குகளுடனான நீண்ட கால ஆய்வுகளில், தாய் மருந்துகள் மற்றும் அவற்றின் வளர்சிதை மாற்றங்கள் புற்றுநோய் மற்றும் பிறழ்வு பண்புகளைக் காட்டியுள்ளன.இது உணவு உற்பத்திக்காக பயன்படுத்தப்படும் விலங்குகளின் சிகிச்சைக்காக நைட்ரோஃபுரான்களின் தடைக்கு வழிவகுத்தது.நைட்ரோஃபுரான் மருந்துகளான ஃபுரால்டடோன், நைட்ரோஃபுரான்டோயின் மற்றும் நைட்ரோஃபுரசோன் ஆகியவை 1993 இல் ஐரோப்பிய ஒன்றியத்தில் உணவு விலங்கு உற்பத்தியில் பயன்படுத்த தடை விதிக்கப்பட்டது, மேலும் ஃபுராசோலிடோனின் பயன்பாடு 1995 இல் தடைசெய்யப்பட்டது.
நைட்ரோஃபுரான் மருந்துகளின் எச்சத்தின் பகுப்பாய்வு நைட்ரோஃபுரான் தாய் மருந்துகளின் திசு பிணைப்பு வளர்சிதை மாற்றங்களைக் கண்டறிவதன் அடிப்படையில் இருக்க வேண்டும்.பெற்றோர் மருந்துகள் மிக விரைவாக வளர்சிதை மாற்றமடைவதால், திசு பிணைக்கப்பட்ட நைட்ரோஃபுரான் வளர்சிதை மாற்றங்கள் நீண்ட காலத்திற்கு தக்கவைக்கப்படும், இந்த வளர்சிதை மாற்றங்கள் நைட்ரோஃபுரான்களின் துஷ்பிரயோகத்தைக் கண்டறிவதில் இலக்காகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, இதில் ஃபுராசோலிடோன் மெட்டாபொலைட் (AOZ), ஃபுரால்டடோன் மெட்டாபொலைட் (AMOZ) அடங்கும். ), Nitrofurantoin வளர்சிதை மாற்றம் (AHD) மற்றும் Nitrofurazone வளர்சிதை மாற்றம் (SEM).
AOZ-எச்சங்கள் பொதுவாக LC-MS அல்லது LC-MS/MS ஆல் தீர்மானிக்கப்படுகின்றன.குரோமடோகிராஃபிக் முறைகளுடன் ஒப்பிடும்போது என்சைம் இம்யூனோசேஸ்கள், உணர்திறன், கண்டறிதல் வரம்பு, தொழில்நுட்ப உபகரணங்கள் மற்றும் நேரத் தேவை ஆகியவற்றில் குறிப்பிடத்தக்க நன்மைகளைக் காட்டுகின்றன.(நேர செலவு: 45 நிமிடம்)
- 2.சோதனைக் கோட்பாடு
இந்த ELISA கிட் மறைமுக-போட்டி என்சைம் இம்யூனோஅசேயின் கொள்கையின் அடிப்படையில் AOZ ஐக் கண்டறிய வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளது.மைக்ரோடிட்டர் கிணறுகள் பிடிப்பு BSA-இணைக்கப்பட்ட ஆன்டிஜெனுடன் பூசப்பட்டுள்ளன.மாதிரியில் உள்ள AOZ, சேர்க்கப்பட்ட ஆன்டிபாடிக்காக மைக்ரோடிட்டர் தட்டில் பூசப்பட்ட ஆன்டிஜெனுடன் போட்டியிடுகிறது.என்சைம் கான்ஜுகேட்டைச் சேர்த்த பிறகு, குரோமோஜெனிக் அடி மூலக்கூறு பயன்படுத்தப்படுகிறது மற்றும் சமிக்ஞை ஒரு ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமீட்டரால் அளவிடப்படுகிறது.உறிஞ்சுதல் மாதிரியில் உள்ள AOZ செறிவுக்கு நேர்மாறான விகிதாசாரமாகும்.
- 3.விண்ணப்பங்கள்
இந்த கிட் AOZ எச்சத்தின் அளவு மற்றும் தரமான பகுப்பாய்வில் பயன்படுத்தப்படலாம்அனிமா திசுக்கள்(தசை, கல்லீரல் போன்றவை), தேன்.
- 4.குறுக்கு எதிர்வினைகள்
ஃபுராசோலிடோன் மெட்டாபொலிட் (AOZ)……………………..100%
ஃபுரால்டடோன் மெட்டாபொலைட் (AMOZ)……………………<0.1%
நைட்ரோஃபுரான்டோயின் மெட்டாபொலைட் (AHD)……………………<0.1%
நைட்ரோஃபுரசோன் மெட்டாபொலிட் (SEM)…………………………………………<0.1%
ஃபுராசோலிடோன் ………………………………………………… 16.3%
ஃபுரால்டடோன்……………………………………………………<1%
நைட்ரோஃபுரான்டோயின்……………………………………………………<1%
நைட்ரோஃபுராசோன்……………………………………………………<1%
- 5.தேவையான பொருட்கள்
5.1உபகரணங்கள்
----மைக்ரோடைட்டர் பிளேட் ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமீட்டர் (450nm/630nm)
----ரோட்டரி ஆவியாக்கி அல்லது நைட்ரஜன் உலர்த்தும் கருவிகள்
----ஒரிசைப்பான் / வயிறு
---- சேகர்
----சுழல் கலவை
----மையவிலக்கு
---- பகுப்பாய்வு சமநிலை (தூண்டல்: 0.01 கிராம்)
----பட்டம் பெற்ற பைப்பட்: 10மிலி
----ரப்பர் பைப்பட் பல்ப்
----வால்யூமெட்ரிக் குடுவை: 100மிலி
----கண்ணாடி குடுவை: 10மிலி
----பாலிஸ்டிரீன் மையவிலக்கு குழாய்: 2மிலி, 50மிலி
----மைக்ரோபிபெட்டுகள்: 20ul-200ul, 100ul-1000ul,
250ul-மல்டிபிபெட்
5.2எதிர்வினைகள்
----எத்தில் அசிடேட் (AR)
----n-ஹெக்ஸேன் (அல்லது n-heptane) (AR)
----டிபொட்டாசியம் ஹைட்ரஜன் பாஸ்பேட் ட்ரைஹைட்ரேட்
(K2HPO4.3H2O) (AR)
----செறிவூட்டப்பட்ட ஹைட்ரோகுளோரிக் அமிலம் (HCl, AR)
-----மெத்தனால்
----சோடியம் ஹைட்ராக்சைடு (NaOH, AR)
---- டீயோனைஸ்டு நீர்
- 6.கிட் கூறுகள்
l ஆன்டிஜென் பூசப்பட்ட மைக்ரோடிட்டர் தட்டு, 96 கிணறுகள்
நிலையான தீர்வுகள் (6 பாட்டில்கள், 1 மிலி/பாட்டில்)
0ppb,0.025ppb,0.075ppb,0.225ppb,0.675ppb,2.025ppb
l ஸ்பைக்கிங் நிலையான கட்டுப்பாடு : (1ml/பாட்டில்)........100ppb
l செறிவூட்டப்பட்ட என்சைம் கன்ஜுகேட் 1மிலி........சிவப்பு தொப்பி
l என்சைம் கன்ஜுகேட் டிலூயிண்ட்ஸ் 10 மிலி........ பச்சை தொப்பி
l அடி மூலக்கூறு A 7ml……………………………………………… வெள்ளை தொப்பி
l அடி மூலக்கூறு B 7ml ……………………………………………..சிவப்பு தொப்பி
l நிறுத்தக் கரைசல் 7மிலி……………………………… மஞ்சள் தொப்பி
l 20× செறிவூட்டப்பட்ட கழுவும் தீர்வு 40 மிலி
……………………………………… வெளிப்படையான தொப்பி
l 2×செறிவூட்டப்பட்ட பிரித்தெடுத்தல் தீர்வு 60மிலி….நீல தொப்பி
எல் 2-நைட்ரோபென்சால்டிஹைடு 15.1மிகி…………………… வெள்ளை தொப்பி
- 7.எதிர்வினைகள் தயாரிப்பு
தீர்வு 1: வழித்தோன்றல் வினைப்பொருள்:
2-நைட்ரோபென்சால்டிஹைடு கொண்ட பாட்டிலில் 10மிலி மெத்தனால் சேர்த்து கரைக்கவும்.(10mM செறிவில்).
தீர்வு 2: 0.1MK2HPO4தீர்வு:
எடை 22.8 கிராம் கே2HPO4.3H2O முதல் 1L வரை டீயோனைஸ்டு நீர் கரைக்க.
தீர்வு 3: 1M HCl தீர்வு
8.3மிலி செறிவூட்டப்பட்ட ஹைட்ரோகுளோரிக் அமிலத்தைக் கரைக்கவும் 100 மிலிக்கு டீயோனைஸ் செய்யப்பட்ட தண்ணீருடன்.
தீர்வு 4:1M NaOH தீர்வு
4 கிராம் NaOH ஐ 100 மில்லி டீயோனைஸ்டு நீரில் கரைக்கவும்.
தீர்வு 5: பிரித்தெடுத்தல் தீர்வு:
2× செறிவூட்டப்பட்ட பிரித்தெடுத்தல் கரைசலை 1:1 என்ற அளவு விகிதத்தில் டீயோனைஸ் செய்யப்பட்ட தண்ணீருடன் நீர்த்துப்போகச் செய்யவும்.இந்த கரைசலை 1 மாதத்திற்கு 4℃ இல் சேமிக்க முடியும், இது மாதிரிகளை பிரித்தெடுக்க பயன்படுத்தப்படும்.
தீர்வு 6: கழுவும் தீர்வு:
20× செறிவூட்டப்பட்ட வாஷ் கரைசலை டீயோனைஸ்டு நீரில் 1:19 அளவு ரேஷனில் நீர்த்துப்போகச் செய்யவும், இது தட்டுகளைக் கழுவப் பயன்படும்.இந்த நீர்த்த கரைசலை 4℃ வெப்பநிலையில் 1 மாதத்திற்கு சேமிக்க முடியும்.
- 8.மாதிரி ஏற்பாடுகள்
8.1செயல்பாட்டிற்கு முன் எச்சரிக்கை மற்றும் முன்னெச்சரிக்கைகள்:
a) பரிசோதனையில் ஒரு முறை உதவிக்குறிப்புகளைப் பயன்படுத்தவும், மேலும் வெவ்வேறு வினைப்பொருளை உறிஞ்சும் போது குறிப்புகளை மாற்றவும்.
b) அனைத்து சோதனைக் கருவிகளும் சுத்தமாக இருப்பதை உறுதிசெய்யவும்.
c) டெரிவேட்டிவ் ரீஜென்ட் மூன்று மாதங்களுக்கு 2-8℃ இல் சேமிக்கப்படும்;
ஈ) HCl கரைசலை அறை வெப்பநிலையில் 3 மாதங்களுக்குப் பாதுகாக்கலாம்;
இ) NaOH கரைசலை அறை வெப்பநிலையில் 3 மாதங்களுக்குப் பாதுகாக்கலாம்;
f) சிகிச்சை அளிக்கப்படாத மாதிரிகளை உறைநிலையில் வைக்கவும்(-20℃);
g) சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட மாதிரிகளை 24 மணிநேரத்திற்கு 2-8℃ இருட்டில் சேமிக்க முடியும்.
8.2 விலங்கு திசு மற்றும் கல்லீரல் மாதிரிகள்:
----ஒரே மாதிரிகளை ஒரே மாதிரியாக மாற்றவும்;
----50மிலி பாலிஸ்டிரீன் மையவிலக்குக் குழாயில் ஒரே மாதிரியான திசு மாதிரியின் எடை 1.0±0.05g.4ml deionized தண்ணீர், 0.5ml 1M HCl கரைசல் மற்றும் 100ul டெரிவேட்டிவ் ரீஜென்ட் ஆகியவற்றைச் சேர்க்கவும் (தீர்வு 1 ஐப் பார்க்கவும்).அதை 2 நிமிடம் அசைக்கவும்.
---- ஒரே இரவில் 37℃ இல் அடைகாக்கும் (சுமார் 16 மணிநேரம்);
---- 5மிலி 0.1எம்கே சேர்க்கவும்2HPO4 (தீர்வு2), 0.4மிலி 1M NaOH (தீர்வு4) மற்றும் 5மிலி எத்தில் அசிடேட்.30 வினாடிகளுக்கு கடுமையாக குலுக்கவும்;
---- 10 நிமிடங்களுக்கு அறை வெப்பநிலையில் (20-25℃) மையவிலக்கு, குறைந்தது 3000 கிராம்;
---- 2.5மிலி சூப்பர்நேட்டன்ட் ஆர்கானிக் கட்டத்தை 10மிலி சுத்தமான கண்ணாடிக் குழாயில் எடுத்து, 50-60℃ நைட்ரஜன் வாயு அல்லது ரோட்டரி ஆவியாக்கி கொண்டு உலர்த்தவும்;
---- உலர்ந்த மிச்சத்தை 1ml n-hexane (அல்லது n- heptane) உடன் கரைக்கவும், 30 வினாடிகளுக்கு சுழல், 1ml பிரித்தெடுத்தல் கரைசல் சேர்க்கவும் (தீர்வு5), சுழல் 1 நிமிடம், முழுமையாக கலக்கவும்.
---- அறை வெப்பநிலையில் மையவிலக்கு (20-25oசி) 5 நிமிடங்களுக்கு, குறைந்தது 3000 கிராம்;
---- மேலோட்டமான கரிம கட்டத்தை அகற்று;50μl அடி மூலக்கூறு நீர் கட்டத்தை மதிப்பீட்டிற்கு எடுத்துக் கொள்ளுங்கள்.
8.4 தேன்
----ஒரு 50மிலி பாலிஸ்டிரீன் மையவிலக்குக் குழாயில் 1.0±0.05 கிராம் ஒரே மாதிரியான தேன் மாதிரியை எடையுங்கள்;
----4ml deionized தண்ணீர், 0.5ml 1M HCl (தீர்வு3) மற்றும் 100μl டெரிவேட்டிவ் ரீஜென்ட் (தீர்வு1);2 நிமிடங்களுக்கு முழுமையாக அசைக்கவும்;
----ஒரே இரவில் 37℃ இல் அடைகாக்கும் (சுமார் 16 மணிநேரம்);
----5 மில்லி 0.1MK சேர்க்கவும்2HPO4 (தீர்வு2), 0.4மிலி 1M NaOH (தீர்வு4) மற்றும் 5 மிலி எத்தில் அசிடேட், 30 வினாடிகளுக்கு கடுமையாக குலுக்கவும்;
----அறை வெப்பநிலையில் (20-25℃) 10 நிமிடங்களுக்கு, குறைந்தபட்சம் 3000 கிராம் மையவிலக்கு;
---- 2.5 மில்லி சூப்பர்நேட்டன்ட் ஆர்கானிக் கட்டத்தை 10 மில்லி சுத்தமான கண்ணாடிக் குழாயில் எடுத்து, 50-60℃ நைட்ரஜன் வாயு அல்லது ரோட்டரி ஆவியாக்கி கொண்டு உலர்த்தவும்;
---- உலர்ந்த மிச்சத்தை 1ml n-hexane (அல்லது n- heptane) கொண்டு கரைக்கவும், 30 வினாடிகளுக்கு சுழல், 1ml பிரித்தெடுத்தல் கரைசல் சேர்க்கவும் (தீர்வு5), சுழல் 1 நிமிடம், முழுமையாக கலக்கவும்.
----அறை வெப்பநிலையில் மையவிலக்கு (20-25oசி) 10 நிமிடங்களுக்கு, குறைந்தது 3000 கிராம்;
---- மேலோட்டமான கரிம கட்டத்தை அகற்று;50μl அடி மூலக்கூறு நீர் கட்டத்தை மதிப்பீட்டிற்கு எடுத்துக் கொள்ளுங்கள்.
- 9.மதிப்பீட்டு செயல்முறை
9.1ஆய்வுக்கு முன் கவனிக்கவும்
9.1.1 அனைத்து உலைகளும் மைக்ரோவெல்களும் அறை வெப்பநிலையில் (20-25℃) இருப்பதை உறுதி செய்து கொள்ளவும்.
9.1.2 பயன்பாட்டிற்குப் பிறகு உடனடியாக மீதமுள்ள அனைத்து வினைகளையும் 2-8℃க்கு திருப்பி விடுங்கள்.
9.1.3 மைக்ரோவெல்களை சரியாகக் கழுவுவது மதிப்பீட்டின் செயல்பாட்டில் ஒரு முக்கியமான படியாகும்;இது ELISA பகுப்பாய்வின் மறுஉருவாக்கத்திற்கு முக்கிய காரணியாகும்.
9.1.4 அடைகாக்கும் போது ஒளியைத் தவிர்த்து மைக்ரோவெல்களை மூடி வைக்கவும்.
9.2 மதிப்பீடு படிகள்
9.2.1 அறை வெப்பநிலையில் (20-25℃) 30 நிமிடங்களுக்கு மேல் அனைத்து வினைகளையும் எடுத்து, பயன்படுத்துவதற்கு முன் ஒரே மாதிரியாக மாற்றவும்.
9.2.2 தேவையான மைக்ரோவெல்களை வெளியே எடுத்து, மீதமுள்ளவற்றை 2-8℃ இல் உடனடியாக ஜிப்-லாக் பையில் திருப்பி விடுங்கள்.
9.2.3 செறிவூட்டப்பட்ட கழுவும் கரைசல் மற்றும் செறிவூட்டப்பட்ட பிரித்தெடுத்தல் தீர்வு ஆகியவை பயன்படுத்துவதற்கு முன் அறை வெப்பநிலையில் இருக்கும்படி மீண்டும் சூடேற்றப்பட வேண்டும்.
9.2.4எண்:ஒவ்வொரு மைக்ரோவெல் நிலைகளையும் எண்ணி அனைத்து தரநிலைகள் மற்றும் மாதிரிகள் நகலில் இயக்கப்பட வேண்டும்.தரநிலைகள் மற்றும் மாதிரிகள் நிலைகளை பதிவு செய்யவும்.
9.2.5செறிவூட்டப்பட்ட ஆன்டிபாடி கரைசலை நீர்த்துப்போகச் செய்தல்: செறிவூட்டப்பட்ட நொதிக் கரைசலை 1:10 (1 மடங்கு செறிவூட்டப்பட்ட நொதிக் கரைசல்: 10 மடிப்பு என்சைம் கன்ஜுகேட் நீர்த்துப்போகும்) என்ற அளவு விகிதத்தில் என்சைம் கான்ஜுகேட் நீர்த்துப்போகுடன் நீர்த்துப்போகச் செய்யவும்.
9.2.6நிலையான தீர்வு / மாதிரி மற்றும் என்சைம் இணைந்த தீர்வு சேர்க்கவும்: 50µl நிலையான கரைசல் அல்லது தயாரிக்கப்பட்ட மாதிரியை தொடர்புடைய கிணறுகளில் சேர்க்கவும், 50µl என்சைம் கான்ஜுகேட் கரைசலை சேர்க்கவும்.தட்டை கைமுறையாக அசைப்பதன் மூலம் மெதுவாகக் கலந்து, மூடியுடன் 25 டிகிரியில் 30 நிமிடங்கள் அடைகாக்கவும்.
9.2.7கழுவுதல்: மூடியை மெதுவாக அகற்றி, கிணறுகளில் இருந்து திரவத்தை ஊற்றி, மைக்ரோவெல்களை 250µl நீர்த்த வாஷ் கரைசலில் துவைக்கவும் (தீர்வு6) 10 வினாடிகள் இடைவெளியில் 4-5 முறை.எஞ்சியிருக்கும் தண்ணீரை உறிஞ்சக்கூடிய காகிதத்துடன் உறிஞ்சவும் (மீதமுள்ள காற்று குமிழியை பயன்படுத்தாத முனையுடன் அகற்றலாம்).
9.2.8வண்ணமயமாக்கல்: ஒவ்வொரு கிணற்றிலும் 50µl அடி மூலக்கூறு கரைசல் A மற்றும் 50ul அடி மூலக்கூறு கரைசல் B சேர்க்கவும்.தட்டைக் கைமுறையாக அசைப்பதன் மூலம் மெதுவாகக் கலந்து, 15 நிமிடங்களுக்கு 25℃ வெப்பநிலையில் மூடியுடன் அடைகாக்கவும் (பார்க்க 12.8).
9.2.11அளவிடவும்: ஒவ்வொரு கிணற்றிலும் 50µl நிறுத்தக் கரைசலைச் சேர்க்கவும்.தட்டைக் கைமுறையாக அசைப்பதன் மூலம் மெதுவாகக் கலந்து 450nm இல் உறிஞ்சுதலை அளவிடவும் (இது 450/630nm என்ற இரட்டை அலைநீளத்துடன் அளவிட பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. நிறுத்தக் கரைசலைச் சேர்த்த பிறகு 5 நிமிடங்களுக்குள் முடிவைப் படிக்கவும். )
10 முடிவுகள்
10.1சதவீதம் உறிஞ்சுதல்
தரநிலைகள் மற்றும் மாதிரிகளுக்கு பெறப்பட்ட உறிஞ்சுதல் மதிப்புகளின் சராசரி மதிப்புகள் முதல் தரநிலையின் (பூஜ்ஜிய தரநிலை) உறிஞ்சுதல் மதிப்பால் வகுக்கப்படுகின்றன மற்றும் 100% ஆல் பெருக்கப்படுகின்றன.பூஜ்ஜிய தரநிலையானது 100% க்கு சமமாக செய்யப்படுகிறது மற்றும் உறிஞ்சுதல் மதிப்புகள் சதவீதங்களில் மேற்கோள் காட்டப்படுகின்றன.
=
B ——உறிஞ்சும் தரநிலை (அல்லது மாதிரி)
B0 ——உறிஞ்சுதல் பூஜ்ஜிய தரநிலை
10.2நிலையான வளைவு
----ஒரு நிலையான வளைவை வரைய: தரங்களின் உறிஞ்சுதல் மதிப்பை y-அச்சு, செமி மடக்கை AOZ நிலையான கரைசலின் (பிபிபி) செறிவு x-அச்சாக எடுத்துக்கொள்ளவும்.
----ஒவ்வொரு மாதிரியின் AOZ செறிவு (ppb), அளவுத்திருத்த வளைவில் இருந்து படிக்க முடியும், ஒவ்வொரு மாதிரியின் தொடர்புடைய நீர்த்த காரணியால் பெருக்கப்படுகிறது, மேலும் மாதிரியின் உண்மையான செறிவு பெறப்படுகிறது.
தயவுசெய்து கவனிக்கவும்:
அனைத்து தரவு குறைப்புக்கும் சிறப்பு மென்பொருள் உருவாக்கப்பட்டுள்ளது, இது கோரிக்கையின் பேரில் வழங்கப்படலாம்.
நீர்த்த காரணி…………………………………………………… 2
10.உணர்திறன், துல்லியம் மற்றும் துல்லியம்
உணர்திறன்: 0.025பிபிபி
கண்டறிதல் வரம்பு:
திசு (தசை, கல்லீரல்)……………………………… 0.1 பிபிபி
தேன்------------------------------------------------ -0.1 பிபிபி
துல்லியம்:
விலங்கு திசு (தசை மற்றும் கல்லீரல்)……………………..100±20%
தேன் …………………………………………… 100 ± 20%
துல்லியம்:ELISA கிட்டின் CV 10%க்கும் குறைவாக உள்ளது.
11.கவனிக்கவும்
12.1 வினைப்பொருட்கள் மற்றும் மாதிரிகள் அறை வெப்பநிலையில் (20-25℃) ஒழுங்குபடுத்தப்படாவிட்டால், தரநிலைகள் மற்றும் மாதிரிகளுக்கு பெறப்பட்ட உறிஞ்சுதல் மதிப்புகளின் சராசரி மதிப்புகள் குறைக்கப்படும்.
12.2 தோல்வியுற்ற மறுஉற்பத்தியைத் தவிர்க்க படிகளுக்கு இடையில் மைக்ரோவெல்கள் உலர அனுமதிக்காதீர்கள் மற்றும் மைக்ரோவெல்ஸ் ஹோல்டரைத் தட்டிய உடனேயே அடுத்த படியை இயக்கவும்.
12.3 பயன்பாட்டிற்கு முன் ஒவ்வொரு மறுஉருவாக்கத்தையும் மெதுவாக அசைக்கவும்.
12.4 உங்கள் தோலை நிறுத்தும் தீர்விலிருந்து விலக்கி வைக்கவும், அது 0.5MH ஆகும்2SO4தீர்வு.
12.5 காலாவதியான கருவிகளைப் பயன்படுத்த வேண்டாம்.வெவ்வேறு தொகுதிகளின் எதிர்வினைகளை மாற்ற வேண்டாம், இல்லையெனில் அது உணர்திறனைக் குறைக்கும்.
12.6 சேமிப்பக நிலை: ELISA கருவிகளை 2-8℃ இல் வைத்திருங்கள், உறைய வைக்க வேண்டாம்.மைக்ரோவெல் தகடுகளுக்கு சீல் வைக்கவும், அனைத்து அடைகாக்கும் போது நேராக சூரிய ஒளியைத் தவிர்க்கவும்.மைக்ரோடிட்டர் தட்டுகளை மூடுவது பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.
12.7 அடி மூலக்கூறு கரைசல் நிறமாக மாறினால் கைவிடப்பட வேண்டும்.பூஜ்ஜிய தரநிலையின் உறிஞ்சுதல் மதிப்பு (450/630nm) 0.5 (A450nm<0.5) க்கும் குறைவாக இருந்தால் எதிர்வினைகள் மோசமடையக்கூடும்.
12.8 அடி மூலக்கூறு கரைசலைச் சேர்த்த பிறகு வண்ணமயமாக்கல் எதிர்வினைக்கு 15 நிமிடம் தேவைப்படுகிறது;நிறத்தை தீர்மானிக்க முடியாத அளவுக்கு இலகுவாக இருந்தால், அடைகாக்கும் நேரத்தை 20நிமிடங்கள் அல்லது அதற்கும் அதிகமாக நீடிக்கலாம்., 25நிமிடங்களுக்கு மேல் இருக்கக்கூடாது.மாறாக, அடைகாக்கும் நேரத்தை சரியாகக் குறைக்கவும்.
12.9 உகந்த எதிர்வினை வெப்பநிலை 25℃.அதிக அல்லது குறைந்த வெப்பநிலை உணர்திறன் மற்றும் உறிஞ்சுதல் மதிப்புகளில் மாற்றங்களுக்கு வழிவகுக்கும்.
12.சேமிப்பு நிலை மற்றும் சேமிப்பு காலம்
சேமிப்பு நிலை: 2-8℃.
சேமிப்பு காலம்: 12 மாதங்கள்.