Produit

Kompetitiv Enzym Immunoassay Kit fir quantitativ Analyse vum Tylosin

Kuerz Beschreiwung:

Tylosin ass e Macrolide Antibiotikum, dat haaptsächlech als antibakteriell an antimykoplasma applizéiert gëtt.Strikt MRLs goufen etabléiert well dëst Medikament zu eeschte Nebenwirkungen a bestëmmte Gruppen féiere kann.

Dëse Kit ass en neit Produkt baséiert op der ELISA Technologie, wat séier, einfach, präzis a sensibel ass am Verglach mat allgemenger instrumentaler Analyse an nëmmen 1,5 Stonnen an enger Operatioun brauch, et kann Operatiounsfehler an Aarbechtsintensitéit wesentlech minimiséieren.


Produit Detailer

Produit Tags

Kompetitiv Enzym Immunoassay Kit fir

Quantitativ Analyse vunTylosin


1. Hannergrond

Tylosinass e Macrolide Antibiotikum, dat haaptsächlech als antibakteriell an antimykoplasma applizéiert gëtt.Strikt MRLs goufen etabléiert well dëst Medikament zu eeschte Nebenwirkungen a bestëmmte Gruppen féiere kann.

Dëse Kit ass en neit Produkt baséiert op der ELISA Technologie, wat séier, einfach, präzis a sensibel ass am Verglach mat allgemenger instrumentaler Analyse an nëmmen 1,5 Stonnen an enger Operatioun brauch, et kann Operatiounsfehler an Aarbechtsintensitéit wesentlech minimiséieren.

2. Test Prinzip

Dëse Kit baséiert op indirekt kompetitiv ELISA Technologie.D'Mikrotiter Wells si mat Kupplungsantigen beschichtet.Tylosinreschter an der Probe konkurréiere mam Antigen, deen op der Mikrotiterplack beschichtet ass fir den Antikörper.No der Zousatz vun Enzym markéierten Anti-Antikörper, gëtt TMB Substrat benotzt fir d'Faarf ze weisen.D'Absorptioun vun der Probe ass negativ verbonne mat der Tylosin, déi dran wunnt, nom Verglach mat der Standardkurve, multiplizéiert mam Verdünnungsfaktor, kann d'Tylosinresidquantitéit an der Probe berechent ginn.

3. Uwendungen

Dëse Kit kann an der quantitativer a qualitativer Analyse vum Tylosinreschter am Déieregewebe (Huhn, Schweinefleesch, Enten) a Mëllech, Hunneg, Ee, etc.

4. Kräiz-Reaktiounen

Tylosin………………………………………………..100%

Tilmicosin ……………………………………………………………… <2%

5. Material néideg

5.1 Ausrüstung:

---- Mikrotiterplackspektrofotometer (450nm/630nm)

---- Rotary evaporator oder Stéckstoff drëschenen Instrumenter

---- Homogenisator

----Schacker

---- Zentrifuge

---- Analytesch Balance (Induktioun: 0.01g)

---- Graduéiert Pipette: 10ml

----Gummi Pipette Glühbir

----Volumetresch Kolbe: 10ml

---- Polystyrol Zentrifuge Tubes: 50ml

--Mikropipetten: 20-200ml, 100-1000ml

250 ml Multipipette

5.2 Reagens:

----Natriumhydroxid (NaOH, AR)

---- Natriumbikarbonat (NaHCO3,AR)

---- Natriumkarbonat (NaCO3AR)

---- Trichloracetic acid (AR)

---- Acetonitril (AR)

---- Ethylacetat (AR)

┅┅n-Hexan (AR)

---- Deioniséiert Waasser

6. Kit Komponente

l Mikrotiterplack mat 96 Wells mat Antigen beschichtet

l Standard Léisungen (5 Fläschen, 1ml / Fläsch)

0ppb, 0.5ppb, 1.5ppb, 4.5ppb, 13.5ppb

l Spiking Standard Kontroll: (1ml / Fläsch)1 ppm

l Enzymkonjugat 1ml………………………………………………………………………

l Antikörperlösung 7ml…………………………..gréng Kap

l Léisung A 7ml………………………………….…… wäiss Kap

l Léisung B 7ml………………………………………..roude Kap

l Stop Léisung 7ml.……………………………….giel Kap

l 20 × konzentréiert wäschen Léisung 40ml

…………………………………………..transparent Kap

l 4 × konzentréiert Extraktioun Léisung 50ml

……………………………………………….blo Kap

7. Reagens Virbereedung:

Léisung 1:0,1 mol/l NaOH Léisung

Waacht 0,4g NaOH op 100ml deioniséiertem Waasser a vermëschen komplett.

Léisung 2: 1 mol/l NaOH Léisung

Weien 4g NaOH op 100ml deioniséiertem Waasser a vermëschen komplett.

Léisung 3: Carbonate Puffer Salz

Léisung1: 0,2M PB

Opléisen 51,6g Na2HPO4· 12 Uhr2O, 8,7 g NaH2PO4·2H2O mat deioniséiertem Waasser a verdënntem op 1000ml.

Léisung2: Extraktioun Léisung

Verdünnt d'2 × konzentréiert Extraktiounsléisung mat deioniséiertem Waasser am Volumenverhältnis vun 1: 1 (zB 10ml vun 2 × Extraktioun Léisung + 10ml vun deionized Waasser), déi fir Probeextraktioun benotzt gëtt,Dës Léisung kann bei 4 ℃ fir 1 Mount gespäichert ginn.

Léisung3: Wäsch Léisung

Verdünnt d'20 × konzentréiert Wäschléisung mat deioniséiertem Waasser am Volumenverhältnis vun 1:19 (zB 5ml 20×Wäschléisung + 95ml deioniséiertem Waasser), déi benotzt gi fir d'Placken ze wäschen.Dës Léisung kann bei 4 ℃ fir 1 Mount gespäichert ginn.

8. Prouf Preparatiounen

8.1 Notiz a Virsiichtsmoossname virun der Operatioun:

(a) Benotzt w.e.g. eemoleg Tipps am Prozess vum Experiment, a ännert d'Spëtze wann Dir verschidde Reagens absorbéiert.

(b) Vergewëssert Iech datt all Instrumenter propper sinn.

(c) Halt Tissueprobe am Afréiere.

(d) Preparéiert Probe soll op eemol fir Assay benotzt ginn.

8.2 Déieregewebe (Huhn, Schwäin, asw.)

---- Homogenize d'Probe mat Homogenisator;

---- Huelt 2,0 ± 0,05 g Homogenat an e 50ml Polystyrol-Zentrifugerröhre;2ml vun 0,2M PB (Léisung1) , schüttelen fir opzeléisen, a fügen dann 8ml Ethylacetat derbäi a schüttelen hefteg fir 3min;

----Zentrifuge fir Trennung: 3000g / Ëmfeldtemperatur / 5min.

---- Transfert 4ml vun der supernatant organescher Phase an engem 10ml Glas eraus, dréchen mat 50-60 ℃ Waasser Bad ënner Stéckstoff Gas Baach;

----Léiss déi trocken Iwwerreschter mat 1ml N-Hexan op, vortex fir 30s fir opzeléisen, a füügt dann 1ml Extraktiounsléisung derbäi (Léisung2), 1 min.Zentrifuge fir Trennung: 3000g / Ëmfeldtemperatur / 5min

---- Ewechzehuelen der supernatant n-Hexan Phase;huelt 50μl vun der wässerlecher Phase vum Substrat fir Assay.

 

Verdünnungsfaktor: 1

 

8.2 Mëllech

---- Huelt 100 μl réi Mëllechprobe, mëscht mat 900 μl Extraktiounsléisung (Léisung2), a komplett mixen.

---- Huelt 50μl vun der preparéierter Léisung fir Assay.

 

Verdünnungsfaktor: 10

 

9. Assay Prozess

9.1 Notiz virum Assay

9.1.1Vergewëssert Iech datt all Reagenzen a Mikrowellen all bei Raumtemperatur sinn (20-25 ℃).

9.1.2Zréck all de Rescht Reagenz op 2-8direkt nom Gebrauch.

9.1.3D'Mikrowellen richteg wäschen ass e wichtege Schrëtt am Prozess vun der Assay;et ass de vitale Faktor fir d'Reproduktioun vun der ELISA Analyse.

9.1.4 Aloosst d'Liicht a bedecken d'Mikrowellen wärend der Inkubatioun.

9.2 Assay Schrëtt

9.2.1 Huelt all Reagenz bei Raumtemperatur (20-25 ℃) fir méi wéi 30min eraus, schütt sanft virum Gebrauch.

9.2.2 Huelt déi néideg Mikrowellen eraus a bréngt de Rescht direkt an d'Zip-Lockbeutel bei 2-8 ℃ zréck.

9.2.3 D'verdünnte Wäschléisung soll virum Gebrauch erwiermt ginn fir bei Raumtemperatur ze sinn.

9.2.4Zuel:Nummeréiert all Mikrowell Positiounen an all Standarden a Proben sollen an Duplikat lafen.Notéiert d'Standarden a Proben Positiounen.

9.2.5Add Standard Léisung / Probe an Antikörperléisung: Add 50µl Standard Léisung ((Kit geliwwert)) oder virbereet Prouf zu entspriechend Wells.50µl Antikörperlösung derbäisetzen (Kit geliwwert).Mix sanft andeems Dir d'Plack manuell rëselt a fir 30min bei 37 ℃ mat Deckel inkubéiert.

9.2.6Wäschen: Huelt d'Ofdeckung sanft ewech a reng d'Flëssegkeet aus de Brunnen a spült d'Mikrowellen mat 250μl verdënnter Wäschléisung (Léisung3) am Intervall vun 10s fir 4-5 Mol.Absorbéieren de Rescht Waasser mat absorbéierend Pabeier (déi Rescht Loftblase kann mat onbenotzten Tipp eliminéiert ginn).

9.2.7Enzymkonjugat addéieren: Add 100ml vun Enzym konjugat Léisung (Kit geliwwert) op all Brunn, sanft mëschen a fir 30min bei 37 ℃ mat Deckel inkubéieren.Widderhuelen d'Wäschschrëtt erëm.

9.2.8Faarf: 50µl Léisung A(Kit geliwwert) an 50 µl Léisung B (Kit geliwwert) op all Brunn.Mix sanft a inkubéiert fir 15min bei 37 ℃ mat Deckel.

9.2.9Moossnam: Fügt 50 µl vun der Stop Léisung (Kit geliwwert) op all Brunn.Mëschung sanft a moosst d'Absorptioun bei 450nm (Et gëtt virgeschloen Moossnam mat der Dual-Wellelängt vu 450/630nm. Liest d'Resultat bannent 5min nodeems d'Stoppléisung bäigefüügt gouf).

10. Resultater

10,1 Prozentsaz Absorptioun

D'Duerchschnëttswäerter vun den Absorptiounswäerter, déi fir d'Standarden an d'Proben kritt goufen, ginn duerch den Absorptiounswäert vum éischte Standard (Nullstandard) gedeelt a multiplizéiert mat 100%.Den Nullstandard gëtt also gläich 100% gemaach an d'Absorptiounswäerter ginn a Prozentzuelen zitéiert.

B

Absorptioun (%) = —— × 100%

B0

B - Absorptiounsstandard (oder Probe)

B0 - Absorptioun Null Norm

10.2 Standard Curve

---- Fir eng Standardkurve ze zéien: Huelt den Absorptiounswäert vun de Standarden als Y-Achs, semi-logarithmesch vun der Konzentratioun vun der Tylosin Standard Léisung (ppb) als x-Achs.

---- D'Tylosin Konzentratioun vun all Probe (ppb), déi aus der Kalibrierungskurve gelies ka ginn, gëtt multiplizéiert mam entspriechende Verdünnungsfaktor vun all Probe gefollegt, an déi aktuell Konzentratioun vun der Probe gëtt kritt.

Notéiert w.e.g.:

speziell Software gouf fir Datenanalyse entwéckelt, déi op Ufro zur Verfügung gestallt ka ginn.

11. Sensibilitéit, Genauegkeet a Präzisioun

Test Sensibilitéit:1,5 ppb

Detektioun Limit:

Déier Tissue……………………………………… 1.5ppb Mëllech………………………………………………………..15ppb Genauegkeet:

Déier Tissue………………………………………………80±15%

Mëllech………………………………………………………………… 80±10%

Präzisioun:

Variatiounskoeffizient vum ELISA Kit ass manner wéi 10%.

12. Avis

12.1 D'Duerchschnëttswäerter vun den Absorptiounswäerter, déi fir d'Standarden an d'Proben kritt goufen, ginn reduzéiert wann d'Reagenser a Proben net op Raumtemperatur (20-25 ℃) geregelt goufen.

12.2 Erlaabt d'Mikrowellen net tëscht Schrëtt ze dréchen fir net erfollegräich Reproduzibilitéit ze vermeiden an de nächste Schrëtt direkt nodeems Dir de Mikrowellhalter tippt.

12.3 Shake all Reagent virum Gebrauch.

12.4 Halt Är Haut ewech vun der Stop Léisung fir et 0,5MH ass2SO4Léisung.

12.5 Benotzt d'Kits net aus dem Datum.Tauscht d'Reagente vu verschiddene Chargen net aus, soss fällt d'Sensibilitéit erof.

12.6 Halt d'ELISA Kits bei 2-8 ℃, net afréieren.Seal Rescht Mikrowell Placke, Vermeit direkt Sonneliicht wärend all Inkubatioun.Et ass recommandéiert d'Mikrotiterplacke ze decken.

12,7 Substrat Léisung soll opginn wann et Faarwen gëtt.D'Reagense kënne schlecht ginn wann den Absorptiounswäert (450/630nm) vum Nullstandard manner wéi 0,5 (A450nm <0,5) ass.

12.8 D'Faarfreaktioun brauch 15min no der Zousatz vun der Léisung A a Léisung B. An Dir kënnt d'Inkubatiounszäitberäicher op 20min oder méi verlängeren wann d'Faarf ze hell ass fir ze bestëmmen.Ni iwwerschreiden 30min, am Géigendeel, verkierzt d'Inkubatiounszäit richteg.

12.9 Déi optimal Reaktiounstemperatur ass 37 ℃.Méi héich oder manner Temperatur féiert zu Verännerunge vun der Empfindlechkeet an der Absorptiounswäerter.

13. Stockage

Stockage Zoustand: 2-8 ℃.

Stockage Period: 12 Méint.

 


  • virdrun:
  • Nächste:

  • Schreift Äre Message hei a schéckt en un eis