táirge

Trealamh Iomaíoch Imdhíonachta Einsíme le haghaidh Anailís Chainníochtúil ar Tylosin

Cur síos gairid:

Is antaibheathach macrolide é Tylosin, a chuirtear i bhfeidhm go príomha mar antibacterial agus frith-mycoplasma.Níor bunaíodh ULIanna dochta ós rud é go bhféadfadh fo-iarmhairt thromchúiseach a bheith mar thoradh ar an druga seo i ngrúpaí áirithe.

Is táirge nua é an trealamh seo atá bunaithe ar theicneolaíocht ELISA, atá tapa, éasca, cruinn agus íogair i gcomparáid le hanailís ionstraimeach coitianta agus nach dteastaíonn ach 1.5 uair in aon oibríocht amháin, is féidir leis an earráid oibríochta agus an déine oibre a íoslaghdú go mór.


Sonraí Táirge

Clibeanna Táirge

Trealamh Iomaíoch Einsím Imdhíonachta do

Anailís Chainníochtúil arTilosin


1. Cúlra

TilosinIs antaibheathach macrolide é, a chuirtear i bhfeidhm go príomha mar antibacterial agus frith-mycoplasma.Níor bunaíodh ULIanna dochta ós rud é go bhféadfadh fo-iarmhairt thromchúiseach a bheith mar thoradh ar an druga seo i ngrúpaí áirithe.

Is táirge nua é an trealamh seo atá bunaithe ar theicneolaíocht ELISA, atá tapa, éasca, cruinn agus íogair i gcomparáid le hanailís ionstraimeach coitianta agus nach dteastaíonn ach 1.5 uair in aon oibríocht amháin, is féidir leis an earráid oibríochta agus an déine oibre a íoslaghdú go mór.

2. Prionsabal Tástála

Tá an trealamh seo bunaithe ar theicneolaíocht ELISA indíreach-iomaíoch.Tá na toibreacha microtiter brataithe le hantaigin cúplála.Tá an t-iarmhar tylosin sa sampla in iomaíocht leis an antaigin atá brataithe ar an pláta micriteir don antashubstaint.Tar éis einsím lipéadaithe frith-antasubstainte a chur leis, úsáidtear substráit TMB chun an dath a thaispeáint.Tá baint diúltach ag ionsú an tsampla leis an tylosin a chónaíonn ann, tar éis comparáid a dhéanamh leis an gCuar Caighdeánach, arna iolrú faoin bhfachtóir caolaithe, is féidir cainníocht iarmhar tylosin sa sampla a ríomh.

3. Iarratais

Is féidir an trealamh seo a úsáid in anailís chainníochtúil agus cháilíochtúil ar iarmhar tylosin i bhfíocháin ainmhithe (sicín, muiceoil, lacha) agus bainne, mil, ubh, etc.

4. Trasfhrithghníomhartha

Tylosin………………………………………………..100%

Tilmicisin………………………………………………………………………………<2%

5. Ábhair Riachtanach

5.1 Trealamh:

---- speictreafótaiméadar pláta micreatitéar (450nm/630nm)

---- Éalaitheoir rothlach nó ionstraimí triomú nítrigine

---- homogenizer

---- Shaker

---- Lártheifneoir

---- Iarmhéid anailíseach (ionduchtú: 0.01g)

---- Pípéad céimnithe: 10ml

---- Bolgán pípéad rubair

---- Fleascán toirtmhéadrach: 10ml

---- Feadáin lártheifneoir polaistiréin: 50ml

---- Micripéid: 20-200ml, 100-1000ml

250ml-ilipéad

5.2 Imoibrithe:

----Hiodrocsaíd sóidiam (NaOH, AR)

---- Décharbónáit sóidiam (NaHCO3,AR)

---- Carbónáit sóidiam (NaCO3, AR)

---- Aigéad trichloroaicéiteach (AR)

---- Aicéataitrile (AR)

---- Aicéatáit eitile (AR)

┅┅n- Heacsán (AR)

---- Uisce dí-ianaithe

6. Comhpháirteanna Kit

l Pláta micriteir le 96 tobar atá brataithe le hantaigin

l Réitigh chaighdeánacha (5 bhuidéal, 1ml / buidéal)

0ppb, 0.5ppb, 1.5ppb, 4.5ppb, 13.5ppb

l Rialú caighdeánach spiking: (1ml / buidéal)1ppm

l Comhchuingeach einsím 1ml……………..….…caipín dearg

l Tuaslagán antashubstainte 7ml……………….……caipín glas

l Réiteach A 7ml ………….…. caipín bán

l Tuaslagán B 7ml...…………………………..caipín dearg

l Tuaslagán stad 7ml.……………….…….caipín buí

l 20 × réiteach níocháin tiubhaithe 40ml

…………………………………..…caipín trédhearcach

l 4 × tuaslagán eastóscadh tiubhaithe 50ml

……………………………………………….caipín gorm

7. Ullmhúchán Imoibrithe:

Réiteach 1:Tuaslagán 0.1mol/L NaOH

Meáigh 0.4g NaOH go 100ml uisce dí-ianaithe agus measc go hiomlán.

Réiteach 2: 1mol/L réiteach NaOH

Meáigh 4g NaOH go 100ml uisce dí-ianaithe agus measc suas go hiomlán.

Réiteach 3: salann maolánach carbónáit

Réiteach1: 0.2M PB

Tuaslaig 51.6g de Na2HPO4·12H2O, 8.7g de NaH2PO4·2H2O le huisce dí-ianaithe agus caolaigh go 1000ml.

Réiteach2: Réiteach eastóscadh

Caolaigh an tuaslagán eastósctha tiubhaithe 2 × le huisce dí-ianaithe sa chóimheas toirte 1:1(eg 10ml de thuaslagán 2 × asbhainte + 10ml uisce dí-ianaithe), a úsáidfear le haghaidh eastóscadh samplach,is féidir an réiteach seo a stóráil ag 4 ℃ ar feadh 1 mhí.

Réiteach3: Nigh réiteach

Caolaigh an tuaslagán níocháin tiubhaithe 20 × le huisce dí-ianaithe sa chóimheas toirte de 1:19(eg 5ml de thuaslagán nigh 20 × + 95ml uisce dí-ianaithe), a úsáidfear le haghaidh níocháin na plátaí.Is féidir an réiteach seo a stóráil ag 4 ℃ ar feadh 1 mhí.

8. Ullmhóidí Samplacha

8.1 Fógra agus réamhchúraimí roimh oibriú:

(a) Bain úsáid as leideanna aonuaire le linn an turgnaimh, agus athraigh na leideanna nuair a ionsúnn tú imoibrí difriúil.

(b) Cinntigh go bhfuil gach uirlis glan.

(c) Coinnigh an sampla fíocháin faoi reo.

(d) Ba cheart sampla ullmhaithe a úsáid le haghaidh measúnaithe láithreach.

8.2 Fíochán ainmhithe (sicín, muiceoil, srl)

---- Homogenize an sampla le homogenizer;

---- Tóg 2.0 ± 0.05g aonchineálach isteach i bhfeadán lártheifneoir polaistiréin 50ml;cuir 2ml de 0.2M PB leis (réiteach1), croith a thuaslagadh, agus ansin cuir 8ml d'aicéatáit eitile agus croith go dian ar feadh 3 nóiméad;

---- Lártheifneoir le haghaidh scaradh: 3000g / teocht chomhthimpeallach / 5min.

---- Aistrigh 4ml den chéim orgánach sármhaith isteach i bhfeadán gloine 10ml, tirim le folctha uisce 50-60 ℃ faoi shruth gáis nítrigine;

---- Tuaslaig an fuílleach tirim le 1ml de n-heacsán, vortex ar feadh 30í le tuaslagadh, agus ansin cuir 1ml de thuaslagán eastósctha (réiteach2), vortex ar feadh 1min.lártheifneoir le haghaidh scaradh: 3000g / teocht chomhthimpeallach / 5min

---- Bain an comhchéim n-heacsán;tóg 50μl de chéim uiscí an tsubstráit le haghaidh measúnaithe.

 

Fachtóir caolaithe: 1

 

8.2 Bainne

---- Glac 100 μl de shampla bainne amh, meascadh le 900 μl de thuaslagán eastósctha (réiteach2), agus meascán go hiomlán.

---- Glac 50 μl den tuaslagán ullmhaithe le haghaidh measúnachta.

 

Fachtóir caolaithe: 10

 

9. Próiseas measúnaithe

9.1 Fógra roimh mheasúnú

9.1.1Déan cinnte go bhfuil gach imoibrí agus microwells go léir ag teocht an tseomra (20-25 ℃).

9.1.2Fill na himoibrithe eile go léir go 2-8díreach tar éis a úsáidtear.

9.1.3Is céim thábhachtach sa phróiseas measúnaithe é na microwells a ní i gceart;is é an fachtóir ríthábhachtach é maidir le hin-atáirgtheacht anailís ELISA.

9.1.4 Acuir an solas ar neamhní agus clúdaigh na microwells le linn goir.

9.2 Céimeanna an Mheasúnaithe

9.2.1 Tóg amach gach imoibrí ag teocht an tseomra (20-25 ℃) ar feadh níos mó ná 30 nóiméad, croith go réidh roimh úsáid.

9.2.2 Faigh amach na microwells atá ag teastáil agus cuir an chuid eile ar ais isteach sa mhála zip-glas ag 2-8 ℃ láithreach.

9.2.3 Ba chóir an tuaslagán nigh caolaithe a athéamh le bheith ag teocht an tseomra roimh úsáid.

9.2.4Uimhir:Ba chóir go ndéanfaí uimhriú ar gach suíomh microwell agus gach caighdeán agus sampla a reáchtáil i ndúblach.Taifead na caighdeáin agus seasaimh na samplaí.

9.2.5Add réiteach caighdeánach/sampla agus tuaslagán antashubstainte: Cuir 50µl de thuaslagán caighdeánach leis((trealamh curtha ar fáil) nó sampla ullmhaithe chuig na toibreacha comhfhreagracha.Cuir 50µl de thuaslagán antashubstaint leis(trealamh curtha ar fáil).Measc go réidh tríd an pláta a chroitheadh ​​de láimh agus gor ar feadh 30 nóiméad ag 37 ℃ le clúdach.

9.2.6Nigh: Bain an clúdach go réidh agus glan an leacht as na toibreacha agus sruthlaigh na microwells le tuaslagán níocháin caolaithe 250µl (réiteach3) ag eatramh de 10s ar feadh 4-5times.Ionsúigh an t-uisce iarmharach le páipéar ionsúiteach (is féidir an chuid eile mboilgeog aeir a dhíchur le barr neamhúsáidte).

9.2.7Cuir comhchuingeach einsím leis: Cuir 100ml de thuaslagán comhchuingeach einsím leis (trealamh curtha ar fáil) le gach tobar, measc go réidh agus gor ar feadh 30 nóiméad ag 37 ℃ le clúdach.Déan an chéim níocháin arís.

9.2.8Dathúcháin: Cuir 50µl de thuaslagán A(trealamh curtha ar fáil) agus 50µl de thuaslagán B(trealamh curtha ar fáil) chuig gach tobar.Measc go réidh agus gor ar feadh 15 nóiméad ag 37 ℃ le clúdach.

9.2.9Beart: Cuir 50µl den réiteach stad(trealamh curtha ar fáil) chuig gach tobar.Measc go réidh agus tomhas an t-ionsúite ag 450nm (Moltar é a thomhas leis an dé-thonnfhad 450/630nm. Léigh an toradh laistigh de 5 nóiméad tar éis an réiteach stad a chur leis).

10. Torthaí

10.1 Céatadán ionsúcháin

Roinntear meánluachanna na luachanna ionsúcháin a fhaightear do na caighdeáin agus na samplaí ar luach ionsúcháin an chéad chaighdeáin (caighdeán nialasach) agus iolraítear iad faoi 100%.Mar sin déantar an caighdeán nialasach cothrom le 100% agus luaitear na luachanna ionsúcháin i gcéatadáin.

B

Ionsú (%) = — — × 100%

B0

B —— caighdeán ionsúcháin (nó sampla)

B0 ——caighdeán ionsúite nialasach

10.2 Cuar Caighdeánach

---- Cuar caighdeánach a tharraingt: Glac luach ionsúcháin na gcaighdeán mar y-ais, leath-logartamach de thiúchan an tuaslagáin chaighdeáin tylosin (ppb) mar x-ais.

---- Déantar tiúchan tylosin gach sampla (ppb), ar féidir a léamh ón gcuar calabrúcháin, a iolrú faoin bhfachtóir caolaithe comhfhreagrach de gach sampla ina dhiaidh sin, agus faightear tiúchan iarbhír an tsampla.

Tabhair faoi deara le do thoil:

forbraíodh bogearraí speisialta le haghaidh anailíse sonraí, ar féidir iad a sholáthar ach é a iarraidh.

11. Íogaireacht, cruinneas agus cruinneas

Íogaireacht Tástála:1.5ppb

Teorainn braite:

Fíochán ainmhithe………………………….……………1.5ppb Bainne……………………………………………………………………………..…..15ppb Cruinneas:

Fíochán ainmhí …………………………...…………80±15%

Bainne………………………………..……….……80±10%

Beachtas:

Tá comhéifeacht athraithe an fheiste ELISA níos lú ná 10%.

12. Fógra

12.1 Laghdófar meánluachanna na luachanna ionsúcháin a fhaightear do na caighdeáin agus na samplaí mura bhfuil na himoibrithe agus na samplaí rialaithe go teocht an tseomra (20-25 ℃).

12.2 Ná lig do microwells a thriomú idir céimeanna chun atáirgtheacht nár éirigh leo a sheachaint agus an chéad chéim eile a oibriú díreach tar éis an sealbhóir microwells a thapú.

12.3 Croith gach imoibrí go réidh roimh é a úsáid.

12.4 Coinnigh do chraiceann ar shiúl ón réiteach stad mar go bhfuil sé 0.5MH2SO4réiteach.

12.5 Ná húsáid na feisteáin as dáta.Ná malartóidh imoibrithe baisceanna éagsúla, nó laghdóidh sé an íogaireacht.

12.6 Coinnigh na feisteáin ELISA ag 2-8 ℃, ná reoite.Séalaigh plátaí micreathoibreacha scíthe, Seachain solas díreach le linn gach goir.Moltar na plátaí microtiter a chlúdach.

12.7 Ba chóir réiteach tsubstráit a thréigean má chasann sé dathanna.D’fhéadfadh go n-iompódh na himoibrithe go dona má tá luach ionsúcháin (450/630nm) den chaighdeán nialasach níos lú ná 0.5 (A450nm<0.5).

12.8 Ní mór an t-imoibriú dathúcháin 15 nóiméad tar éis tuaslagán A agus tuaslagán B a chur leis. Agus is féidir leat na raonta ama goir a shíneadh go 20 nóiméad nó níos mó má tá an dath ró-éadrom le socrú.Ná téigh thar 30 nóiméad, ar a mhalairt, giorraigh an t-am goir i gceart.

12.9 Is é 37 ℃ an teocht imoibrithe is fearr.Beidh athruithe íogaireachta agus luachanna ionsúcháin mar thoradh ar theocht níos airde nó níos ísle.

13. Stóráil

Coinníoll stórála: 2-8 ℃.

Tréimhse stórála: 12 mhí.

 


  • Roimhe Seo:
  • Ar Aghaidh:

  • Scríobh do theachtaireacht anseo agus seol chugainn é