Produit

Kompetitiv Enzym Immunoassay Kit fir quantitativ Analyse vu Flumequine

Kuerz Beschreiwung:

Flumequine ass e Member vun der Quinolon antibakteriell, déi als e ganz wichtegt Anti-Infektiv am klineschen Veterinär- a Waasserprodukt fir säi breet Spektrum, héich Effizienz, geréng Toxizitéit a staark Tissuepenetratioun benotzt gëtt.Et gëtt och fir Krankheetstherapie, Präventioun a Wuesstumsförderung benotzt.Well et kann zu Drogenresistenz an der potenzieller Karzinogenizitéit féieren, déi héich Limit vun deem am Déieregewebe an der EU, Japan verschriwwen ass (déi héich Limit ass 100ppb an der EU).

Am Moment sinn Spektrofluorometer, ELISA an HPLC d'Haaptmethoden fir Flumequinreschter z'entdecken, an ELISA war eng Routinemethod fir déi héich Empfindlechkeet an einfach Operatioun.


Produit Detailer

Produit Tags

Test Prinzip

Dëse Kit baséiert op indirekt kompetitiv ELISA Technologie.D'Mikrotiter Wells si mat Kupplungsantigen beschichtet.FlumequineRescht an der Probe konkurréiert mam Antigen, deen op der Mikrotiterplack beschichtet ass fir den Antikörper.No der Zousatz vun Enzym markéierten Anti-Antikörper, gëtt TMB Substrat benotzt fir d'Faarf ze weisen.D'Absorptioun vun der Probe ass negativ verbonne mat der Tetracyclin, déi dran wunnt, nom Verglach mat der Standardkurve, multiplizéiert mat der Verdünnungsmultiple, kann d'Quantitéit vu Flumequine Reschter an der Probe berechent ginn.

Uwendungen

Dëse Kit kann an der quantitativer a qualitativer Analyse vu Flumequinreschter am Hunneg benotzt ginn.

Kräiz-Reaktiounen

Flumequine ………………………………………………… 100%

 

Material néideg

Equipementer

┅┅Mikrotiterplatenspektrofotometer (450nm/630nm)

┅┅ Homogenisator oder Stomacher

┅┅Shaker

┅┅Vortex Mixer

┅┅Zentrifuge

┅┅Analytesch Balance (Induktioun: 0,01g)

┅┅Graduéiert Pipette: 15ml

┅┅Gummi Pipette Glühbir

┅┅Polystyrol Zentrifuge Tube: 15ml, 50ml

┅┅Glas Reagenzglas: 10ml

┅┅Mikropipetten: 20ml-200ml, 100ml-10000ml,

250 ml - Multipipette

Reagens

┅┅n-hexan(AR)

┅┅Methylenchlorid (AR)

┅┅Acetonitril (AR)

┅┅Deioniséiert Waasser

-----Konzentréiert Salzsäure (AR)

 

Kit Komponente

● Mikrotiterplack mat 96 Wells mat Antigen beschichtet

● Standard Léisungen (6 Fläschen × 1ml / Fläsch)

0ppb, 0.3ppb, 1.2ppb, 4.8ppb, 19.2ppb, 76.8ppb

● Héich Konzentratioun Standard Kontroll: (1ml / Fläsch)

…………………………………………………………100 ppb

● Enzymkonjugat 12ml………………………………… rout Kap

● Antikörperlösung 7ml …………..……..….…..gréng Kap

● Léisung A 7ml…………………………………………………..wäiss Kap

● Léisung B 7ml ………………………………………………………… rout Kap

● Stop Léisung 7ml ……………………………………… giel Kap

● 20XConcentrated Wash Léisung 40ml

………………………………………………………..transparent Kap

●2X Extraktiounsléisung 50ml………………………… blo Kap

 

Reagens Virbereedung

7.1 Hunneg Prouf

Léisung 1: 0,2 M Salzsäure Léisung

Gewiicht 41,5 ml Konzentréiert Salzsäure, verdünnt mat deioniséiertem Waasser op 500 ml.

Léisung 2: Wäsch Léisung

Verdünnt déi konzentréiert Wäschléisung mat deioniséiertem Waasser am Volumenverhältnis vun 1:19, wat benotzt gëtt fir d'Placken ze wäschen.d'verdünnte Léisung ka bei 4 ℃ fir 1 Mount gespäichert ginn.

Léisung3: Extraktioun Léisung

Verdünnt d'2 × konzentréiert Extraktiounsléisung mat deioniséiertem Waasser am Volumenverhältnis vun 1: 1 (oder ofhängeg vun der Noutwendegkeet), déi fir Probeextraktioun benotzt gëtt.Dës verdënntem Léisung kann 1 Mount bei 4 ℃ konservéiert ginn.

Prouf Virbereedungen

8.1 Notiz a Virsiichtsmoossname fir d'Benotzer virun der Operatioun

(a) Benotzt w.e.g. eemoleg Tipps am Prozess vum Experiment, a ännert d'Spëtze wann Dir verschidde Reagens absorbéiert.

(b) Vergewëssert Iech datt all experimentell Instrumenter propper sinn, soss wäert et d'Analyseresultat beaflossen.

8.2Hunneg Prouf

-----Weien 2g ± 0,05g Hunnegprobe an e 50ml Polystyrol Zentrifugeröhre,

-----Füügt 2ml 0,2 M Salzsäure-Léisung (Léisung 1), vortex fir et komplett ze vermëschen, füügt dann 8ml Methylenchlorid derbäi, schüttelt mat Shaker fir 5min fir komplett opzeléisen;

----- Zentrifuge fir 10 min, op d'mannst 3000g bei Raumtemperatur (20-25 ℃);

-----Ewechzehuelen der supernatant Phase, huelt 2 ml vun der Substrat organesch Léisung zu engem 10 ml Glas eraus. dréchen der substate ënner Waasser Bad vun Nitrogen Flux (50-60 ℃)

----- Füügt 1 ml n-Hexan, Wirbel fir 30s, füügt dann 1ml Extraktiounsléisung (Léisung 3) derbäi, Wirbel erëm fir 1min.Zentrifuge fir 5min, op d'mannst 3000g bei Raumtemperatur (20-25 ℃);

----- Ewechzehuelen der supernatant Phase, huelt 50ml fir Assay;

9. Assay Prozess

9.1 Notiz virum Assay

9.1.1 Vergewëssert Iech datt all Reagenzen a Mikrowellen all bei Raumtemperatur (20-25 ℃) sinn.

9.1.2 Zréck all de Rescht Reagenz op 2-8 ℃ direkt nom Gebrauch.

9.1.3 D'Mikrowellen richteg wäschen ass e wichtege Schrëtt am Prozess vun der Assay;et ass de vitale Faktor fir d'Repetitivitéit vun der ELISA Analyse.

9.1.4 Vermeit d'Liicht an deckt d'Mikrowellen während der Inkubatioun.

9.2 Assay Schrëtt

9.2.1 Huelt all Reagenz bei Raumtemperatur (20-25 ℃) fir méi wéi 30min eraus, homogeniséiert virum Gebrauch.

9.2.2 Huelt déi néideg Mikrowellen eraus a bréngt de Rescht direkt an d'Zip-Lockbeutel bei 2-8 ℃ zréck.

9.2.3 D'verdünnte Wäschléisung soll virum Gebrauch erwiermt ginn fir bei Raumtemperatur ze sinn.

9.2.4Zuel:Nummer all Mikrowell Positioun an all Standarden a Proben sollen an Duplikat lafen.Notéiert d'Standarden a Proben Positiounen.

9.2.5Standard Léisung / Probe addéieren:Füügt 50 μl Standardléisung oder preparéiert Probe an entspriechend Wells.Add 50μl Antikörperlösung.Mix sanft andeems Dir d'Plack manuell rëselt a fir 30min bei 25 ℃ mat Deckel inkubéiert.

9.2.6Wäschen:Huelt d'Ofdeckung sanft a pure d'Flëssegkeet aus de Brunnen a spült d'Mikrowellen mat 250μl verdënnter Wäschléisung (Léisung 2) am Intervall vun 10s fir 4-5 Mol.Absorbéieren de Rescht Waasser mat absorbéierend Pabeier (déi Rescht Loftblase kann mat onbenotzten Tipp eliminéiert ginn).

9.2.8.Enzym Konjugat:Füügt d'Enzymkonjugatléisung 100ml an all Brunn, Mix sanft andeems Dir d'Plack manuell schüttelt a fir 30min bei 25 ℃ mat Deckel inkubéiert.Widderhuelen d'Wäschschrëtt erëm.

9.2.8Faarf:Füügt 50 µl Léisung A an 50 µl Léisung B an all Well.Mix sanft andeems Dir d'Plack manuell rëselt an 15 min bei 25 ℃ mat Deckel inkubéiert (kuckt 12.8).

9.2.9Mooss:Füügt 50 μl der Stoppléisung an all Brunn.Mix sanft andeems Dir d'Plack manuell rëselt a moosst d'Absorptioun bei 450nm géint eng Loftblat (Et gëtt virgeschloen Moossnam mat der Dual-Wellelängt vu 450/630nm. Liest d'Resultat bannent 5min no der Zousatz vun der Stopléisung.) (Mir kënnen och duerch Siicht moossen.) ouni Stop Léisung kuerz vum ELIASA Instrument)

Resultater

10,1 Prozentsaz Absorptioun

D'Duerchschnëttswäerter vun den Absorptiounswäerter, déi fir d'Standarden an d'Proben kritt goufen, ginn gedeelt duerch den Absorptiounswäert vum éischte Standard (Nullstandard) a multiplizéiert mat 100%.Den Nullstandard gëtt also gläich 100% gemaach an d'Absorptiounswäerter ginn a Prozentzuelen zitéiert.

Absorptioun (%) = B/B0 × 100%

B - Absorptiounsstandard (oder Probe)

B0 - Absorptioun Null Norm

10.2 Standard Curve

Fir eng Standardkurve ze zéien: Huelt den Absorptiounswäert vun de Standarden als Y-Achs, semi-logarithmesch vun der Konzentratioun vun der Flumequine Standardléisung (ppb) als x-Achs.

--- DenflumequineKonzentratioun vun all Probe (ppb), déi aus der Kalibrierungskurve gelies ka ginn, gëtt multiplizéiert mat der entspriechender Verdünnungsmultiple vun all Probe gefollegt, an déi aktuell Konzentratioun vun der Probe gëtt kritt.

Fir Datereduktioun vun den ELISA Kits gouf speziell Software entwéckelt, déi op Ufro zur Verfügung gestallt ka ginn.

11. Sensibilitéit, Genauegkeet a Präzisioun

Test Empfindlechkeet:0,3 ppb

Hunneg Sample Verdünnungsfaktor: 2

Detectioun Limite

Hunneg Prouf -------------------------------------------- -1 ppb

Genauegkeet

Hunnegprobe ---------------------------------------------------- 90±20 %

Präzisioun

Variatiounskoeffizient vum ELISA Kit ass manner wéi 10%.

12. Avis

12.1 D'Duerchschnëttswäerter vun den Absorptiounswäerter, déi fir d'Standarden an d'Proben kritt goufen, ginn reduzéiert wann d'Reagenser a Proben net op Raumtemperatur (20-25 ℃) geregelt goufen.

12.2 Erlaabt d'Mikrowellen net tëscht Schrëtt ze dréchen fir net erfollegräich Widderhuelung ze vermeiden an de nächste Schrëtt direkt nodeems Dir de Mikrowellhalter tippt.

12.3.Homogeniséiert all Reagens virum Gebrauch.

12.4.Halt Är Haut ewech vun der Stopléisung well et ass den 2M H2SO4Léisung.

12.5 Benotzt d'Kits net aus dem Datum.Tauscht d'Reagenser vu verschiddene Chargen net aus, well et wäert d'Sensibilitéit erofsetzen.

12.6 Späicherkonditioun:

Halt d'ELISA Kits bei 2-8 ℃, afréiere net.Seal Rescht Mikrowell Placke Vermeiden direkt Sonneliicht während all Inkubatioun.Et ass recommandéiert d'Mikrotiterplacke ze decken.

12.7 Indikatiounen fir datt d'Reagens schlecht ginn:

D'Substratléisung soll opginn ginn wann et Faarwen gëtt.

D'Reagense kënne schlecht ginn wann den Absorptiounswäert (450/630nm) vum Nullstandard manner wéi 0,5 (A450nm<0,5) ass.

12.8 D'Faarfreaktioun brauch 15min no der Additioun vu Léisung A a Léisung B. An Dir kënnt d'Inkubatiounszäit vu 20min op méi verlängeren, wann d'Faarf ze hell ass fir ze bestëmmen.Ni iwwerschreiden 25min, Am Géigendeel, verkierzt d'Inkubatiounszäit richteg.

12.9 Déi optimal Reaktiounstemperatur ass 25 ℃.Méi héich oder manner Temperatur féiert zu Verännerunge vun der Empfindlechkeet an der Absorptiounswäerter.

13. Stockage

Stockage Zoustand: 2-8 ℃.

Stockage Period: 12 Méint.


  • virdrun:
  • Nächste:

  • Schreift Äre Message hei a schéckt en un eis