proizvod

Komplet kompetitivnog enzimskog imunološkog testa za kvantitativnu analizu Flumequina

Kratki opis:

Flumequine je član skupine kinolonskih antibakterijskih lijekova koji se koriste kao vrlo važni antiinfektivi u kliničkim veterinarskim i vodenim proizvodima zbog svog širokog spektra, visoke učinkovitosti, niske toksičnosti i snažnog prodiranja u tkiva.Također se koristi za terapiju bolesti, prevenciju i poticanje rasta.Budući da može dovesti do otpornosti na lijekove i potencijalne karcinogenosti, čija je visoka granica unutar životinjskog tkiva propisana u EU, Japanu (visoka granica je 100 ppb u EU).

Trenutno su spektrofluorometar, ELISA i HPLC glavne metode za otkrivanje rezidua flumequina, a ELISA je rutinska metoda zbog visoke osjetljivosti i jednostavnog rada.


Pojedinosti o proizvodu

Oznake proizvoda

Test Princip

Ovaj se komplet temelji na neizravno-kompetitivnoj ELISA tehnologiji.Mikrotitarske jažice obložene su antigenom za spajanje.Flumequineostatak u uzorku natječe se s antigenom obloženim na mikrotitarskoj ploči za protutijelo.Nakon dodavanja enzimom obilježenog anti-antitijela, TMB supstrat se koristi za prikaz boje.Apsorpcija uzorka negativno je povezana s ostatkom tetraciklina u njemu, nakon usporedbe sa standardnom krivuljom, pomnoženom s višestrukim razrjeđenjem, može se izračunati količina ostatka Flumequina u uzorku.

Prijave

Ovaj pribor se može koristiti u kvantitativnoj i kvalitativnoj analizi ostataka flumequina u medu.

Križne reakcije

Flumequine …………………..……………………… 100%

 

Potrebni materijali

Oprema

┅┅Spektrofotometar mikrotitarske ploče (450nm/630nm)

┅┅Homogenizator ili stomaher

┅┅Shaker

┅┅Vortex miješalica

┅┅Centrifuga

┅┅Analitička vaga (induktivitet: 0,01g)

┅┅Graduirana pipeta: 15 ml

┅┅Gumena kuglica pipete

┅┅Polistirenska epruveta za centrifugu: 15 ml, 50 ml

┅┅Staklena epruveta:10ml

┅┅Mikropipete: 20ml-200ml, 100ml -10000ml,

250 ml - multipipeta

Reagensi

┅┅n-heksan (AR)

┅┅Metilen klorid (AR)

┅┅acetonitril (AR)

┅┅Deionizirana voda

-----Koncentrirana solna kiselina (AR)

 

Komponente kompleta

● Mikrotitarska ploča s 96 jažica obloženih antigenom

● Standardne otopine (6 bočica × 1 ml/bočica)

0 ppb, 0,3 ppb, 1,2 ppb, 4,8 ppb, 19,2 ppb, 76,8 ppb

● Standardna kontrola visoke koncentracije: (1 ml/bočica)

…………………………………………………......100 ppb

● Enzimski konjugat 12 ml………………………... crveni čep

● Otopina antitijela 7 ml …………..……..….…..zeleni čep

● Otopina A 7 ml……..…………………..………..bijeli čep

● Otopina B 7 ml …………….…………..………… crvena kapica

● Stop otopina 7 ml ……………………..………žuta kapica

● 20X Koncentrirana otopina za pranje 40 ml

………………………………………..…..prozirni čep

●2X Otopina za ekstrakciju 50 ml………………...… plavi čep

 

Priprema reagensa

7.1 Uzorak meda

Otopina 1 : 0,2 M otopina klorovodične kiseline

Težina 41,5 ml Koncentrirana klorovodična kiselina, razrijeđena deioniziranom vodom do 500 ml.

Otopina 2: Otopina za pranje

Koncentriranu otopinu za pranje razrijedite deioniziranom vodom u volumnom omjeru 1:19, koja će se koristiti za pranje ploča.razrijeđena otopina može se čuvati na 4 ℃ 1 mjesec.

Riješenje3: otopina za ekstrakciju

Razrijedite 2× koncentriranu otopinu za ekstrakciju s deioniziranom vodom u volumenskom omjeru 1:1 (ili ovisno o zahtjevu), koja će se koristiti za ekstrakciju uzorka.Ova razrijeđena otopina može se čuvati 1 mjesec na 4 ℃.

Pripreme uzoraka

8.1 Obavijest i mjere opreza za korisnike prije rada

(a) Koristite jednokratne vrhove u procesu eksperimenta i mijenjajte vrhove kada apsorbirate drugi reagens.

(b) Uvjerite se da su svi eksperimentalni instrumenti čisti, inače će to utjecati na rezultat analize.

8.2Uzorak meda

-----Izvažite 2g±0,05g uzorka meda u polistirensku epruvetu za centrifugiranje od 50ml,

-----Dodajte 2 ml 0,2 M otopine klorovodične kiseline (otopina 1), promiješajte da se potpuno promiješa, zatim dodajte 8 ml metilen klorida, mućkajte mućkalicom 5 minuta da se potpuno otopi;

-----Centrifugirajte 10 minuta, najmanje 3000 g na sobnoj temperaturi (20-25 ℃);

-----Uklonite fazu supernatanta, stavite 2 ml organske otopine supstrata u staklenu epruvetu od 10 ml. osušite supstrat u vodenoj kupelji s protokom dušika (50-60 ℃)

-----Dodajte 1 ml n-heksana, vrtložite 30 sekundi, zatim dodajte 1 ml ekstrakcijske otopine (otopina 3), ponovno vrtložite 1 minutu.Centrifugirajte 5 minuta, najmanje 3000 g na sobnoj temperaturi (20-25 ℃);

-----Uklonite fazu supernatanta, uzmite 50 ml za analizu;

9. Postupak ispitivanja

9.1 Obavijest prije analize

9.1.1 Provjerite jesu li svi reagensi i mikrojažice na sobnoj temperaturi (20-25 ℃).

9.1.2 Vratite sve ostale reagense na 2-8 ℃ odmah nakon upotrebe.

9.1.3 Pravilno pranje mikrojažica važan je korak u procesu analize;to je ključni faktor za ponavljanje ELISA analize.

9.1.4 Izbjegavajte svjetlo i pokrijte mikrojažice tijekom inkubacije.

9.2 Koraci ispitivanja

9.2.1 Izvadite sve reagense na sobnoj temperaturi (20-25 ℃) dulje od 30 minuta, homogenizirajte prije upotrebe.

9.2.2 Izvadite potrebne mikrojažice i odmah vratite ostatak u vrećicu sa zatvaračem na 2-8 ℃.

9.2.3 Razrijeđenu otopinu za ispiranje treba ponovno zagrijati na sobnu temperaturu prije upotrebe.

9.2.4Broj:Numerirajte svaku poziciju mikrojažice i sve standarde i uzorke treba izvoditi u duplikatu.Zabilježite položaje standarda i uzoraka.

9.2.5Dodajte standardnu ​​otopinu/uzorak:Dodajte 50 µl standardne otopine ili pripremljenog uzorka u odgovarajuće jažice.Dodajte 50 µl otopine protutijela.Lagano promiješajte ručnim protresanjem ploče i inkubirajte 30 minuta na 25 ℃ s poklopcem.

9.2.6Pranje:Nježno uklonite poklopac i očistite tekućinu iz jažica te isperite mikrojažice s 250 µl razrijeđene otopine za pranje (otopina 2) u intervalu od 10 s 4-5 puta.Upijte preostalu vodu upijajućim papirom (ostatak mjehurića zraka možete ukloniti neiskorištenim vrhom).

9.2.8.Enzimski konjugat:Dodajte 100 ml otopine enzimskog konjugata u svaku jažicu, lagano promiješajte ručnim mućkanjem ploče i inkubirajte 30 minuta na 25 ℃ s poklopcem.Ponovno ponovite korak pranja.

9.2.8Obojenost:Dodajte 50 µl otopine A i 50 µl otopine B u svaku jažicu.Lagano promiješajte ručnim protresanjem ploče i inkubirajte 15 minuta na 25 ℃ s poklopcem (vidi 12.8).

9.2.9Mjera:Dodajte 50 µl stop otopine u svaku jažicu.Lagano promiješajte ručnim protresanjem ploče i izmjerite apsorbanciju na 450 nm u odnosu na slijepu probu zraka (preporučuje se mjerenje s dvostrukom valnom duljinom od 450/630 nm. Očitajte rezultat unutar 5 minuta nakon dodavanja stop otopine. ) (Možemo mjeriti i pogledom bez rješenja za zaustavljanje ukratko od ELIASA instrumenta)

Rezultati

10.1 Postotak apsorbancije

Srednje vrijednosti vrijednosti apsorbancije dobivene za standarde i uzorke dijele se s vrijednošću apsorbancije prvog standarda (nulti standard) i množe sa 100%.Nulti standard je stoga jednak 100%, a vrijednosti apsorbancije navedene su u postocima.

Apsorpcija (%) = B/B0 × 100%

B ——standard apsorpcije (ili uzorak)

B0 ——standard apsorpcije nula

10.2 Standardna krivulja

Za crtanje standardne krivulje: uzmite vrijednost apsorbancije standarda kao y-os, polulogaritamsku koncentraciju standardne otopine flumequina (ppb) kao x-os.

--- Theflumekinkoncentracija svakog uzorka (ppb), koja se može očitati iz kalibracijske krivulje, množi se s odgovarajućim višestrukim razrjeđenjem svakog uzorka koji se prati i dobiva se stvarna koncentracija uzorka.

Za smanjenje podataka ELISA kitova razvijen je poseban softver koji se može dobiti na zahtjev.

11. Osjetljivost, točnost i preciznost

Testirajte osjetljivost:0,3 ppb

Faktor razrjeđenja uzorka meda: 2

Granica detekcije

Uzorak meda ------------------------------------------------- -1 ppb

Točnost

Uzorak meda -------------------------------------------------- 90±20 %

Preciznost

Koeficijent varijacije ELISA kita manji je od 10%.

12. Obavijest

12.1 Srednje vrijednosti vrijednosti apsorbancije dobivene za standarde i uzorke smanjit će se ako reagensi i uzorci nisu podešeni na sobnu temperaturu (20-25 ℃).

12.2 Nemojte dopustiti da se mikrojažice osuše između koraka kako biste izbjegli neuspješno ponavljanje i izvršite sljedeći korak odmah nakon što dodirnete držač mikrojažica.

12.3.Homogenizirajte svaki reagens prije upotrebe.

12.4.Držite kožu podalje od stop otopine jer je to 2M H2SO4riješenje.

12.5 Nemojte koristiti komplete koji su zastarjeli.Ne mijenjajte reagense iz različitih serija jer će to smanjiti osjetljivost.

12.6 Uvjeti skladištenja:

Čuvajte ELISA setove na 2-8 ℃, nemojte zamrzavati.Zatvorite pločice s mikrojažicama. Izbjegavajte izravnu sunčevu svjetlost tijekom svih inkubacija.Preporuča se prekrivanje mikrotitarskih ploča.

12.7 Indikacije za kvar reagensa:

Otopinu supstrata treba napustiti ako oboji.

Reagensi mogu biti loši ako je vrijednost apsorbancije (450/630 nm) nultog standarda manja od 0,5 (A450 nm <0,5).

12.8 Za reakciju bojenja potrebno je 15 minuta nakon dodavanja otopine A i otopine B. Možete produljiti raspon vremena inkubacije od 20 minuta na više ako je boja presvijetla da bi se odredila.Nikada nemojte prekoračiti 25 minuta, naprotiv, pravilno skratite vrijeme inkubacije.

12.9 Optimalna temperatura reakcije je 25 ℃.Viša ili niža temperatura dovest će do promjena osjetljivosti i vrijednosti apsorbancije.

13. Skladištenje

Uvjeti skladištenja: 2-8 ℃.

Rok skladištenja: 12 mjeseci.


  • Prethodna:
  • Sljedeći:

  • Ovdje napišite svoju poruku i pošaljite nam je