পণ্য

পরীক্ষার নীতি

এই কিটটি পরোক্ষ-প্রতিযোগীতামূলক ELISA প্রযুক্তির উপর ভিত্তি করে।মাইক্রোটাইটার কূপগুলি কাপলিং অ্যান্টিজেন দিয়ে লেপা।Flumequineনমুনার অবশিষ্টাংশ অ্যান্টিবডির জন্য মাইক্রোটাইটার প্লেটে প্রলিপ্ত অ্যান্টিজেনের সাথে প্রতিযোগিতা করে।অ্যান্টি-অ্যান্টিবডি লেবেলযুক্ত এনজাইম যোগ করার পরে, রঙ দেখানোর জন্য টিএমবি সাবস্ট্রেট ব্যবহার করা হয়।নমুনার শোষণ নেতিবাচকভাবে এটিতে থাকা টেট্রাসাইক্লিনের সাথে সম্পর্কিত, স্ট্যান্ডার্ড কার্ভের সাথে তুলনা করার পরে, ডিলিউশন মাল্টিপল দ্বারা গুন করলে, নমুনায় ফ্লুমিকুইন অবশিষ্টাংশের পরিমাণ গণনা করা যেতে পারে।

অ্যাপ্লিকেশন

এই কিটটি মধুতে ফ্লুমিকুইন অবশিষ্টাংশের পরিমাণগত এবং গুণগত বিশ্লেষণে ব্যবহার করা যেতে পারে।

ক্রস প্রতিক্রিয়া

ফ্লুমিকুইন ……………………………………………… 100%

উপকরণ প্রয়োজন

যন্ত্রপাতি

┅┅মাইক্রোটাইটার প্লেট স্পেকট্রোফটোমিটার (450nm/630nm)

┅┅ হোমোজেনাইজার বা পাকস্থলী

┅┅শেকার

┅┅ভোর্টেক্স মিক্সার

┅┅সেন্ট্রিফিউজ

┅┅ বিশ্লেষণাত্মক ভারসাম্য (আবেদন: 0.01 গ্রাম)

┅┅স্নাতক পাইপেট: 15 মিলি

┅┅ রাবার পাইপেট বাল্ব

┅┅পলিস্টাইরিন সেন্ট্রিফিউজ টিউব: 15 মিলি, 50 মিলি

┅┅গ্লাস টেস্ট টিউব: 10 মিলি

┅┅মাইক্রোপিপেটস: 20ml-200ml, 100ml -10000ml,

250 মিলি - মাল্টিপিপেট

বিকারক

┅┅n-হেক্সেন(AR)

┅┅মিথিলিন ক্লোরাইড (AR)

┅┅এসিটোনিট্রাইল (এআর)

┅┅ডিওনাইজড জল

----- ঘনীভূত হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড (AR)

কিট উপাদান

● অ্যান্টিজেন দিয়ে লেপা 96 টি কূপের সাথে মাইক্রোটাইটার প্লেট

● স্ট্যান্ডার্ড সমাধান (6 বোতল×1ml/বোতল)

0ppb, 0.3ppb, 1.2ppb, 4.8ppb, 19.2ppb, 76.8ppb

● উচ্চ ঘনত্ব মান নিয়ন্ত্রণ:(1ml/বোতল)

…………………………………………………………100ppb

● এনজাইম কনজুগেট 12 মিলি………………………... লাল টুপি

● অ্যান্টিবডি দ্রবণ 7 মিলি ………………………………………………সবুজ ক্যাপ

● সমাধান A 7 মিলি……………………………………….. সাদা ক্যাপ

● সলিউশন বি 7 মিলি ……………………………………… লাল ক্যাপ

● স্টপ সলিউশন 7ml ………………………………………হলুদ ক্যাপ

● 20XConcentrated wash solution 40ml

…………………………………………..স্বচ্ছ টুপি

●2X নিষ্কাশন দ্রবণ 50ml…………………………… নীল ক্যাপ

বিকারক প্রস্তুতি

7.1 মধুর নমুনা

সমাধান 1 : 0.2 এম হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড দ্রবণ

ওজন 41.5 মিলি ঘনীভূত হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড, 500 মিলি ডিওনাইজড জল দিয়ে পাতলা করুন।

সমাধান 2: সমাধান ধোয়া

ঘনীভূত ধোয়ার দ্রবণকে ডিওনাইজড জল দিয়ে 1:19 এর ভলিউম অনুপাতে পাতলা করুন, যা প্লেট ধোয়ার জন্য ব্যবহার করা হবে।মিশ্রিত দ্রবণটি 1 মাসের জন্য 4℃ এ সংরক্ষণ করা যেতে পারে।

সমাধান3: নিষ্কাশন সমাধান

1:1 ভলিউম রেশনে (অথবা প্রয়োজনের উপর নির্ভর করে) ডিওনাইজড জল দিয়ে 2 × ঘনীভূত নিষ্কাশন দ্রবণ পাতলা করুন, যা নমুনা নিষ্কাশনের জন্য ব্যবহার করা হবে।এই পাতলা দ্রবণটি 4℃ তাপমাত্রায় 1 মাসের জন্য সংরক্ষণ করা যেতে পারে।

নমুনা প্রস্তুতি

8.1 অপারেশন করার আগে ব্যবহারকারীদের জন্য বিজ্ঞপ্তি এবং সতর্কতা

(a) অনুগ্রহ করে পরীক্ষার প্রক্রিয়ায় এক-বন্ধ টিপস ব্যবহার করুন, এবং বিভিন্ন বিকারক শোষণ করার সময় টিপস পরিবর্তন করুন।

(b) নিশ্চিত করুন যে সমস্ত পরীক্ষামূলক যন্ত্র পরিষ্কার আছে, অন্যথায় এটি পরীক্ষার ফলাফলকে প্রভাবিত করবে।

8.2মধুর নমুনা

----- একটি 50ml পলিস্টাইরিন সেন্ট্রিফিউজ টিউবে 2g±0.05g মধুর নমুনা ওজন করুন,

----- 2ml 0.2 M হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড দ্রবণ (সলিউশন 1), ঘূর্ণি যোগ করুন এটি সম্পূর্ণরূপে মিশ্রিত করতে, তারপর 8ml মিথিলিন ক্লোরাইড যোগ করুন, সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত করার জন্য 5 মিনিটের জন্য শেকার দিয়ে ঝাঁকান;

----- 10 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ, ঘরের তাপমাত্রায় কমপক্ষে 3000g (20-25℃);

-----সুপারনেট্যান্ট ফেজটি সরান, 2 মিলি সাবস্ট্রেট জৈব দ্রবণ একটি 10 ​​মিলি গ্লাস টিউবে নিন। নাইট্রোজেন প্রবাহের জল স্নানের নীচে সাবস্টেটটি শুকিয়ে দিন (50-60℃)

----- 1 মিলি এন-হেক্সেন যোগ করুন, 30 সেকেন্ডের জন্য ঘূর্ণি, তারপর 1 মিলি নিষ্কাশন সমাধান (সমাধান 3) যোগ করুন, 1 মিনিটের জন্য আবার ঘূর্ণি করুন।5 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ, ঘরের তাপমাত্রায় কমপক্ষে 3000 গ্রাম (20-25℃);

----- সুপারন্যাট্যান্ট ফেজটি সরান, পরীক্ষা করার জন্য 50 মিলি নিন;

9. পরীক্ষা প্রক্রিয়া

9.1 পরীক্ষার আগে নোটিশ

9.1.1 নিশ্চিত করুন যে সমস্ত রিএজেন্ট এবং মাইক্রোওয়েলগুলি ঘরের তাপমাত্রায় (20-25℃)।

9.1.2 ব্যবহার করার পর অবিলম্বে বাকি সমস্ত রিএজেন্ট 2-8℃ এ ফেরত দিন।

9.1.3 সঠিকভাবে মাইক্রোওয়েল ধোয়া পরীক্ষা প্রক্রিয়ার একটি গুরুত্বপূর্ণ পদক্ষেপ;এটি ELISA বিশ্লেষণের পুনরাবৃত্তির জন্য গুরুত্বপূর্ণ ফ্যাক্টর।

9.1.4 আলো এড়িয়ে চলুন এবং ইনকিউবেশনের সময় মাইক্রোওয়েলস ঢেকে রাখুন।

9.2 পরীক্ষামূলক ধাপ

9.2.1 ঘরের তাপমাত্রায় (20-25℃) 30মিনিটের বেশি সময় ধরে সমস্ত রিএজেন্ট বের করে নিন, ব্যবহারের আগে একজাত করুন।

9.2.2 প্রয়োজনীয় মাইক্রোওয়েলগুলি বের করুন এবং বাকিগুলি অবিলম্বে 2-8℃ তাপমাত্রায় জিপ-লক ব্যাগে ফিরিয়ে দিন৷

9.2.3 মিশ্রিত ধোয়ার দ্রবণটি ব্যবহারের আগে ঘরের তাপমাত্রায় পুনরায় উষ্ণ করা উচিত।

9.2.4সংখ্যা:প্রতিটি মাইক্রোওয়েল অবস্থানের সংখ্যা এবং সমস্ত মান এবং নমুনা সদৃশভাবে চালানো উচিত।মান এবং নমুনা অবস্থান রেকর্ড.

9.2.5মানক সমাধান/নমুনা যোগ করুন:50 μl মানক দ্রবণ বা প্রস্তুত নমুনা সংশ্লিষ্ট কূপে যোগ করুন।50µl অ্যান্টিবডি সমাধান যোগ করুন।প্লেটটি ম্যানুয়ালি ঝাঁকিয়ে আলতোভাবে মিশ্রিত করুন এবং কভার সহ 25℃ এ 30 মিনিটের জন্য সেঁকুন।

9.2.6ধোয়া:কভারটি আলতো করে সরান এবং কূপ থেকে তরলটি বিশুদ্ধ করুন এবং 4-5 বার 10 সেকেন্ডের ব্যবধানে 250µl মিশ্রিত ধোয়ার দ্রবণ (সমাধান 2) দিয়ে মাইক্রোওয়েলগুলি ধুয়ে ফেলুন।শোষক কাগজ দিয়ে অবশিষ্ট জল শোষণ করুন (বাকী বায়ু বুদবুদ অব্যবহৃত ডগা দিয়ে নির্মূল করা যেতে পারে)।

9.2.8।এনজাইম কনজুগেট:প্রতিটি কূপে এনজাইম কনজুগেট দ্রবণ 100 মিলি যোগ করুন, প্লেটটি ম্যানুয়ালি ঝাঁকিয়ে আলতোভাবে মেশান এবং কভার সহ 25℃ এ 30মিনিটের জন্য সেঁকুন।ধোয়ার ধাপটি আবার পুনরাবৃত্তি করুন।

9.2.8রঙ:প্রতিটি কূপে 50µl দ্রবণ A এবং 50µl দ্রবণ B যোগ করুন।প্লেটটি ম্যানুয়ালি ঝাঁকিয়ে আলতোভাবে মিশ্রিত করুন এবং কভার সহ 25℃ তাপমাত্রায় 15 মিনিটের জন্য সেঁকুন (12.8 দেখুন)।

9.2.9পরিমাপ করা:প্রতিটি কূপে 50µl স্টপ দ্রবণ যোগ করুন।প্লেটটি ম্যানুয়ালি ঝাঁকিয়ে আলতোভাবে মিশ্রিত করুন এবং একটি বায়ু খালির বিপরীতে 450nm এ শোষণ পরিমাপ করুন (এটি 450/630nm এর দ্বৈত-তরঙ্গদৈর্ঘ্যের সাথে পরিমাপ করার পরামর্শ দেওয়া হয়েছে। স্টপ সলিউশন যোগ করার পরে 5 মিনিটের মধ্যে ফলাফল পড়ুন।) (আমরা দৃষ্টিশক্তি দ্বারাও পরিমাপ করতে পারি। ELIASA যন্ত্রের সংক্ষেপে স্টপ সমাধান ছাড়াই)

ফলাফল

10.1 শতাংশ শোষণ

মান এবং নমুনার জন্য প্রাপ্ত শোষণ মানগুলির গড় মানগুলিকে প্রথম মান (শূন্য মান) এর শোষণ মান দিয়ে ভাগ করা হয় এবং 100% দ্বারা গুণ করা হয়।এইভাবে শূন্য মানকে 100% এর সমান করা হয় এবং শোষণের মানগুলি শতাংশে উদ্ধৃত করা হয়।

শোষণ (%) = B/B0 × 100%

B —— শোষণ মান (বা নমুনা)

B0 ——শোষণ শূন্য মান

10.2 স্ট্যান্ডার্ড কার্ভ

একটি আদর্শ বক্ররেখা আঁকতে: মানগুলির শোষণ মানকে y-অক্ষ হিসাবে নিন, ফ্লুমিকুইন স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণ (ppb) এর ঘনত্বের আধা লগারিদমিক x-অক্ষ হিসাবে।

--- দ্যফ্লুমিকুইনপ্রতিটি নমুনার ঘনত্ব (ppb), যা ক্রমাঙ্কন বক্ররেখা থেকে পড়া যেতে পারে, অনুসরণ করা প্রতিটি নমুনার সংশ্লিষ্ট তরলীকরণ একাধিক দ্বারা গুণিত হয় এবং নমুনার প্রকৃত ঘনত্ব পাওয়া যায়।

ELISA কিটগুলির ডেটা হ্রাসের জন্য, বিশেষ সফ্টওয়্যার তৈরি করা হয়েছে, যা অনুরোধে সরবরাহ করা যেতে পারে।

11. সংবেদনশীলতা, নির্ভুলতা এবং নির্ভুলতা

টেস্ট সংবেদনশীলতা：0.3 পিপিবি

মধু নমুনা পাতলা ফ্যাক্টর: 2

সনাক্তকরণ সীমা

মধুর নমুনা ---------------------------------- -1 পিপিবি

সঠিকতা

মধুর নমুনা --------------------------------------------- 90±20 %

যথার্থতা

ELISA কিটের বৈচিত্র সহগ 10% এর কম।

12. বিজ্ঞপ্তি

12.1 মান এবং নমুনার জন্য প্রাপ্ত শোষণ মানগুলির গড় মান হ্রাস করা হবে যদি বিকারক এবং নমুনাগুলি ঘরের তাপমাত্রায় (20-25℃) নিয়ন্ত্রিত না হয়।

12.2 অসফল পুনরাবৃত্তি এড়াতে এবং মাইক্রোওয়েল হোল্ডারে ট্যাপ করার পরপরই পরবর্তী ধাপটি পরিচালনা করার জন্য ধাপগুলির মধ্যে মাইক্রোওয়েলগুলিকে শুকাতে দেবেন না।

12.3।ব্যবহারের আগে প্রতিটি রিএজেন্টকে একজাত করুন।

12.4।আপনার ত্বককে স্টপ সলিউশন থেকে দূরে রাখুন কারণ এটি হল 2M H₂SO₄সমাধান

12.5 পুরানো কিট ব্যবহার করবেন না।বিভিন্ন ব্যাচের বিকারক বিনিময় করবেন না, কারণ এটি সংবেদনশীলতা হ্রাস করবে।

12.6 স্টোরেজ শর্ত:

ELISA কিটগুলিকে 2-8℃ তাপমাত্রায় রাখুন, হিমায়িত করবেন না।সীল বিশ্রাম মাইক্রোওয়েল প্লেট সব ইনকিউবেশন সময় সোজা সূর্যালোক এড়িয়ে চলুন.মাইক্রোটাইটার প্লেট ঢেকে রাখার পরামর্শ দেওয়া হয়।

12.7 বিকারক খারাপ হওয়ার ইঙ্গিত:

সাবস্ট্রেট দ্রবণটি রং হয়ে গেলে পরিত্যাগ করা উচিত।

রিএজেন্টগুলি খারাপ হতে পারে যদি শূন্য স্ট্যান্ডার্ডের শোষণের মান (450/630nm) 0.5 (A450nm＜0.5) এর কম হয়।

12.8 সমাধান A এবং সলিউশন B যোগ করার পরে রঙিন প্রতিক্রিয়ার জন্য 15 মিনিটের প্রয়োজন হয়। এবং আপনি ইনকিউবেশন সময় 20 মিনিট থেকে আরও দীর্ঘ করতে পারেন যদি রঙ নির্ধারণ করা খুব হালকা হয়।25 মিনিটের বেশি কখনই হবে না, বিপরীতভাবে, ইনকিউবেশন সময় সঠিকভাবে ছোট করুন।

12.9 সর্বোত্তম প্রতিক্রিয়া তাপমাত্রা 25℃।উচ্চ বা নিম্ন তাপমাত্রা সংবেদনশীলতা এবং শোষণ মান পরিবর্তনের দিকে পরিচালিত করবে।

13. স্টোরেজ

স্টোরেজ অবস্থা: 2-8℃.

স্টোরেজ সময়কাল: 12 মাস।