ଟାଇଲୋସିନ୍ ର ପରିମାଣିକ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ପ୍ରତିଯୋଗୀ ଏନଜାଇମ୍ ଇମ୍ୟୁନୋଏସ୍ କିଟ୍ |
ପାଇଁ ପ୍ରତିଯୋଗୀ ଏନଜାଇମ୍ ଇମ୍ୟୁନୋଏସ୍ କିଟ୍ |
ପରିମାଣର ବିଶ୍ଳେଷଣ |ଟାଇଲୋସିନ୍ |
1. ପୃଷ୍ଠଭୂମି
ଟାଇଲୋସିନ୍ |ଏହା ଏକ ମାକ୍ରୋଲାଇଡ୍ ଆଣ୍ଟିବାୟୋଟିକ୍, ଯାହା ମୁଖ୍ୟତ ant ଆଣ୍ଟିବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆଲ୍ ଏବଂ ଆଣ୍ଟି-ମାଇକୋପ୍ଲାଜମା ଭାବରେ ପ୍ରୟୋଗ କରାଯାଏ |ଏହି drug ଷଧ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଗୋଷ୍ଠୀରେ ଗୁରୁତର ପାର୍ଶ୍ୱ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଆଣିପାରେ କାରଣ କଠୋର MRL ଗୁଡ଼ିକ ସ୍ଥାପିତ ହୋଇନାହିଁ |
ଏହି କିଟ୍ ELISA ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ଉପରେ ଆଧାରିତ ଏକ ନୂତନ ଉତ୍ପାଦ, ଯାହା ସାଧାରଣ ଯନ୍ତ୍ରପାତି ବିଶ୍ଳେଷଣ ତୁଳନାରେ ଦ୍ରୁତ, ସହଜ, ସଠିକ୍ ଏବଂ ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ଅଟେ ଏବଂ କେବଳ ଗୋଟିଏ ଅପରେସନରେ 1.5 ଘଣ୍ଟା ଆବଶ୍ୟକ କରେ, ଏହା ଅପରେସନ୍ ତ୍ରୁଟି ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟର ତୀବ୍ରତାକୁ ଯଥେଷ୍ଟ କମ କରିପାରେ |
2. ପରୀକ୍ଷା ନୀତି
ଏହି କିଟ୍ ପରୋକ୍ଷ-ପ୍ରତିଯୋଗୀ ELISA ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ଉପରେ ଆଧାରିତ |ମାଇକ୍ରୋଟାଇଟର କୂଅଗୁଡ଼ିକ ଆଣ୍ଟିଜେନ୍ ସହିତ ଯୋଡି ହୋଇ ରହିଥାଏ |ନମୁନାରେ ଥିବା ଟାଇଲୋସିନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ ଆଣ୍ଟିବଡି ପାଇଁ ମାଇକ୍ରୋଟାଇଟର ପ୍ଲେଟରେ ଆବୃତ ଆଣ୍ଟିଜେନ୍ ସହିତ ପ୍ରତିଦ୍ୱନ୍ଦ୍ୱିତା କରେ |ଆଣ୍ଟି-ଆଣ୍ଟିବଡି ନାମକ ଏନଜାଇମର ଯୋଗ ପରେ, ଟିଏମବି ସବଷ୍ଟ୍ରେଟ୍ ରଙ୍ଗ ଦେଖାଇବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |ନମୁନାର ଅବଶୋଷଣ ଏଥିରେ ଥିବା ଟାଇଲୋସିନ୍ ସହିତ ନକାରାତ୍ମକ ଭାବରେ ଜଡିତ, ଷ୍ଟାଣ୍ଡାର୍ଡ ବକ୍ର ସହିତ ତୁଳନା କରିବା ପରେ, dilution ଫ୍ୟାକ୍ଟର୍ ଦ୍ୱାରା ଗୁଣିତ, ନମୁନାରେ ଟାଇଲୋସିନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟ ପରିମାଣ ଗଣନା କରାଯାଇପାରେ |
3. ପ୍ରୟୋଗଗୁଡ଼ିକ
ଏହି କିଟ୍ ପଶୁ ଟିସୁ (ଚିକେନ୍, ଘୁଷୁରୀ, ଡାକୁ) ଏବଂ କ୍ଷୀର, ମହୁ, ଅଣ୍ଡା ଇତ୍ୟାଦିରେ ଟାଇଲୋସିନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟ ପରିମାଣିକ ଏବଂ ଗୁଣାତ୍ମକ ବିଶ୍ଳେଷଣରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରିବ |
4. କ୍ରସ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା |
ଟାଇଲୋସିନ୍ ………………………………………… ..100%
ଟିଲମିକୋସିନ୍ ……………………………………………… <2%
5. ସାମଗ୍ରୀ ଆବଶ୍ୟକ |
5.1 ଉପକରଣ:
---- ମାଇକ୍ରୋଟିଟର୍ ପ୍ଲେଟ୍ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରଫୋଟୋମିଟର (450nm / 630nm)
---- ରୋଟାରୀ ବାଷ୍ପୀକରଣକାରୀ କିମ୍ବା ନାଇଟ୍ରୋଜେନ୍ ଶୁଖାଇବା ଉପକରଣ |
---- ହୋମୋଜେନାଇଜର |
---- ଶେକର୍ |
---- ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ |
---- ଆନାଲିଟିକାଲ୍ ସନ୍ତୁଳନ (ଇନ୍ଦୁକାନ୍ସ: 0.01g)
---- ସ୍ନାତକ ପାଇପେଟ୍: 10 ମି
---- ରବର ପାଇପେଟ୍ ବଲ୍ବ |
---- ଭଲ୍ୟୁମେଟ୍ରିକ୍ ଫ୍ଲାସ୍କ: 10 ମି
---- ପଲିଷ୍ଟାଇରନ୍ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ ଟ୍ୟୁବ୍: 50 ମି
---- ମାଇକ୍ରୋପିପେଟ୍: 20-200 ମିଲ୍, 100-1000 ମି
250ml-multipipette |
5.2 ରେଜେଣ୍ଟସ୍:
----ସୋଡିୟମ୍ ହାଇଡ୍ରକ୍ସାଇଡ୍ (NaOH, AR)
---- ସୋଡିୟମ୍ ବାଇକାର୍ବୋନାଟ୍ (NaHCO) |3,ଆର୍)
---- ସୋଡିୟମ୍ କାର୍ବୋନାଟ୍ (NaCO) |3, AR)
---- ଟ୍ରାଇକ୍ଲୋରୋଏସେଟିକ୍ ଏସିଡ୍ (ଆର୍)
---- ଆସେଟୋନିଟ୍ରିଲ୍ (ଆର୍)
---- ଇଥିଲ୍ ଆସେଟେଟ୍ (ଆର୍)
┅┅n-Hexane (AR)
---- ଡିଓନାଇଜଡ୍ ଜଳ |
6. କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
l ଆଣ୍ଟିଜେନ୍ ସହିତ ଆବୃତ 96 ଟି କୂଅ ସହିତ ମାଇକ୍ରୋଟାଇଟର ପ୍ଲେଟ୍ |
l ମାନକ ସମାଧାନ (5 ବୋତଲ, 1 ମି.ଲି / ବୋତଲ)
0ppb, 0.5ppb, 1.5ppb, 4.5ppb, 13.5ppb
l ସ୍ପାଇକ୍ ଷ୍ଟାଣ୍ଡାର୍ଡ କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍: (1ml / ବୋତଲ)1ppm
l ଏନଜାଇମ୍ କଞ୍ଜୁଗେଟ୍ 1ml …………… ..… ..… ଲାଲ୍ କ୍ୟାପ୍ |
l ଆଣ୍ଟିବଡି ସମାଧାନ 7ml ………………। …… ସବୁଜ କ୍ୟାପ୍ |
l ସମାଧାନ A 7ml ……………………।…। …… ଧଳା କ୍ୟାପ୍ |
l ସମାଧାନ B 7ml ... …………………………… ..red cap
l ସମାଧାନ ବନ୍ଦ କରନ୍ତୁ 7ml। ………………। ……… .ସେଲୋ କ୍ୟାପ୍ |
l 20 × ଏକାଗ୍ର ଧୋଇବା ସମାଧାନ 40ml |
………………………………… ..… ସ୍ୱଚ୍ଛ କ୍ୟାପ୍ |
l 4 × ଏକାଗ୍ର ନିଷ୍କାସନ ସମାଧାନ 50ml |
………………………………………………। ବ୍ଲୁ କ୍ୟାପ୍
7. ପୁନ ag ପ୍ରସ୍ତୁତି:
ସମାଧାନ 1:0.1mol / L NaOH ସମାଧାନ |
0.4g NaOH ରୁ 100ml ଡିଓନାଇଜଡ୍ ପାଣି ଓଜନ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ମିଶ୍ରଣ କରନ୍ତୁ |
ସମାଧାନ 2: 1mol / L NaOH ସମାଧାନ |
4g NaOH ରୁ 100ml ଡିଓନାଇଜଡ୍ ପାଣି ଓଜନ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ମିଶାନ୍ତୁ |
ସମାଧାନ 3: କାର୍ବୋନେଟ୍ ବଫର୍ ଲୁଣ |
ସମାଧାନ1: 0.2M PB
Na ର 51.6g ବିସର୍ଜନ କରନ୍ତୁ |2HPO4· 12H2O, NaH ର 8.7g2PO4· 2H2O ଡିଅନାଇଜଡ୍ ପାଣି ସହିତ ଏବଂ 1000ml ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ହଳଦୀ କରନ୍ତୁ |
ସମାଧାନ୨: ନିଷ୍କାସନ ସମାଧାନ |
1: 1 ର ଭଲ୍ୟୁମ ଅନୁପାତରେ ଡିଅନାଇଜଡ୍ ଜଳ ସହିତ 2 × ଏକାଗ୍ର ନିଷ୍କାସନ ସମାଧାନକୁ ମିଶ୍ରିତ କରନ୍ତୁ |ଯଥା 10ml 2 × ନିଷ୍କାସନ ସମାଧାନ + 10ml deionized ଜଳ |), ଯାହା ନମୁନା ଉତ୍ତୋଳନ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହେବ,ଏହି ସମାଧାନ 1 ମାସ ପାଇଁ 4 at ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇପାରିବ |.
ସମାଧାନ:: ସମାଧାନ ଧୋଇ ଦିଅ |
20 × ଏକାଗ୍ର ଧୋଇବା ସମାଧାନକୁ ଭଲ୍ୟୁମ ଅନୁପାତରେ ଡିଅନାଇଜଡ୍ ପାଣି ସହିତ ମିଶାନ୍ତୁ (1:19)ଯଥା 5ml 20 × ଧୋଇବା ସମାଧାନ + 95ml ଡିଓନାଇଜଡ୍ ପାଣି |), ଯାହା ପ୍ଲେଟ ଧୋଇବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହେବ |ଏହି ସମାଧାନ 1 ମାସ ପାଇଁ 4 at ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇପାରିବ |.
8. ନମୁନା ପ୍ରସ୍ତୁତି |
8.1 କାର୍ଯ୍ୟ ପୂର୍ବରୁ ନୋଟିସ୍ ଏବଂ ସତର୍କତା:
(କ) ପରୀକ୍ଷଣ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ଦୟାକରି ଏକ-ଅଫ୍ ଟିପ୍ସ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ବିଭିନ୍ନ ରିଜେଣ୍ଟ୍ ଶୋଷିବାବେଳେ ଟିପ୍ସ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରନ୍ତୁ |
(ଖ) ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ ଯେ ସମସ୍ତ ଯନ୍ତ୍ରଗୁଡ଼ିକ ସଫା ଅଛି |
(ଗ) ଟିସୁ ନମୁନାକୁ ଫ୍ରିଜରେ ରଖନ୍ତୁ |
(ଘ) ଏକାସାଙ୍ଗରେ ଅନୁସନ୍ଧାନ ପାଇଁ ପ୍ରସ୍ତୁତ ନମୁନା ବ୍ୟବହାର କରାଯିବା ଉଚିତ |
.2.୨ ପଶୁ ଟିସୁ (ଚିକେନ୍, ଘୁଷୁରି ଇତ୍ୟାଦି)
---- ହୋମୋଜେନାଇଜର ସହିତ ନମୁନାକୁ ହୋମୋଜେନାଇଜ୍ କରନ୍ତୁ;
---- 50ml ପଲିଷ୍ଟାଇରନ୍ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ ଟ୍ୟୁବରେ 2.0 ± 0.05g ହୋମୋଜେନେଟ୍ ନିଅନ୍ତୁ;0.2M PB ର 2ml ଯୋଗ କରନ୍ତୁ (ସମାଧାନ1), ତରଳିବା ପାଇଁ ହଲାନ୍ତୁ, ଏବଂ ତା’ପରେ 8ml ଇଥିଲ୍ ଆସେଟେଟ୍ ମିଶାନ୍ତୁ ଏବଂ 3 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଜୋରରେ ହଲାନ୍ତୁ;
---- ପୃଥକତା ପାଇଁ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍: 3000g / ପରିବେଶ ତାପମାତ୍ରା / 5 ମିନିଟ୍ |
---- ଅଲ ern କିକ ଜ organic ବ ପର୍ଯ୍ୟାୟର 4ml କୁ 10ml ଗ୍ଲାସ୍ ଟ୍ୟୁବରେ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କରନ୍ତୁ, ନାଇଟ୍ରୋଜେନ୍ ଗ୍ୟାସ୍ ପ୍ରବାହରେ 50-60 ℃ ଜଳ ସ୍ନାନ ସହିତ ଶୁଖାନ୍ତୁ;
---- ଶୁଖିଲା ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶକୁ 1ml n-hexane, 30s ପାଇଁ ଭର୍ଟେକ୍ସ ସହିତ ଦ୍ରବଣ କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ତା’ପରେ 1ml ନିଷ୍କାସନ ସମାଧାନ ଯୋଗ କରନ୍ତୁ (ସମାଧାନ2), 1 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଭର୍ଟେକ୍ସ |ପୃଥକତା ପାଇଁ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍: 3000g / ପରିବେଶ ତାପମାତ୍ରା / 5 ମିନିଟ୍ |
---- ଅଲ ern କିକ n-hexane ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଅପସାରଣ କରନ୍ତୁ;ଅନୁଧ୍ୟାନ ପାଇଁ ସବଷ୍ଟ୍ରେଟ୍ ଜଳୀୟ ପର୍ଯ୍ୟାୟର 50μl ନିଅ |
ମିଶ୍ରଣ କାରକ: ୧
8.2 କ୍ଷୀର
---- 100μl କଞ୍ଚା କ୍ଷୀର ନମୁନା ନିଅ, 900μl ନିଷ୍କାସନ ସମାଧାନ ସହିତ ମିଶ୍ରଣ କର (ସମାଧାନ2), ଏବଂ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ମିଶ୍ରଣ କରନ୍ତୁ |
---- ଅନୁଧ୍ୟାନ ପାଇଁ ପ୍ରସ୍ତୁତ ସମାଧାନର 50μl ନିଅନ୍ତୁ |
ମିଶ୍ରଣ କାରକ: ୧୦
9. ଅନୁଧ୍ୟାନ ପ୍ରକ୍ରିୟା |
9.1 ଅନୁଧ୍ୟାନ ପୂର୍ବରୁ ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ |
9.1.1ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ ଯେ ସମସ୍ତ ରେଜେଣ୍ଟସ୍ ଏବଂ ମାଇକ୍ରୋୱେଲ୍ ସବୁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ଅଛି (20-25 ℃) |
9.1.2ସମସ୍ତ ଅବଶିଷ୍ଟ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକୁ 2-8 କୁ ଫେରସ୍ତ କରନ୍ତୁ |℃ବ୍ୟବହାର ପରେ ତୁରନ୍ତ |
9.1.3ମାଇକ୍ରୋୱେଲଗୁଡିକ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ଧୋଇବା ଅନୁଧ୍ୟାନ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପଦକ୍ଷେପ;ଏହା ELISA ବିଶ୍ଳେଷଣର ପୁନ oduc ପ୍ରବୃତ୍ତି ପାଇଁ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ କାରଣ |
9.1.4 A।ଆଲୋକକୁ ଶୂନ୍ୟ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଇନକ୍ୟୁବେସନ ସମୟରେ ମାଇକ୍ରୋୱେଲଗୁଡିକୁ ଘୋଡାନ୍ତୁ |
9.2 ଅନୁଧ୍ୟାନ ପଦକ୍ଷେପ |
9.2.1 ସମସ୍ତ ତାପମାତ୍ରାକୁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ (20-25 ℃) 30 ମିନିଟରୁ ଅଧିକ ସମୟ ବାହାର କରନ୍ତୁ, ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ ଧୀରେ ଧୀରେ ହଲାନ୍ତୁ |
9.2.2 ଆବଶ୍ୟକ ମାଇକ୍ରୋୱେଲଗୁଡିକ ବାହାର କର ଏବଂ ବାକିଗୁଡ଼ିକୁ ତୁରନ୍ତ 2-8 at ରେ ଜିପ୍-ଲକ୍ ବ୍ୟାଗକୁ ଫେରାଇ ଦିଅ |
9.2.3 ମିଶ୍ରିତ ଧୋଇବା ସମାଧାନ ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ରହିବା ପାଇଁ ପୁନ arm ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯିବା ଉଚିତ |
9.2.4ସଂଖ୍ୟା:ପ୍ରତ୍ୟେକ ମାଇକ୍ରୋୱେଲ୍ ସ୍ଥିତିକୁ ନମ୍ବର କରାଯାଇଛି ଏବଂ ସମସ୍ତ ମାନକ ଏବଂ ନମୁନାଗୁଡିକ ନକଲରେ ଚାଲିବା ଉଚିତ |ମାନକ ଏବଂ ନମୁନା ସ୍ଥିତିକୁ ରେକର୍ଡ କରନ୍ତୁ |
9.2.5Add ମାନକ ସମାଧାନ / ନମୁନା ଏବଂ ଆଣ୍ଟିବଡି ସମାଧାନ |: ଷ୍ଟାଣ୍ଡାର୍ଡ ସମାଧାନର 50µl ଯୋଡନ୍ତୁ ((କିଟ୍ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି |)) କିମ୍ବା ସଂପୃକ୍ତ କୂଅ ପାଇଁ ନମୁନା ପ୍ରସ୍ତୁତ |50µl ଆଣ୍ଟିବଡି ସମାଧାନ ଯୋଗ କରନ୍ତୁ (କିଟ୍ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି |)ପ୍ଲେଟକୁ ହଲାଇ ହଲାଇ ଧୀରେ ଧୀରେ ମିଶାନ୍ତୁ ଏବଂ 30 ମିନିଟରେ 37 ℃ କଭର୍ ସହିତ ଇନକ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ |
9.2.6ଧୋଇ ଦିଅ |: କଭରକୁ ଧୀରେ ଧୀରେ ବାହାର କରନ୍ତୁ ଏବଂ କୂଅରୁ ତରଳ ଶୁଦ୍ଧ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ମାଇକ୍ରୋୱେଲ୍କୁ 250µl ମିଶ୍ରିତ ଧୋଇ ସଲ୍ୟୁସନ୍ ସହିତ ଧୋଇ ଦିଅନ୍ତୁ (ସମାଧାନ3) 4-5 ସମୟ ପାଇଁ 10s ବ୍ୟବଧାନରେ |ଅବଶୋଷିତ କାଗଜ ସହିତ ଅବଶିଷ୍ଟ ଜଳକୁ ଅବଶୋଷଣ କର (ଅବଶିଷ୍ଟ ବାୟୁ ବବୁଲକୁ ଅବ୍ୟବହୃତ ଟିପ୍ ସହିତ ଦୂର କରାଯାଇପାରିବ) |
9.2.7ଏନଜାଇମ୍ କଞ୍ଜୁଗେଟ୍ ଯୋଗ କରନ୍ତୁ |: 100ml ଏନଜାଇମ୍ କଞ୍ଜୁଗେଟ୍ ସମାଧାନ ଯୋଗ କରନ୍ତୁ (କିଟ୍ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି |) ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅକୁ, ଧୀରେ ଧୀରେ ମିଶ୍ରଣ କରନ୍ତୁ ଏବଂ 30 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 37 cover କଭର୍ ସହିତ ଇନକ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ |ଧୋଇବା ପଦକ୍ଷେପକୁ ପୁନରାବୃତ୍ତି କରନ୍ତୁ |.
9.2.8ରଙ୍ଗ: ସମାଧାନର 50µl ଯୋଗ କରନ୍ତୁ (କିଟ୍ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି |) ଏବଂ 50µl ସମାଧାନ B (କିଟ୍ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି |ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅକୁ |ଧୀରେ ଧୀରେ ମିଶ୍ରଣ କରନ୍ତୁ ଏବଂ କଭର୍ ସହିତ 37 at ରେ 15 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଇନକ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ |
9.2.9ମାପ |: ଷ୍ଟପ୍ ସମାଧାନର 50µl ଯୋଡନ୍ତୁ (କିଟ୍ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି |ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅକୁ |ଧୀରେ ଧୀରେ ମିଶ୍ରଣ କରନ୍ତୁ ଏବଂ 450nm ରେ ଅବଶୋଷଣ ମାପନ୍ତୁ (ଏହା 450 / 630nm ର ଡୁଆଲ୍ ତରଙ୍ଗଦ eng ର୍ଘ୍ୟ ସହିତ ମାପ କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି | ଷ୍ଟପ୍ ସଲ୍ୟୁସନ୍ ଯୋଡିବା ପରେ 5 ମିନିଟ୍ ମଧ୍ୟରେ ଫଳାଫଳ ପ Read ନ୍ତୁ) |
10. ଫଳାଫଳ
10.1 ଶତକଡା ଅବଶୋଷଣ |
ମାନକ ଏବଂ ନମୁନାଗୁଡିକ ପାଇଁ ପ୍ରାପ୍ତ ଅବଶୋଷଣ ମୂଲ୍ୟଗୁଡ଼ିକର ହାରାହାରି ମୂଲ୍ୟଗୁଡିକ ପ୍ରଥମ ମାନକ (ଶୂନ ମାନକ) ର ଅବଶୋଷଣ ମୂଲ୍ୟ ଦ୍ୱାରା ବିଭକ୍ତ ଏବଂ 100% ଗୁଣିତ |ଶୂନ ମାନକ ଏହିପରି 100% ସହିତ ସମାନ ଏବଂ ଶୋଷିବା ମୂଲ୍ୟ ଶତକଡା ଉଦ୍ଧୃତ ହୋଇଛି |
B
ଅବଶୋଷଣ (%) = —— × 100% |
B0
B ——absorbance ମାନକ (କିମ୍ବା ନମୁନା)
B0 ——absorbance ଶୂନ ମାନକ |
10.2 ମାନକ ବକ୍ର
---- ଏକ ମାନକ ବକ୍ର ଆଙ୍କିବା ପାଇଁ: ମାନାଙ୍କ ଅବଶୋଷଣ ମୂଲ୍ୟକୁ y-axis, ଟାଇଲୋସିନ୍ ଷ୍ଟାଣ୍ଡାର୍ଡ ସଲ୍ୟୁସନ୍ (ppb) ର ଏକାଗ୍ରତାର ସେମି ଲୋଗାରିଥମିକ୍ ଭାବରେ ଗ୍ରହଣ କର |
---- ପ୍ରତ୍ୟେକ ନମୁନାର ଟାଇଲୋସିନ୍ ଏକାଗ୍ରତା (ppb), ଯାହା କାଲିବ୍ରେସନ୍ ବକ୍ରରୁ ପ read ାଯାଇପାରିବ, ଅନୁସରଣ କରାଯାଇଥିବା ପ୍ରତ୍ୟେକ ନମୁନାର ସଂପୃକ୍ତ ଦିଲ୍ୟୁସନ୍ ଫ୍ୟାକ୍ଟର୍ ଦ୍ୱାରା ଗୁଣିତ ହୁଏ ଏବଂ ନମୁନାର ପ୍ରକୃତ ଏକାଗ୍ରତା ପ୍ରାପ୍ତ ହୁଏ |
ଦୟାକରି ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ:
ଡାଟା ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ସ୍ୱତନ୍ତ୍ର ସଫ୍ଟୱେର୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଇଛି, ଯାହା ଅନୁରୋଧ ଅନୁଯାୟୀ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇପାରିବ |
11. ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା, ସଠିକତା ଏବଂ ସଠିକତା |
ପରୀକ୍ଷା ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା:1.5ppb
ଚିହ୍ନଟ ସୀମା:
ପଶୁ ଟିସୁ …………………………। …………… 1.5ppb କ୍ଷୀର …………………………………………… .....… ..15ppb ସଠିକତା:
ପଶୁ ଟିସୁ ………………………… ... ………… 80 ± 15%
କ୍ଷୀର ………………………………… .. ………। …… 80 ± 10%
ସଠିକତା:
ELISA କିଟ୍ ର ଭେରିଏସନ୍ କୋଏଫିସିଏଣ୍ଟ୍ 10% ରୁ କମ୍ ଅଟେ |
12. ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ |
12.1 ମାନକ ଏବଂ ନମୁନା ପାଇଁ ପ୍ରାପ୍ତ ଅବଶୋଷଣ ମୂଲ୍ୟର ହାରାହାରି ମୂଲ୍ୟ ହ୍ରାସ ହେବ ଯଦି ରେଜେଣ୍ଟ ଏବଂ ନମୁନାଗୁଡିକ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ନିୟନ୍ତ୍ରିତ ହୋଇନଥାଏ (20-25 ℃) |
12.2 ଅସଫଳ ପୁନ oduc ପ୍ରବୃତ୍ତିକୁ ଏଡାଇବା ପାଇଁ ପଦକ୍ଷେପଗୁଡିକ ମଧ୍ୟରେ ମାଇକ୍ରୋୱେଲଗୁଡ଼ିକୁ ଶୁଖିବାକୁ ଦିଅନ୍ତୁ ନାହିଁ ଏବଂ ମାଇକ୍ରୋୱେଲ୍ସ ଧାରକକୁ ଟ୍ୟାପ୍ କରିବା ପରେ ତୁରନ୍ତ ପରବର୍ତ୍ତୀ ପଦକ୍ଷେପକୁ ଚଲାନ୍ତୁ |
12.3 ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ଧୀରେ ଧୀରେ ହଲାନ୍ତୁ |
12.4 ଆପଣଙ୍କ ଚର୍ମକୁ ଷ୍ଟପ୍ ସଲ୍ୟୁସନ୍ ଠାରୁ ଦୂରରେ ରଖନ୍ତୁ କାରଣ ଏହା ହେଉଛି 0.5MH |2SO4ସମାଧାନ
12.5 କିଟ୍ ଗୁଡିକ ପୁରୁଣା ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ ନାହିଁ |ବିଭିନ୍ନ ବ୍ୟାଚ୍ ର ରେଜେଣ୍ଟ୍ ବଦଳାନ୍ତୁ ନାହିଁ, ନଚେତ୍ ଏହା ସମ୍ବେଦନଶୀଳତାକୁ ହ୍ରାସ କରିବ |
12.6 ELISA କିଟ୍କୁ 2-8 at ରେ ରଖନ୍ତୁ, ଫ୍ରିଜ୍ କରନ୍ତୁ ନାହିଁ |ବିଶ୍ରାମ ମାଇକ୍ରୋୱେଲ ପ୍ଲେଟଗୁଡିକ ସିଲ୍ କରନ୍ତୁ, ସମସ୍ତ ଇନକ୍ୟୁବେସନ ସମୟରେ ସିଧା ସୂର୍ଯ୍ୟ କିରଣରୁ ଦୂରେଇ ରୁହନ୍ତୁ |ମାଇକ୍ରୋଟାଇଟର ପ୍ଲେଟଗୁଡ଼ିକୁ ଆଚ୍ଛାଦନ କରିବା ସୁପାରିଶ କରାଯାଏ |
12.7 ସବଷ୍ଟ୍ରେଟ୍ ସଲ୍ୟୁସନ୍ ଯଦି ରଙ୍ଗ ହୋଇଯାଏ ତେବେ ପରିତ୍ୟାଗ କରାଯିବା ଉଚିତ |ଶୂନ୍ୟ ମାନାଙ୍କ ଅବଶୋଷଣ ମୂଲ୍ୟ (450 / 630nm) 0.5 (A450nm <0.5) ରୁ କମ୍ ହେଲେ ରେଜେଣ୍ଟଗୁଡିକ ଖରାପ ହୋଇପାରେ |
12.8 ସମାଧାନ A ଏବଂ ସମାଧାନ B ର ଯୋଗ ପରେ ରଙ୍ଗର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା 15 ମିନିଟ୍ ଆବଶ୍ୟକ କରେ |କଦାପି 30 ମିନିଟ୍ ଅତିକ୍ରମ କରନ୍ତୁ ନାହିଁ, ବିପରୀତରେ, ଇନକ୍ୟୁବେସନ ସମୟକୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ଛୋଟ କରନ୍ତୁ |
12.9 ସର୍ବୋତ୍କୃଷ୍ଟ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ତାପମାତ୍ରା 37 ℃ |ଉଚ୍ଚ କିମ୍ବା ନିମ୍ନ ତାପମାତ୍ରା ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ଏବଂ ଅବଶୋଷଣ ମୂଲ୍ୟର ପରିବର୍ତ୍ତନ ଆଣିବ |
13. ସଂରକ୍ଷଣ
ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା: 2-8 ℃।
ସଂରକ୍ଷଣ ଅବଧି: 12 ମାସ |.
