produkts

Konkurētspējīgs enzīmu imūnanalīzes komplekts Flumequine kvantitatīvai analīzei

Īss apraksts:

Flumequine ir hinolonu antibakteriālā līdzekļa loceklis, ko izmanto kā ļoti svarīgu pretinfekcijas līdzekli klīniskajā veterinārajā un ūdens medicīnā tā plašā spektra, augstas efektivitātes, zemas toksicitātes un spēcīgas audu iespiešanās dēļ.To lieto arī slimību terapijai, profilaksei un augšanas veicināšanai.Tā kā tas var izraisīt zāļu rezistenci un iespējamu kancerogenitāti, kuras augstais ierobežojums dzīvnieku audos ir noteikts ES, Japānā (ES ir 100 ppb).

Pašlaik spektrofluorometrs, ELISA un HPLC ir galvenās metodes flumequine atlieku noteikšanai, un ELISA ir bijusi parasta metode augstai jutībai un vienkāršai darbībai.


Produkta informācija

Produktu etiķetes

Testa princips

Šis komplekts ir balstīts uz netieši konkurējošu ELISA tehnoloģiju.Mikrotitra iedobes ir pārklātas ar savienojošo antigēnu.Flumequineatlikums paraugā konkurē ar antigēnu, kas pārklāts uz mikrotitrēšanas plāksnes par antivielu.Pēc enzīmu iezīmētas anti-antivielas pievienošanas TMB substrātu izmanto, lai parādītu krāsu.Parauga absorbcija ir negatīvi saistīta ar tajā esošo tetraciklīna atlikumu, pēc salīdzināšanas ar standarta līkni, kas reizināta ar atšķaidījuma daudzkārtni, var aprēķināt Flumequine atlieku daudzumu paraugā.

Lietojumprogrammas

Šo komplektu var izmantot kvantitatīvā un kvalitatīvā flumekvīna atlieku analīzē medū.

Savstarpējas reakcijas

Flumequine ……………………………………………… 100%

 

Nepieciešamie materiāli

Aprīkojums

┅┅Mikrotitra plates spektrofotometrs (450nm/630nm)

┅┅Homogenizators vai Stomacher

┅┅Šeikeris

┅┅Vortex mikseris

┅┅Centrifūga

┅┅Analītiskie svari (induktivitāte: 0,01g)

┅┅Pipete ar graduāciju: 15 ml

┅┅Gumijas pipetes spuldze

┅┅Polistirola centrifūgas caurule: 15ml, 50ml

┅┅Stikla mēģene: 10ml

┅┅Mikropipetes: 20ml-200ml, 100ml -10000ml,

250 ml - multipipete

Reaģenti

┅┅n-heksāns (AR)

┅┅Metilēnhlorīds (AR)

┅┅Acetonitrils (AR)

┅┅Dejonizēts ūdens

----- Koncentrēta sālsskābe (AR)

 

Komplekta sastāvdaļas

● Mikrotitrēšanas plāksne ar 96 iedobēm, kas pārklātas ar antigēnu

● Standarta šķīdumi (6 pudeles × 1 ml uz pudeli)

0 ppb, 0,3 ppb, 1,2 ppb, 4,8 ppb, 19,2 ppb, 76,8 ppb

● Augstas koncentrācijas standarta kontrole: (1 ml uz pudeli)

………………………………………………………100 ppb

● Enzīmu konjugāts 12ml…………………………... sarkans vāciņš

● Antivielu šķīdums 7ml …………..……..….…..zaļš vāciņš

● Šķīdums A 7 ml…………………………..………..balts vāciņš

● Šķīdums B 7 ml …………….…………..………… sarkans vāciņš

● Stop šķīdums 7ml ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

● 20X Koncentrēts mazgāšanas šķīdums 40ml

………………………………………..…..caurspīdīgs vāciņš

●2X ekstrakcijas šķīdums 50ml…………………… zils vāciņš

 

Reaģentu sagatavošana

7.1 Medus paraugs

1. šķīdums: 0,2 M sālsskābes šķīdums

Svars 41,5 ml Koncentrēta sālsskābe, atšķaidīta ar dejonizētu ūdeni līdz 500 ml.

2. risinājums: mazgāšanas šķīdums

Koncentrēto mazgāšanas šķīdumu atšķaida ar dejonizētu ūdeni tilpuma attiecībā 1:19, ko izmantos plākšņu mazgāšanai.atšķaidītu šķīdumu var uzglabāt 4 ℃ 1 mēnesi.

Risinājums3: ekstrakcijas šķīdums

Atšķaida 2x koncentrētu ekstrakcijas šķīdumu ar dejonizētu ūdeni tilpuma attiecībā 1:1 (vai atkarībā no prasības), ko izmantos parauga ekstrakcijai.Šo atšķaidīto šķīdumu var uzglabāt 1 mēnesi 4 ℃ temperatūrā.

Paraugu sagatavošana

8.1 Paziņojums un piesardzības pasākumi lietotājiem pirms ekspluatācijas

a) Eksperimenta laikā izmantojiet vienreizējus uzgaļus un mainiet uzgaļus, kad tiek absorbēts cits reaģents.

(b) Pārliecinieties, vai visi eksperimentālie instrumenti ir tīri, pretējā gadījumā tas ietekmēs testa rezultātu.

8.2Medus paraugs

----- Nosveriet 2 g ± 0,05 g medus paraugu 50 ml polistirola centrifūgas mēģenē,

-----Pievienojiet 2 ml 0,2 M sālsskābes šķīdumu (1. šķīdums), samaisiet vorteksā, lai to pilnībā sajauktu, pēc tam pievienojiet 8 ml metilēnhlorīda, sakratiet ar kratītāju 5 minūtes, lai pilnībā izšķīdinātu;

-----Centrifugēt 10 min, vismaz 3000g istabas temperatūrā (20-25℃);

-----Noņemiet supernatanta fāzi, paņemiet 2 ml substrāta organiskā šķīduma 10 ml stikla mēģenē. Izžāvējiet substrātu zem slāpekļa plūsmas ūdens peldes (50-60 ℃)

-----Pievieno 1 ml n-heksāna, maisa 30 sekundes, pēc tam pievieno 1 ml ekstrakcijas šķīduma (3. šķīdums), vēlreiz vorteksa 1 min.Centrifūga 5 minūtes, vismaz 3000g istabas temperatūrā (20-25℃);

-----Noņemiet supernatanta fāzi, paņemiet 50 ml analīzei;

9. Pārbaudes process

9.1. Brīdinājums pirms testa

9.1.1 Pārliecinieties, vai visi reaģenti un mikroiedobes ir istabas temperatūrā (20-25 ℃).

9.1.2. Visus pārējos reaģentus nekavējoties pēc izlietošanas nogādājiet atpakaļ uz 2–8 ℃.

9.1.3. Pareiza mikrodobumu mazgāšana ir svarīgs testa procesa posms;tas ir būtisks ELISA analīzes atkārtošanās faktors.

9.1.4. Inkubācijas laikā izvairieties no gaismas un pārklājiet mikroiedobes.

9.2. Pārbaudes soļi

9.2.1 Izņemiet visus reaģentus istabas temperatūrā (20-25 ℃) ilgāk par 30 minūtēm, pirms lietošanas homogenizējiet.

9.2.2 Nekavējoties izņemiet vajadzīgās mikroiedobes un pārējās ielieciet atpakaļ maisā ar rāvējslēdzēju 2–8 ℃ temperatūrā.

9.2.3. Pirms lietošanas atšķaidītais mazgāšanas šķīdums jāsasilda līdz istabas temperatūrai.

9.2.4Numurs:Numurējiet katru mikroiedobes pozīciju un visus standartus un paraugus palaidiet divos eksemplāros.Ierakstiet standartus un paraugu pozīcijas.

9.2.5Pievienojiet standarta šķīdumu/paraugu:Pievienojiet 50 µl standartšķīduma vai sagatavotā parauga attiecīgajās iedobēs.Pievienojiet 50 µl antivielu šķīduma.Viegli samaisiet, manuāli kratot plati, un inkubējiet 30 minūtes 25 ℃ ar vāku.

9.2.6Mazgāt:Uzmanīgi noņemiet vāku un iztīriet šķidrumu no iedobēm un izskalojiet mikroiedobes ar 250 µl atšķaidīta mazgāšanas šķīduma (2. šķīdums) ik pēc 10 sekundēm 4-5 reizes.Absorbējiet atlikušo ūdeni ar absorbējošu papīru (pārējo gaisa burbuli var likvidēt ar neizmantoto galu).

9.2.8.Fermentu konjugāts:Katrai iedobei pievienojiet 100 ml enzīmu konjugāta šķīdumu, uzmanīgi samaisiet, manuāli kratot plati, un inkubējiet 30 minūtes 25 ℃ ar vāku.Atkārtojiet mazgāšanas soli vēlreiz.

9.2.8Krāsojums:Katrai iedobei pievieno 50 µl šķīduma A un 50 µl šķīduma B.Viegli samaisa, manuāli kratot plati, un inkubē 15 minūtes 25 ℃ ar vāku (skatīt 12.8.).

9.2.9Mērs:Katrai iedobei pievienojiet 50 µl apturēšanas šķīduma.Viegli samaisiet, manuāli sakratot plāksni, un izmēra absorbciju pie 450 nm pret gaisa tukšo paraugu (Ieteicams izmērīt ar dubultviļņu garumu 450/630 nm. Rezultātu nolasīt 5 minūšu laikā pēc apturēšanas šķīduma pievienošanas.) (Varam izmērīt arī ar redzi. bez apstāšanās risinājuma, izņemot ELIASA instrumentu)

Rezultāti

10.1 Procentuālā absorbcija

Standartiem un paraugiem iegūtās absorbcijas vērtību vidējās vērtības dala ar pirmā standarta absorbcijas vērtību (nulles standarts) un reizina ar 100%.Tādējādi nulles standarts ir vienāds ar 100%, un absorbcijas vērtības ir norādītas procentos.

Absorbcija (%) = B/B0 × 100%

B — absorbcijas standarts (vai paraugs)

B0 — absorbcijas nulles standarts

10.2. Standarta līkne

Lai uzzīmētu standarta līkni: Ņemiet standartu absorbcijas vērtību kā y asi, bet flumequine standartšķīduma koncentrācijas puslogaritmisko vērtību (ppb) kā x asi.

--- Theflumequinekatra parauga koncentrāciju (ppb), ko var nolasīt no kalibrēšanas līknes, reizina ar katra sekojošā parauga atbilstošo atšķaidījuma daudzkārtni, un iegūst parauga faktisko koncentrāciju.

ELISA komplektu datu samazināšanai ir izstrādāta īpaša programmatūra, kuru var nodrošināt pēc pieprasījuma.

11. Jutīgums, precizitāte un precizitāte

Testa jutība0,3 ppb

Medus parauga atšķaidīšanas koeficients: 2

Atklāšanas robeža

Medus paraugs------------------------------------------------ -1 ppb

Precizitāte

Medus paraugs --------------------------------------------- 90±20 %

Precizitāte

ELISA komplekta variācijas koeficients ir mazāks par 10%.

12. Paziņojums

12.1. Standartiem un paraugiem iegūtās absorbcijas vērtību vidējās vērtības tiks samazinātas, ja reaģenti un paraugi nav noregulēti līdz istabas temperatūrai (20-25℃).

12.2. Neļaujiet mikroiedobēm izžūt starp soļiem, lai izvairītos no neveiksmīgas atkārtošanās, un veiciet nākamo darbību uzreiz pēc tam, kad piesitiet mikrodobumu turētājam.

12.3.Pirms lietošanas katru reaģentu homogenizē.

12.4.Sargājiet ādu no pieturas šķīduma, jo tas ir 2M H2SO4risinājums.

12.5. Neizmantojiet novecojušus komplektus.Nemainiet dažādu partiju reaģentus, jo tas samazinās jutību.

12.6 Uzglabāšanas nosacījumi:

Glabājiet ELISA komplektus 2–8 ℃ temperatūrā, nesasaldējiet.Aizveriet atlikušās mikroiedobes plāksnes Visu inkubāciju laikā izvairieties no tiešas saules gaismas.Ieteicams pārklāt mikrotitrēšanas plāksnes.

12.7 Indikācijas reaģentu sabojāšanai:

No substrāta šķīduma jāatsakās, ja tas iekrāsojas.

Reaģenti var kļūt slikti, ja nulles standarta absorbcijas vērtība (450/630nm) ir mazāka par 0,5 (A450nm<0,5).

12.8. Krāsošanas reakcijai ir nepieciešamas 15 min pēc šķīduma A un šķīduma B pievienošanas. Un jūs varat pagarināt inkubācijas laiku no 20 minūtēm līdz vairāk, ja krāsa ir pārāk gaiša, lai to varētu noteikt.Nekad nepārsniedziet 25min, Gluži pretēji, pareizi saīsiniet inkubācijas laiku.

12.9 Optimālā reakcijas temperatūra ir 25 ℃.Augstāka vai zemāka temperatūra izraisīs jutības un absorbcijas vērtību izmaiņas.

13. Glabāšana

Uzglabāšanas stāvoklis: 2-8℃.

Uzglabāšanas laiks: 12 mēneši.


  • Iepriekšējais:
  • Nākamais:

  • Uzrakstiet savu ziņu šeit un nosūtiet to mums