produkto

Competitive Enzyme Immunoassay Kit alang sa Quantitative analysis sa Flumequine

Mubo nga paghulagway:

Ang Flumequine usa ka miyembro sa quinolone antibacterial, nga gigamit ingon usa ka hinungdanon nga anti-infective sa klinikal nga beterinaryo ug produkto sa tubig alang sa halapad nga spectrum, taas nga kahusayan, ubos nga toxicity ug kusog nga pagsulod sa tisyu.Gigamit usab kini alang sa therapy sa sakit, pagpugong ug pagpauswag sa pagtubo.Tungod kay kini mahimong mosangpot sa pagsukol sa droga ug ang potensyal nga carcinogenicity, ang taas nga limitasyon diin sulod sa tisyu sa hayop gireseta sa EU, Japan (ang taas nga limitasyon mao ang 100ppb sa EU).

Sa pagkakaron, ang spectrofluorometer, ELISA ug HPLC mao ang mga nag-unang pamaagi sa pag-ila sa residu sa flumequine, ug ang ELISA usa ka naandan nga pamaagi alang sa taas nga pagkasensitibo ug sayon ​​nga operasyon.


Detalye sa Produkto

Mga Tag sa Produkto

Prinsipyo sa Pagsulay

Kini nga kit gibase sa dili direkta nga kompetisyon nga teknolohiya sa ELISA.Ang mga atabay sa microtiter gitabonan sa coupling antigen.FlumequineAng nahabilin sa sample nakigkompetensya sa antigen nga adunay sapaw sa microtiter plate alang sa antibody.Pagkahuman sa pagdugang sa enzyme nga gimarkahan nga anti-antibody, ang substrate sa TMB gigamit aron ipakita ang kolor.Ang pagsuyup sa sample negatibo nga may kalabutan sa tetracycline nga nagpuyo niini, pagkahuman sa pagtandi sa Standard Curve, nga gipadaghan sa daghang pagtunaw, ang gidaghanon sa nahabilin sa Flumequine sa sample mahimong makalkula.

Mga aplikasyon

Kini nga kit mahimong gamiton sa quantitative ug qualitative analysis sa flumequine residue sa honey.

Mga cross-reaksyon

Flumequine ……………………………………………………… 100%

 

Mga Materyal nga Gikinahanglan

Mga kahimanan

┅┅Microtiter plate spectrophotometer (450nm/630nm)

┅┅Homogenizer o tiyan

┅┅Shaker

┅┅Vortex mixer

┅┅Centrifuge

┅┅Analytical balanse (inductance: 0.01g)

┅┅Graduated pipette: 15ml

┅┅Goma nga pipette nga bombilya

┅┅Polystyrene Centrifuge tube: 15ml, 50ml

┅┅Glass test tube: 10ml

┅┅Micropipettes: 20ml-200ml, 100ml -10000ml,

250ml - daghang pipet

Mga reagents

┅┅n-hexane(AR)

┅┅Methylene chloride(AR)

┅┅Acetonitrile(AR)

┅┅Deionized nga tubig

----- Konsentrado nga hydrochloric acid (AR)

 

Mga sangkap sa Kit

● Microtiter plate nga adunay 96 ka atabay nga giputos ug antigen

● Mga standard nga solusyon(6 ka botelya×1ml/botelya)

0ppb, 0.3ppb, 1.2ppb, 4.8ppb, 19.2ppb, 76.8ppb

● Taas nga konsentrasyon nga standard control:(1ml/botelya)

…………………………………………………………………100ppb

● Enzyme conjugate 12ml………………………………... pula nga takup

● Antibody nga solusyon 7ml ……………………………………………..berde nga takup

● Solusyon A 7ml………………………………………………..puti nga takup

● Solusyon B 7ml …………………………………………. pula nga takup

● Ihunong ang solusyon 7ml ……………………………………………. yellow nga takup

● 20XConcentrated nga solusyon sa paghugas 40ml

………………………………………………………..transparent nga takup

●2X Extraction solution 50ml…………………………… asul nga takup

 

Pag-andam sa mga Reagents

7.1 Sampol sa dugos

Solusyon 1: 0.2 M Hydrochloric acid solusyon

Timbang 41.5ml Concentrated hydrochloric acid , dilute sa deionized nga tubig ngadto sa 500 ml.

Solusyon 2: Paghugas sa solusyon

Dilute ang concentrated wash solution sa deionized nga tubig sa volume ratio nga 1:19, nga gamiton sa paghugas sa mga plato.ang lasaw nga solusyon mahimong tipigan sa 4 ℃ sulod sa 1 ka bulan.

Solusyon3: solusyon sa pagkuha

Dilute ang 2×concentrated extraction solution sa deionized water sa volume ration nga 1:1 (o depende sa kinahanglanon), nga gamiton para sa sample extraction.Kini nga lasaw nga solusyon mahimong tipigan sulod sa 1 ka bulan sa 4 ℃.

Sampol nga Pagpangandam

8.1 Pahibalo ug pag-amping alang sa mga tiggamit sa wala pa ang operasyon

(a) Palihog gamita ang one-off nga mga tip sa proseso sa eksperimento, ug usba ang mga tip kung mosuhop sa lain-laing reagent.

(b) Siguruha nga ang tanan nga mga instrumento sa eksperimento limpyo, kung dili kini makaapekto sa resulta sa pagsulay.

8.2Sampol sa dugos

----- Timbang 2g±0.05g dugos sample ngadto sa usa ka 50ml polystyrene centrifuge tube,

-----Idugang ang 2ml 0.2 M Hydrochloric acid nga solusyon (Solution 1), vortex aron hingpit nga isagol, dayon idugang ang 8ml methylene chloride, pag-uyog sa shaker sulod sa 5min aron hingpit nga matunaw;

----- Centrifuge sa 10 min, labing menos 3000g sa temperatura sa lawak (20-25 ℃);

-----Kuhaa ang supernatant phase, kuhaa ang 2 ml sa substrate nga organikong solusyon sa 10 ml nga glass tube.uga ang substate sa ilawom sa tubig nga kaligoanan sa Nitrogen flow (50-60 ℃)

-----Idugang ang 1 ml n-hexane,vortex sa 30s, unya idugang ang 1ml nga solusyon sa pagkuha (solusyon 3), vortex pag-usab sa 1min.Centrifuge alang sa 5min, labing menos 3000g sa temperatura sa lawak (20-25 ℃);

-----Kuhaa ang supernatant phase, kuhaa ang 50ml para sa assay;

9. Proseso sa pagsulay

9.1 Matikdi sa dili pa ang pagsulay

9.1.1 Siguruha nga ang tanan nga mga reagents ug microwell anaa sa temperatura sa kwarto (20-25 ℃).

9.1.2 Ibalik ang tanan nga nahabilin nga reagents sa 2-8 ℃ pagkahuman dayon magamit.

9.1.3 Ang paghugas sa mga microwell sa husto usa ka importante nga lakang sa proseso sa pagsulay;kini ang hinungdanon nga hinungdan sa pagbalik-balik sa pagtuki sa ELISA.

9.1.4 Likayi ang kahayag ug tabuni ang mga microwell sa panahon sa paglumlum.

9.2 Mga Lakang sa Pagsusi

9.2.1 Kuhaa ang tanan nga mga reagents sa temperatura sa kwarto (20-25 ℃) sa sobra sa 30min, homogenize sa dili pa gamiton.

9.2.2 Kuhaa ang mga microwell nga gikinahanglan ug ibalik ang nahabilin sa zip-lock bag sa 2-8 ℃ dayon.

9.2.3 Ang lasaw nga solusyon sa paghugas kinahanglang ipainit pag-usab nga anaa sa temperatura sa lawak sa dili pa gamiton.

9.2.4Numero:Numerohan ang matag posisyon sa microwell ug ang tanan nga mga sumbanan ug mga sample kinahanglan ipadagan sa doble.Irekord ang mga sumbanan ug mga sampol nga posisyon.

9.2.5Idugang ang standard nga solusyon/sampol:Idugang ang 50 µl nga standard nga solusyon o giandam nga sample sa katugbang nga mga atabay.Idugang ang 50µl antibody solution.Hinay-hinay nga pag-mix pinaagi sa pag-uyog sa plato nga mano-mano ug paglumlom sa 30min sa 25 ℃ nga adunay tabon.

9.2.6Hugasan:Kuhaa ang tabon sa hinay ug putli ang likido gikan sa mga atabay ug hugasan ang mga microwell gamit ang 250µl nga lasaw nga solusyon sa paghugas (solusyon 2) sa interval nga 10s sa 4-5 ka beses.Absorb ang nahabilin nga tubig gamit ang absorbent nga papel (ang nahabilin nga bula sa hangin mahimong mawagtang gamit ang wala magamit nga tip).

9.2.8.Enzyme conjugate:Idugang ang enzyme conjugate solution nga 100ml sa matag atabay, Sagola og hinay pinaagi sa pag-uyog sa plato sa mano-mano nga paagi ug paglumlom sa 30min sa 25 ℃ nga adunay tabon.Balika pag-usab ang lakang sa paghugas.

9.2.8Kolor:Idugang ang 50µl solution A ug 50µl solution B sa matag atabay.Hinay-hinay nga pag-mix pinaagi sa pag-uyog sa plato sa mano-mano ug paglumlom sa 15 min sa 25 ℃ nga adunay tabon (tan-awa ang 12.8).

9.2.9Sukod:Idugang ang 50µl nga stop solution sa matag atabay.Hinay-hinay nga pag-mix pinaagi sa pag-uyog sa plato sa mano-mano ug sukda ang absorbance sa 450nm batok sa usa ka blangko sa hangin (Kini gisugyot nga sukod sa dual-wavelength nga 450/630nm. Basaha ang resulta sulod sa 5min human sa pagdugang sa stop solution. ) (Mahimo usab natong sukdon pinaagi sa panan-aw walay hunong nga solusyon sa mubo sa instrumento sa ELIASA)

Resulta

10.1 Porsiyento nga pagsuyop

Ang kahulogan nga mga bili sa mga bili sa pagsuyop nga nakuha alang sa mga sumbanan ug sa mga sampol gibahin sa kantidad sa pagsuyop sa unang sumbanan (zero standard) ug gipadaghan sa 100%.Ang zero standard gihimo nga katumbas sa 100% ug ang absorbance values ​​gikutlo sa porsyento.

Pagsuyop (%) = B/B0 ×100%

B ——standard sa pagsuyup (o sample)

B0 ——absorbance zero standard

10.2 Standard Curve

Sa pagdrowing og standard curve: Kuhaa ang absorbance value sa mga standards isip y-axis, semi logarithmic sa konsentrasyon sa flumequine standards solution (ppb) isip x-axis.

--- AngflumequineAng konsentrasyon sa matag sample (ppb), nga mabasa gikan sa calibration curve, gipadaghan sa katumbas nga dilution multiple sa matag sample nga gisundan, ug ang aktwal nga konsentrasyon sa sample makuha.

Alang sa pagkunhod sa datos sa mga ELISA kit, ang espesyal nga software naugmad, nga mahimong ihatag sa hangyo.

11. Pagkasensitibo, katukma ug katukma

Pagkasensitibo sa Pagsulay:0.3ppb

Dugos Sample sa pagtunaw hinungdan: 2

Limitado sa pagkakita

Sampol sa dugos ------------------------------------------------ -1ppb

Pagkatukma

Sampol sa dugos ------------------------------------------- 90±20 %

Katukma

Ang variation coefficient sa ELISA kit kay ubos pa sa 10%.

12. Matikdi

12.1 Ang mean values ​​sa absorbance values ​​nga nakuha para sa standards ug samples mapakunhod kung ang reagents ug samples wala pa ma-regulate sa room temperature (20-25 ℃).

12.2 Ayaw tugoti nga ang mga microwell mamala sa taliwala sa mga lakang aron malikayan ang dili malampuson nga pagbalik-balik ug pag-operate sa sunod nga lakang pagkahuman dayon sa pag-tap sa microwells holder.

12.3.I-homogenize ang matag reagent sa dili pa gamiton.

12.4.Ipalayo ang imong panit gikan sa stop solution kay kini ang 2M H2SO4solusyon.

12.5 Ayaw gamita ang mga kit nga wala na sa petsa.Ayaw ibaylo ang mga reagents sa lain-laing mga batch, kay kini mohulog sa pagkasensitibo.

12.6 Kahimtang sa pagtipig:

Ipadayon ang ELISA kit sa 2-8 ℃, ayaw pag-freeze.Seal rest microwell nga mga plato Likayi ang tul-id nga kahayag sa adlaw atol sa tanan nga paglumlum.Girekomenda ang pagtabon sa mga plato sa microtiter.

12.7 Mga timailhan alang sa mga reagents nga dili maayo:

Ang solusyon sa substrate kinahanglan nga biyaan kung kini mahimong kolor.

Ang mga reagents mahimong mahimong dili maayo kung ang absorbance value (450/630nm) sa zero standard mas ubos kay sa 0.5 (A450nm <0.5).

12.8 Ang reaksyon sa pagkolor nanginahanglan 15min pagkahuman sa pagdugang sa Solusyon A ug Solusyon B. Ug mahimo nimong lugwayan ang oras sa paglumlum gikan sa 20min hangtod labi pa kung ang kolor labi ka gaan aron matino.Dili molapas sa 25min, Sa sukwahi, mub-i ang oras sa paglumlum sa husto.

12.9 Ang labing maayo nga temperatura sa reaksyon mao ang 25 ℃.Ang mas taas o mas ubos nga temperatura mosangpot sa mga kausaban sa pagkasensitibo ug pagsuyop nga mga bili.

13. Pagtipig

Kahimtang sa pagtipig: 2-8 ℃.

Panahon sa pagtipig: 12 ka bulan.


  • Kaniadto:
  • Sunod:

  • Isulat ang imong mensahe dinhi ug ipadala kini kanamo