პროდუქტი

კონკურენტული ფერმენტის იმუნოანალიზის ნაკრები ტილოსინის რაოდენობრივი ანალიზისთვის

Მოკლე აღწერა:

ტილოსინი არის მაკროლიდური ანტიბიოტიკი, რომელიც ძირითადად გამოიყენება როგორც ანტიბაქტერიული და ანტიმიკოპლაზმური.დადგენილია მკაცრი MRL-ები, ვინაიდან ამ პრეპარატმა შეიძლება გამოიწვიოს სერიოზული გვერდითი მოვლენები გარკვეულ ჯგუფებში.

ეს ნაკრები არის ახალი პროდუქტი ELISA ტექნოლოგიაზე დაფუძნებული, რომელიც არის სწრაფი, მარტივი, ზუსტი და მგრძნობიარე შედარებით საერთო ინსტრუმენტულ ანალიზთან შედარებით და სჭირდება მხოლოდ 1,5 საათი ერთ ოპერაციაში, მას შეუძლია მნიშვნელოვნად შეამციროს მუშაობის შეცდომა და მუშაობის ინტენსივობა.


პროდუქტის დეტალი

პროდუქტის ტეგები

კონკურენტული ფერმენტის იმუნოანალიზის ნაკრები

რაოდენობრივი ანალიზიტილოსინი


1. ფონი

ტილოსინიარის მაკროლიდური ანტიბიოტიკი, რომელიც ძირითადად გამოიყენება როგორც ანტიბაქტერიული და ანტიმიკოპლაზმური.დადგენილია მკაცრი MRL-ები, ვინაიდან ამ პრეპარატმა შეიძლება გამოიწვიოს სერიოზული გვერდითი მოვლენები გარკვეულ ჯგუფებში.

ეს ნაკრები არის ახალი პროდუქტი ELISA ტექნოლოგიაზე დაფუძნებული, რომელიც არის სწრაფი, მარტივი, ზუსტი და მგრძნობიარე შედარებით საერთო ინსტრუმენტულ ანალიზთან შედარებით და სჭირდება მხოლოდ 1,5 საათი ერთ ოპერაციაში, მას შეუძლია მნიშვნელოვნად შეამციროს მუშაობის შეცდომა და მუშაობის ინტენსივობა.

2. ტესტის პრინციპი

ეს ნაკრები ეფუძნება არაპირდაპირ კონკურენტულ ELISA ტექნოლოგიას.მიკროტიტრის ჭაბურღილები დაფარულია დაწყვილების ანტიგენით.ნიმუშში ტილოზინის ნარჩენი კონკურენციას უწევს მიკროტიტრულ ფირფიტაზე დაფარულ ანტიგენს ანტისხეულისთვის.ფერმენტის საწინააღმდეგო ანტისხეულების დამატების შემდეგ, TMB სუბსტრატი გამოიყენება ფერის საჩვენებლად.ნიმუშის აბსორბცია უარყოფითად არის დაკავშირებული მასში არსებულ ტილოზინთან, სტანდარტულ მრუდთან შედარების შემდეგ, გამრავლებული განზავების კოეფიციენტზე, შეიძლება გამოითვალოს ნიმუშში ტილოსინის ნარჩენების რაოდენობა.

3. აპლიკაციები

ეს ნაკრები შეიძლება გამოყენებულ იქნას ტილოსინის ნარჩენების რაოდენობრივ და ხარისხობრივ ანალიზში ცხოველურ ქსოვილში (ქათამი, ღორის ხორცი, იხვი) და რძეში, თაფლში, კვერცხში და ა.შ.

4. ჯვარედინი რეაქციები

ტილოსინი……………………………………………..100%

ტილმიკოსინი……………………………………………<2%

5. საჭირო მასალები

5.1 აღჭურვილობა:

---- მიკროტიტრული ფირფიტის სპექტროფოტომეტრი (450 ნმ/630 ნმ)

----მბრუნავი აორთქლების ან აზოტის საშრობი ინსტრუმენტები

----ჰომოგენიზატორი

----შეიქერი

----ცენტრიფუგა

----ანალიტიკური ბალანსი (ინდუქციურობა: 0,01გრ)

----გრადუირებული პიპეტი: 10მლ

----რეზინის პიპეტის ნათურა

----მოცულობითი კოლბა: 10მლ

----პოლისტიროლის ცენტრიფუგის მილები: 50მლ

---- მიკროპიპეტები: 20-200მლ, 100-1000მლ

250მლ-მულტიპიპეტი

5.2 რეაგენტები:

----ნატრიუმის ჰიდროქსიდი (NaOH, AR)

----ნატრიუმის ბიკარბონატი (NaHCO3,AR)

---- ნატრიუმის კარბონატი (NaCO3, AR)

----ტრიქლოროძმარმჟავა (AR)

---- აცეტონიტრილი (AR)

----ეთილის აცეტატი (AR)

┅┅n-ჰექსანი (AR)

----დეიონიზებული წყალი

6. ნაკრების კომპონენტები

ლ მიკროტიტრის ფირფიტა 96 ჭაბურღილით დაფარული ანტიგენით

ლ სტანდარტული ხსნარები (5 ბოთლი, 1 მლ/ბოთლი)

0ppb, 0.5ppb, 1.5ppb, 4.5ppb, 13.5ppb

ლ Spiking სტანდარტული კონტროლი: (1 მლ / ბოთლი)1ppm

l ფერმენტის კონიუგატი 1მლ…………………………წითელი ქუდი

l ანტისხეულების ხსნარი 7მლ………………………მწვანე თავსახურით

ლ ხსნარი A 7 მლ………………………………თეთრი ქუდი

ლ ხსნარი B 7მლ.......................................წითელი თავსახურით

ლ შესაჩერებელი ხსნარი 7მლ...............................................ყვითელი თავსახურით

ლ 20×კონცენტრირებული სარეცხი ხსნარი 40მლ

………………………………………………გამჭვირვალე თავსახური

ლ 4×კონცენტრირებული ექსტრაქციის ხსნარი 50მლ

………………………………………………….ლურჯი ქუდი

7. რეაგენტების მომზადება:

გამოსავალი 1:0.1მოლ/ლ NaOH ხსნარი

აწონეთ 0,4 გ NaOH 100 მლ დეიონიზებულ წყალში და მთლიანად აურიეთ.

გამოსავალი 2: 1მოლ/ლ NaOH ხსნარი

აწონეთ 4 გ NaOH 100 მლ დეიონიზებულ წყალში და მთლიანად აურიეთ.

გამოსავალი 3: კარბონატული ბუფერული მარილი

გამოსავალი1: 0.2 M PB

გახსენით 51,6გრ Na2HPO4· 12 სთ2O, 8,7 გ NaH2PO4· 2 სთ2O დეიონიზებული წყლით და განზავდეს 1000 მლ-მდე.

გამოსავალი2: ექსტრაქციის ხსნარი

განზავდეს 2×კონცენტრირებული ექსტრაქციის ხსნარი დეიონიზებული წყლით მოცულობითი თანაფარდობით 1:1 (მაგ. 10მლ 2×ექსტრაქციის ხსნარი + 10მლ დეიონიზებული წყალი), რომელიც გამოყენებული იქნება ნიმუშის ამოღებისთვის,ამ ხსნარის შენახვა შესაძლებელია 4℃ ტემპერატურაზე 1 თვის განმავლობაში.

გამოსავალი3: სარეცხი ხსნარი

განზავდეს 20×კონცენტრირებული სარეცხი ხსნარი დეიონიზებული წყლით მოცულობითი თანაფარდობით 1:19 (მაგ. 5მლ 20×სარეცხი ხსნარი + 95მლ დეიონიზებული წყალი), რომელიც გამოყენებული იქნება თეფშების გასარეცხად.ამ ხსნარის შენახვა შესაძლებელია 4℃ ტემპერატურაზე 1 თვის განმავლობაში.

8. ნიმუშების პრეპარატები

8.1 გაფრთხილება და სიფრთხილის ზომები ოპერაციამდე:

(ა) გთხოვთ, გამოიყენოთ ერთჯერადი რჩევები ექსპერიმენტის პროცესში და შეცვალოთ რჩევები სხვადასხვა რეაგენტის შთანთქმისას.

(ბ) დარწმუნდით, რომ ყველა ინსტრუმენტი სუფთაა.

(გ) შეინახეთ ქსოვილის ნიმუში ყინვაში.

(დ) მომზადებული ნიმუში უნდა იქნას გამოყენებული ანალიზისთვის ერთდროულად.

8.2 ცხოველური ქსოვილი (ქათამი, ღორის ხორცი და ა.შ.)

---- ნიმუშის ჰომოგენიზაცია ჰომოგენიზატორით;

---- აიღეთ 2.0±0.05გ ჰომოგენატი 50მლ პოლისტიროლის ცენტრიფუგის მილში;დაამატეთ 2 მლ 0.2 მლ PB (გამოსავალი1) შეანჯღრიეთ, რომ გაიხსნას, შემდეგ დაამატეთ 8 მლ ეთილის აცეტატი და ძლიერად შეანჯღრიეთ 3 წუთის განმავლობაში;

----ცენტრიფუგა გამოყოფისთვის: 3000გ / გარემოს ტემპერატურა / 5წთ.

---- გადაიტანეთ 4მლ სუპერნატანტის ორგანული ფაზა 10მლ მინის მილში, გააშრეთ 50-60℃ წყლის აბანოთი აზოტის გაზის ნაკადის ქვეშ;

----მშრალი ნარჩენი გავხსნათ 1მლ ნ-ჰექსანთან, მორევით 30 წთ გასახსნელად და შემდეგ დავამატოთ 1მლ ექსტრაქციის ხსნარი (გამოსავალი2), მორევა 1 წთ.ცენტრიფუგა განცალკევებისთვის: 3000 გ / გარემოს ტემპერატურა / 5 წთ

---- ამოიღეთ ზენატანი n-ჰექსანის ფაზა;აიღეთ 50 მკლ სუბსტრატის წყლის ფაზა გამოსაკვლევად.

 

განზავების ფაქტორი: 1

 

8.2 რძე

----აიღეთ 100 მკლ ნედლი რძის ნიმუში, შეურიეთ 900 მკლ ექსტრაქციის ხსნარს (გამოსავალი2) და მთლიანად აურიეთ.

---- მიიღეთ 50 მკლ მომზადებული ხსნარი გამოსაკვლევად.

 

განზავების კოეფიციენტი: 10

 

9. ანალიზის პროცესი

9.1 შენიშვნა ანალიზის წინ

9.1.1დარწმუნდით, რომ ყველა რეაგენტი და მიკროჭები ოთახის ტემპერატურაზეა (20-25℃).

9.1.2დააბრუნეთ ყველა დანარჩენი რეაგენტი 2-8-ზეგამოყენებისთანავე.

9.1.3მიკროჭის სწორად გარეცხვა მნიშვნელოვანი ნაბიჯია ანალიზის პროცესში;ეს არის ELISA ანალიზის განმეორებადობის სასიცოცხლო ფაქტორი.

9.1.4 აგააუქმეთ შუქი და დააფარეთ მიკროჭები ინკუბაციის დროს.

9.2 ანალიზის საფეხურები

9.2.1 გამოიღეთ ყველა რეაგენტი ოთახის ტემპერატურაზე (20-25℃) 30 წუთზე მეტი ხნის განმავლობაში, ნაზად შეანჯღრიეთ გამოყენებამდე.

9.2.2 ამოიღეთ საჭირო მიკროჭები და დაუყონებლივ დააბრუნეთ ელვა შესაკრავის ჩანთაში 2-8℃ ტემპერატურაზე.

9.2.3 განზავებული სარეცხი ხსნარი გამოყენებამდე უნდა გაათბო, რათა ოთახის ტემპერატურაზე იყოს.

9.2.4ნომერი:დანომრილი ყველა მიკროჭის პოზიციები და ყველა სტანდარტი და ნიმუში უნდა იყოს გაშვებული დუბლიკატად.ჩაწერეთ სტანდარტები და ნიმუშების პოზიციები.

9.2.5Aდდ სტანდარტული ხსნარი/ნიმუში და ანტისხეულების ხსნარი: დაამატეთ 50 μl სტანდარტული ხსნარი ((მოწოდებული ნაკრები)) ან მომზადებული ნიმუში შესაბამის ჭებში.დაამატეთ 50 μl ანტისხეულების ხსნარი (მოწოდებული ნაკრები).ნაზად აურიეთ თეფში ხელით შეანჯღრიეთ და ინკუბაცია 30 წუთის განმავლობაში 37℃ სახურავით.

9.2.6Სარეცხი: ნაზად ამოიღეთ საფარი და ამოიღეთ სითხე ჭაბურღილებიდან და ჩამოიბანეთ მიკროჭები 250 მკლ განზავებული სარეცხი ხსნარით (გამოსავალი3) 10 წამის ინტერვალით 4-5-ჯერ.შეიწოვეთ ნარჩენი წყალი შთამნთქმელი ქაღალდით (დარჩენილი ჰაერის ბუშტი შეიძლება აღმოიფხვრას გამოუყენებელი წვერით).

9.2.7დაამატეთ ფერმენტის კონიუგატი: დაამატეთ 100 მლ ფერმენტის კონიუგატის ხსნარი (მოწოდებული ნაკრები) თითოეულ ჭაბურღილში, ნაზად აურიეთ და ინკუბაცია 30 წუთის განმავლობაში 37 ° C-ზე თავდახურულით.კვლავ გაიმეორეთ სარეცხი ნაბიჯი.

9.2.8შეღებვა: დაამატეთ 50 მკლ ხსნარი A(მოწოდებული ნაკრები) და 50 მკლ ხსნარი B (მოწოდებული ნაკრები) თითოეულ ჭას.ნაზად აურიეთ და ინკუბაცია 15 წუთის განმავლობაში 37 გრადუსზე თავდახურვით.

9.2.9გაზომე: დაამატეთ 50 მკლ ხსნარი (მოწოდებული ნაკრები) თითოეულ ჭას.ნაზად აურიეთ და გაზომეთ შთანთქმა 450 ნმ-ზე (შემოთავაზებულია გაზომვა ორმაგი ტალღის სიგრძით 450/630 ნმ. წაიკითხეთ შედეგი გაჩერების ხსნარის დამატების შემდეგ 5 წუთში).

10. შედეგები

10.1 პროცენტული შთანთქმა

სტანდარტებისა და ნიმუშებისთვის მიღებული შთანთქმის მნიშვნელობების საშუალო მნიშვნელობები იყოფა პირველი სტანდარტის შთანთქმის მნიშვნელობაზე (ნულოვანი სტანდარტი) და მრავლდება 100%-ზე.ნულოვანი სტანდარტი ამგვარად კეთდება 100%-ის ტოლი და შთანთქმის მნიშვნელობები ციტირებულია პროცენტებში.

B

აბსორბცია (%) = —— ×100%

B0

B - შთანთქმის სტანდარტი (ან ნიმუში)

B0 — — შთანთქმის ნულოვანი სტანდარტი

10.2 სტანდარტული მრუდი

----სტანდარტული მრუდის დახაზვა: აიღეთ სტანდარტების შთანთქმის მნიშვნელობა y-ღერძის სახით, ტილოსინის სტანდარტების ხსნარის კონცენტრაციის ნახევრად ლოგარითმული (ppb) x-ღერძის სახით.

----თითოეული ნიმუშის ტილოსინის კონცენტრაცია (ppb), რომლის წაკითხვაც შესაძლებელია კალიბრაციის მრუდიდან, მრავლდება თითოეული შემდგომი ნიმუშის შესაბამისი განზავების კოეფიციენტზე და მიიღება ნიმუშის რეალური კონცენტრაცია.

Გთხოვთ, გაითვალისწინოთ:

მონაცემთა ანალიზისთვის შემუშავებულია სპეციალური პროგრამული უზრუნველყოფა, რომლის მიწოდებაც შესაძლებელია მოთხოვნის შემთხვევაში.

11. მგრძნობელობა, სიზუსტე და სიზუსტე

ტესტის მგრძნობელობა:1.5ppb

გამოვლენის ლიმიტი:

ცხოველური ქსოვილი…………………………………………1.5ppb რძე……………………………………………………..15ppb სიზუსტე:

ცხოველური ქსოვილი……………………………………80±15%

რძე……………………………………………………80±10%

სიზუსტე:

ELISA ნაკრების ვარიაციის კოეფიციენტი 10%-ზე ნაკლებია.

12. შენიშვნა

12.1 სტანდარტებისა და ნიმუშებისთვის მიღებული შთანთქმის მნიშვნელობების საშუალო მნიშვნელობები შემცირდება, თუ რეაგენტები და ნიმუშები არ იქნება დარეგულირებული ოთახის ტემპერატურაზე (20-25℃).

12.2 არ დაუშვათ მიკროჭის გაშრობა საფეხურებს შორის, რათა თავიდან აიცილოთ წარუმატებელი გამეორება და ამუშავეთ შემდეგი ნაბიჯი მიკროჭების დამჭერის შეხებისთანავე.

12.3 გამოყენებამდე ნაზად შეანჯღრიეთ თითოეული რეაგენტი.

12.4 შეინახეთ კანი მოშორებით სტოპ ხსნარისგან, რადგან ის არის 0.5 MH2SO4გამოსავალი.

12.5 არ გამოიყენოთ მოძველებული ნაკრები.არ შეცვალოთ სხვადასხვა პარტიების რეაგენტები, თორემ დაქვეითდება მგრძნობელობა.

12.6 შეინახეთ ELISA კომპლექტები 2-8℃ ტემპერატურაზე, არ გაყინოთ.დალუქეთ მიკროჭის ფირფიტები, მოერიდეთ მზის პირდაპირ სხივებს ყველა ინკუბაციის დროს.რეკომენდებულია მიკროტიტრული ფირფიტების დაფარვა.

12.7 სუბსტრატის ხსნარი უნდა იყოს მიტოვებული, თუ ის ფერადდება.რეაგენტები შეიძლება გაფუჭდეს, თუ ნულოვანი სტანდარტის შთანთქმის მნიშვნელობა (450/630 ნმ) 0,5-ზე ნაკლებია (A450 ნმ<0,5).

12.8 შეფერილობის რეაქციას სჭირდება 15 წუთი A ხსნარის და B ხსნარის დამატების შემდეგ. და თქვენ შეგიძლიათ გააგრძელოთ ინკუბაციის დროის დიაპაზონი 20 წთ-მდე ან მეტამდე, თუ ფერი ძალიან ღიაა დასადგენისთვის.არასოდეს გადააჭარბოთ 30 წუთს, პირიქით, სწორად შეამცირეთ ინკუბაციის დრო.

12.9 რეაქციის ოპტიმალური ტემპერატურაა 37℃.უფრო მაღალი ან დაბალი ტემპერატურა გამოიწვევს მგრძნობელობისა და შთანთქმის მნიშვნელობების ცვლილებას.

13. შენახვა

შენახვის პირობები: 2-8℃.

შენახვის ვადა: 12 თვე.

 


  • წინა:
  • შემდეგი:

  • დაწერეთ თქვენი მესიჯი აქ და გამოგვიგზავნეთ