produkt

Competitive Enzyme Immunoassay Kit foar kwantitative analyze fan Flumequine

Koarte beskriuwing:

Flumequine is in lid fan 'e quinolone-antibakteriële, dy't wurdt brûkt as in heul wichtich anty-ynfektyf yn klinysk feterinêre en akwatyske produkt foar syn breed spektrum, hege effisjinsje, lege toxisiteit en sterke weefselpenetraasje.It wurdt ek brûkt foar sykte terapy, previnsje en groei befoardering.Om't it kin liede ta drugsresistinsje en de potinsjele karzinogeniteit, wêrfan de hege limyt binnen it dierweefsel is foarskreaun yn 'e EU, Japan (de hege limyt is 100ppb yn' e EU).

Op it stuit binne spektrofluorometer, ELISA en HPLC de wichtichste metoaden om flumequine-residu te detektearjen, en ELISA hat in routinemetoade west foar de hege gefoelichheid en maklike operaasje.


Produkt Detail

Produkt Tags

Testprinsipe

Dizze kit is basearre op yndirekt-kompetitive ELISA-technology.De mikrotiterboarnen binne bedekt mei koppelingsantigen.Flumequineresidu yn 'e stekproef konkurrearret mei it antigeen bedekt op' e mikrotiterplaat foar it antykodym.Nei de tafoeging fan enzyme markearre anty-antibody, wurdt TMB-substraat brûkt om de kleur te sjen.Absorpsje fan 'e stekproef is negatyf besibbe oan' e tetracycline dy't deryn wenje, nei fergeliking mei de Standertkromme, fermannichfâldige mei de verdunningsmultipel, kin de kwantiteit fan Flumequine-residu yn 'e stekproef wurde berekkene.

Oanfraach

Dizze kit kin brûkt wurde yn kwantitative en kwalitative analyse fan flumequine-residu yn huning.

Cross-reaksjes

Flumequine ………………………………………………… 100%

 

Materialen nedich

Equipments

┅┅Mikrotiterplaatspektrofotometer (450nm/630nm)

┅┅ Homogenizer of stomacher

┅┅Shaker

┅┅Vortex mixer

┅┅Sentrifuge

┅┅Analytyske lykwicht (ynduktinsje: 0.01g)

┅┅Afstudearre pipet: 15ml

┅┅Rubber pipetbol

┅┅Polystyrene-sintrifugebuis: 15ml, 50ml

┅┅Glêzen reageerbuis: 10ml

┅┅Mikropipetten: 20ml-200ml, 100ml -10000ml,

250 ml - meardere pipet

Reagents

┅┅n-hexaan (AR)

┅┅Methylene chloride (AR)

┅┅Acetonitrile (AR)

┅┅Deionisearre wetter

-----Konsintrearre sâltsoer (AR)

 

Kit Components

● Microtiter plaat mei 96 putten bedekt mei antigeen

● Standert oplossingen (6 flessen × 1 ml / flesse)

0ppb, 0.3ppb, 1.2ppb, 4.8ppb, 19.2ppb, 76.8ppb

● Standertkontrôle mei hege konsintraasje: (1ml / flesse)

…………………………………………………………………100 ppb

● Enzym konjugaat 12ml……………………………… reade kap

● Antibody-oplossing 7ml …………..……..….…..griene pet

● Oplossing A 7ml…………..………………………………………..witte kap

● Solution B 7ml ………………………………………………………… reade dop

● Stop oplossing 7ml ………………………………………… giele dop

● 20XConcentrated wash oplossing 40ml

…………………………………………..…..transparante kap

●2X Ekstraksje oplossing 50ml……………………… blauwe kap

 

Reagents Tarieding

7.1 Honey sample

Oplossing 1: 0,2 M Saltsûre oplossing

Gewicht 41.5ml Konsintrearre sâltsoer, verdund mei deionisearre wetter oant 500 ml.

Oplossing 2: Waskje oplossing

Ferwiderje de konsintrearre waskoplossing mei deionisearre wetter yn it folumeferhâlding fan 1:19, dat sil wurde brûkt foar it waskjen fan de platen.de verdunde oplossing kin wurde opslein by 4 ℃ foar 1 moanne.

Oplossing3: winning oplossing

Ferwiderje de 2 × konsintrearre ekstraksje-oplossing mei deionisearre wetter yn it folume rantsoen fan 1: 1 (of ôfhinklik fan eask), dat sil wurde brûkt foar sample-ekstraksje.Dizze verdunde oplossing kin bewarre wurde foar 1 moanne by 4 ℃.

Sample Preparations

8.1 Meidieling en foarsoarchsmaatregels foar de brûkers foar operaasje

(a) Brûk asjebleaft ienmalige tips yn it proses fan it eksperimint, en feroarje de tips as jo ferskate reagens absorbearje.

(b) Soargje derfoar dat alle eksperimintele ynstruminten skjin binne, oars sil it it assayresultaat beynfloedzje.

8.2Honey sample

-----Weagje 2g ± 0.05g huningmonster yn in 50ml polystyrene sintrifugebuis,

----- Add 2ml 0.2 M Saltsoeroplossing (Oplossing 1), vortex om it folslein te mingjen, foegje dan 8ml methylenechloride ta, skodzje mei shaker foar 5min om folslein op te lossen;

-----sintrifuge foar 10 min, op syn minst 3000g by keamertemperatuer (20-25 ℃);

-----Fuortsmite de supernatant faze, nim 2 ml fan de substraat organyske oplossing nei in 10 ml glêzen buis. droech de substate ûnder wetter bad fan stikstof flow (50-60 ℃)

----- Foegje 1 ml n-hexaan ta, werhelje foar 30s, foegje dan 1 ml ekstraksjeoplossing (oplossing 3) ta, werhelje wer foar 1 min.Centrifuge foar 5min, op syn minst 3000g by keamertemperatuer (20-25 ℃);

----- Fuortsmite de supernatant faze, nim 50ml foar assay;

9. Assay proses

9.1 Notysje foar assay

9.1.1 Soargje derfoar dat alle reagents en microwells binne allegear by keamertemperatuer (20-25 ℃).

9.1.2 Werom alle rest reagents werom nei 2-8 ℃ fuortendaliks nei gebrûk.

9.1.3 It korrekt waskjen fan de mikrowellen is in wichtige stap yn it proses fan assay;it is de fitale faktor foar de werhelling fan 'e ELISA-analyse.

9.1.4 Foarkom it ljocht en bedekke de mikrowellen tidens ynkubaasje.

9.2 Assay Stappen

9.2.1 Nim alle reagents út by keamertemperatuer (20-25 ℃) foar mear as 30min, homogenisearje foar gebrûk.

9.2.2 Krij de nedige mikrowellen út en bring de rest fuortendaliks werom yn 'e zip-lock tas op 2-8 ℃.

9.2.3 De verdunde wask oplossing moat wurde rewarmed te wêzen op keamertemperatuer foar gebrûk.

9.2.4Nûmer:Nûmer elke mikrowellposysje en alle noarmen en samples moatte yn duplikaat wurde útfierd.Record de noarmen en samples posysjes.

9.2.5Foegje standert oplossing/sample ta:Foegje 50 µl standert oplossing of taret monster ta oan oerienkommende putten.Foegje 50 µl antybody-oplossing ta.Mingje sêft troch de plaat mei de hân te skodzjen en ynkubearje foar 30 minuten by 25 ℃ mei deksel.

9.2.6Waskje:Ferwiderje de dekking foarsichtich en reinigje de flüssigens út 'e putten en spielje de mikrowellen mei 250µl verdunde waskoplossing (oplossing 2) yn in ynterval fan 10s foar 4-5 kear.Absorbearje it oerbliuwende wetter mei absorberend papier (de rest luchtbel kin wurde eliminearre mei net brûkte tip).

9.2.8.Enzym konjugat:Foegje enzyme-konjugaat-oplossing 100ml ta oan elke put, Mix sêft troch de plaat mei de hân te skodzjen en ynkubearje foar 30 minuten by 25 ℃ mei deksel.Werhelje de waskstap wer.

9.2.8Kleur:Foegje 50 µl oplossing A en 50 µl oplossing B ta oan elke put.Mingje sêft troch de plaat mei de hân te skodzjen en ynkubearje foar 15 min by 25 ℃ mei deksel (sjoch 12.8).

9.2.9Mjitte:Foegje 50 µl de stop-oplossing ta oan elke put.Mingje foarsichtich troch de plaat mei de hân te skodzjen en mjit de absorption op 450nm tsjin in loftblank (It wurdt oanrikkemandearre maatregel mei de dûbele golflingte fan 450/630nm. Lês it resultaat binnen 5min nei tafoeging fan stopoplossing. ) (Wy kinne ek mjitte troch sicht sûnder stopoplossing yn koart fan it ELIASA-ynstrumint)

Results

10.1 Persintaazje absorbance

De gemiddelde wearden fan 'e absorbânsjewearden krigen foar de noarmen en de samples wurde dield troch de absorbânsjewearde fan' e earste standert (nulstandert) en fermannichfâldige mei 100%.De nulstandert wurdt dus gelyk makke oan 100% en de absorbânsjewearden wurde oanhelle yn persintaazjes.

Absorbânsje (%) = B/B0 × 100%

B - Absorbânsje standert (as sample)

B0 ——absorbance nul standert

10.2 Standert Curve

Om in standert kromme te tekenjen: Nim de absorbânsjewearde fan noarmen as y-as, semi-logaritmysk fan 'e konsintraasje fan' e flumequine-standertoplossing (ppb) as x-as.

--- Deflumequinekonsintraasje fan elk stekproef (ppb), dat kin lêzen wurde út de kalibraasje kromme, wurdt fermannichfâldige mei de oerienkommende fertinne mearfâldichheid fan elk stekproef folge, en de eigentlike konsintraasje fan stekproef wurdt krigen.

Foar gegevensreduksje fan 'e ELISA-kits is spesjale software ûntwikkele, dy't op oanfraach kin wurde levere.

11. Gefoelichheid, krektens en krektens

Test gefoelichheid:0.3ppb

Honey Sample verdunningsfaktor: 2

Detection limyt

Honey sample------------------------------------------------- -1ppb

Krektens

Honeymonster ---------------------------------------------------- 90±20 %

Krektens

Fariaasjekoëffisjint fan 'e ELISA-kit is minder dan 10%.

12. Notysje

12.1 De gemiddelde wearden fan 'e absorbânsjewearden krigen foar de noarmen en de samples sille wurde fermindere as de reagentia en samples net binne regele op keamertemperatuer (20-25 ℃).

12.2 Lit mikrowellen net droegje tusken stappen om mislearre werhelling te foarkommen en de folgjende stap direkt nei it tapjen fan 'e mikrowellhâlder operearje.

12.3.Homogenisearje elk reagens foar gebrûk.

12.4.Hâld jo hûd fuort fan 'e stop-oplossing, want it is de 2M H2SO4oplossing.

12.5 Brûk de kits net ferâldere.Wissel de reagenzjes fan ferskate batches net út, want it sil de gefoelichheid sakje.

12.6 Opslach betingst:

Hâld de ELISA-kits op 2-8 ℃, net befrieze.Seal rest microwell platen Avoid rjocht sinneljocht tidens alle incubations.It is oan te rieden om de mikrotiterplaten te dekken.

12.7 Yndikaasjes foar de reagenzjes dy't min wurde:

Substraatoplossing moat ferlitten wurde as it kleuren feroaret.

De reagenzjes kinne ferkeard wurde as de absorbânsjewearde (450/630nm) fan 'e nulstandert minder is dan 0.5 (A450nm<0.5).

12.8 De kleurreaksje moat 15min nei it tafoegjen fan Solution A en Solution B. En jo kinne de ynkubaasjetiid fan 20min oant mear ferlingje as de kleur te ljocht is om te bepalen.Nea boppe 25min, Krektoarsom, koarter de incubation tiid goed.

12.9 De optimale reaksjetemperatuer is 25 ℃.Hegere of legere temperatuer sil liede ta feroaringen fan gefoelichheid en absorbance wearden.

13. Opslach

Opslach betingst: 2-8 ℃.

Opslach perioade: 12 moannen.


  • Foarige:
  • Folgjende:

  • Skriuw jo berjocht hjir en stjoer it nei ús