produk

Kit Immunoassay Énzim kalapa pikeun Analisis Kuantitatif Tylosin

Katerangan pondok:

Tylosin mangrupikeun antibiotik macrolide, anu biasana dianggo salaku antibakteri sareng anti-mycoplasma.MRLs ketat geus ngadegkeun saprak ubar ieu bisa ngakibatkeun efek samping serius dina grup tangtu.

Kit ieu mangrupikeun produk anyar dumasar kana téknologi ELISA, anu gancang, gampang, akurat sareng sénsitip dibandingkeun sareng analisa instrumental umum sareng ngan ukur peryogi 1,5 jam dina hiji operasi, éta tiasa ngaminimalkeun kasalahan operasi sareng inténsitas kerja.


Rincian produk

Tag produk

Énzim kalapa Immunoassay Kit pikeun

Analisis Kuantitatif tinaTilosin


1. Latar

Tilosinmangrupakeun antibiotik macrolide, nu utamana dilarapkeun salaku antibakteri jeung anti-mycoplasma.MRLs ketat geus ngadegkeun saprak ubar ieu bisa ngakibatkeun efek samping serius dina grup tangtu.

Kit ieu mangrupikeun produk anyar dumasar kana téknologi ELISA, anu gancang, gampang, akurat sareng sénsitip dibandingkeun sareng analisa instrumental umum sareng ngan ukur peryogi 1,5 jam dina hiji operasi, éta tiasa ngaminimalkeun kasalahan operasi sareng inténsitas kerja.

2. Prinsip Tés

Kit ieu dumasar kana téknologi ELISA anu kompetitif teu langsung.Sumur microtiter dilapis ku antigen gandeng.Résidu tylosin dina sampel bersaing sareng antigén anu dilapis dina piring mikrotiter pikeun antibodi.Saatos tambihan énzim anu dilabélan anti-antibodi, substrat TMB dianggo pikeun nunjukkeun warna.Nyerep sampel négatip patali jeung tylosin reside di dinya, sanggeus ngabandingkeun jeung Kurva Standar, dikali faktor éncér, kuantitas résidu tylosin dina sampel bisa diitung.

3. Aplikasi

Kit ieu tiasa dianggo dina analisis kuantitatif sareng kualitatif résidu tylosin dina jaringan sato (hayam, babi, bebek) sareng susu, madu, endog, jsb.

4. Cross-réaksi

Tilosin ……………………………………………………..100%

Tilmicosin…………………………………………<2%

5. Bahan Diperlukeun

5.1 Pakakas:

----Microtiter plat spéktrofotométer (450nm/630nm)

---- Rotary evaporator atawa nitrogén drying instrumen

----homogéniser

---- Goyang

----Sentrifugal

---- Kasaimbangan analitik (induktansi: 0.01g)

---- Pipet ukur : 10 ml

---- Bola pipet karét

----Labu volumetrik: 10ml

----Polystyrene centrifuge tube: 50ml

----Mikropét: 20-200ml, 100-1000ml

250ml-multipipette

5.2 réagen:

----Natrium hidroksida (NaOH, AR)

----Natrium bikarbonat (NaHCO3,AR)

---- Natrium karbonat (NaCO3, AR)

----Asam trikloroasetat (AR)

---- Asétonitril (AR)

----Étil asetat (AR)

┅┅n-Heksana (AR)

---- Cai deionized

6. Komponén Kit

l plat Microtiter kalawan 96 sumur coated kalawan antigen

l Solusi standar (5 botol, 1ml / botol)

0ppb, 0.5ppb, 1.5ppb, 4.5ppb, 13.5ppb

l Spiking kontrol baku: (1ml/botol)1 ppm

l Énzim konjugasi 1ml………………………………………………………………………………

l Solusi Antibodi 7ml……………………………………………………………………

l Leyuran A 7ml………………………………………………

l Leyuran B 7ml...…………………………………………………………

l Eureun solusi 7ml.……………………………………. tutup konéng

l 20 × leyuran nyeuseuh kentel 40ml

……………………………………………..cap transparan

l 4 × solusi ékstraksi kentel 50ml

…………………………………………….cap biru

7. Persiapan réagen:

Solusi 1:0,1 mol/L larutan NaOH

Beurat 0,4g NaOH nepi ka 100ml cai deionized jeung campur lengkep.

Solusi 2: 1 mol/L larutan NaOH

Beurat 4g NaOH nepi ka 100ml cai deionisasi jeung campur nepi lengkep.

Solusi 3: Uyah panyangga karbonat

Solusi1: 0,2M PB

Ngaleyurkeun 51,6 g Na2HPO4· 12H2O, 8,7 g NaH2PO4· 2H2O jeung cai deionized jeung éncér ka 1000ml.

Solusi2: solusi ékstraksi

Éncér 2 × solusi ékstraksi kentel jeung cai deionized dina nisbah volume 1: 1 (misalna 10ml larutan 2×ekstraksi + 10ml cai deionisasi), anu bakal dianggo pikeun ékstraksi sampel,solusi ieu bisa disimpen dina 4 ℃ salila 1 bulan.

Solusi3: Ngumbah solusi

Éncér 20 × larutan cuci kentel jeung cai deionized dina nisbah volume 1:19 (misalna 5ml 20 × solusi cuci + 95ml cai deionized), anu bakal dianggo pikeun ngumbah piring.Solusi ieu tiasa disimpen dina suhu 4 ℃ salami 1 bulan.

8. Persiapan Sampel

8.1 Bewara sareng pancegahan sateuacan operasi:

(a) Punten pigunakeun tip sakali dina prosés ékspérimén, sareng robih tip nalika nyerep réagen anu béda.

(b) Pastikeun yén sadaya instrumen beresih.

(c) Simpen sampel jaringan dina freeze.

(d) Sampel anu disiapkeun kedah dianggo pikeun uji sakaligus.

8.2 Jaringan sato (hayam, babi, jsb)

---- Homogénisasi sampel kalawan homogenizer;

---- Candak 2.0 ± 0.05g of homogenate kana 50ml polystyrene centrifuge tube;tambahkeun 2ml 0,2M PB (solusi1) , ngocok ngaleyurkeun, lajeng nambahkeun 8ml étil asétat jeung ngocok fiercely pikeun 3min;

---- Centrifuge pikeun separation: 3000g / hawa ambient / 5min.

---- Mindahkeun 4ml fase organik supernatant kana tube kaca 10ml, garing kalayan mandi cai 50-60 ℃ handapeun aliran gas nitrogén;

---- Leyurkeun sésa garing kalayan 1ml n-héksana, vortex pikeun 30s ngaleyurkeun, teras tambahkeun 1ml larutan ékstraksi (solusi2), vortex pikeun 1 mnt.centrifuge pikeun separation: 3000g / hawa ambient / 5min

----Leupaskeun fase n-héksana supernatan;nyandak 50μl fase cai substrat pikeun assay.

 

Faktor éncér: 1

 

8.2 Susu

---- Candak 100μl sampel susu atah, campur jeung 900μl solusi ékstraksi (solusi2), sarta campur lengkep.

---- Nyokot 50μl leyuran disusun pikeun assay.

 

Faktor éncér: 10

 

9. Prosés assay

9.1 Bewara saméméh assay

9.1.1Pastikeun sadaya réagen sareng microwells sadayana dina suhu kamar (20-25 ℃).

9.1.2Balikkeun sadaya réagen sésana ka 2-8langsung saatos dianggo.

9.1.3Ngumbah microwells leres mangrupa hambalan penting dina prosés assay;éta faktor vital pikeun reproducibility tina analisis ELISA.

9.1.4 Akosongkeun cahaya sareng nutupan microwells salami inkubasi.

9.2 Léngkah Assay

9.2.1 Candak sadaya réagen kaluar dina suhu kamar (20-25 ℃) pikeun leuwih ti 30min, ngocok gently saméméh pamakéan.

9.2.2 Kéngingkeun microwells anu diperyogikeun teras balikkeun sésa-sésa kana kantong zip-lock dina suhu 2-8 ℃ langsung.

9.2.3 Solusi cuci anu éncér kedah dipanaskeun deui dina suhu kamar sateuacan dianggo.

9.2.4Jumlah:Dinomerkeun unggal posisi microwell sareng sadaya standar sareng conto kedah dijalankeun dina duplikat.Rékam standar sareng posisi sampel.

9.2.5Add solusi baku / sampel jeung solusi antibodi: Tambahkeun 50µl larutan baku((kit disadiakeun)) atawa sampel disiapkeun ka sumur pakait.Tambahkeun 50µl larutan antibodi (kit disadiakeun).Campur gently ku oyag piring sacara manual tur incubate pikeun 30min dina 37 ℃ kalawan panutup.

9.2.6Nyeuseuh: Cabut panutupna sacara lembut sareng bersihkeun cairan tina sumur sareng bilas microwells nganggo larutan cuci éncér 250µl (solusi3) dina interval 10s pikeun 4-5 kali.Nyerep cai sésa-sésa ku kertas nyerep (sésana gelembung hawa tiasa dileungitkeun ku tip anu henteu dianggo).

9.2.7Tambahkeun énzim conjugate: Tambahkeun 100 ml larutan konjugat énzim (kit disadiakeun) ka unggal sumur, campur gently jeung incubate pikeun 30 menit dina 37 ℃ kalawan panutup.Malikan deui léngkah nyeuseuh.

9.2.8Ngawarnaan: Tambah 50µl larutan A(kit disadiakeun) jeung 50µl larutan B(kit disadiakeun) ka unggal sumur.Campur gently jeung incubate pikeun 15min dina 37 ℃ kalawan panutup.

9.2.9Ukur: Tambahkan 50µl larutan stop(kit disadiakeun) ka unggal sumur.Campur gently sarta ngukur absorbance dina 450nm (Ieu ngusulkeun ukuran jeung dual-panjang gelombang 450/630nm. Baca hasilna dina 5min sanggeus nambahkeun solusi eureun).

10. Hasilna

10.1 Persentase nyerep

Nilai rata-rata nilai absorbansi diala pikeun standar jeung sampel dibagi ku nilai absorbansi tina standar kahiji (standar enol) jeung dikali 100%.Standar enol dijieun sarua jeung 100% jeung nilai absorbance dicutat dina percentages.

B

Kaserepan (%) = —— ×100%

B0

B --standar nyerep (atawa sampel)

B0 --nyerep nol baku

10.2 Kurva baku

----Pikeun ngagambar kurva baku: Candak nilai absorbansi standar salaku sumbu-y, semi logaritmik tina konsentrasi larutan standar tylosin (ppb) salaku sumbu-x.

---- Konsentrasi tylosin unggal sampel (ppb), nu bisa dibaca tina kurva calibration, dikalikeun ku faktor éncér pakait unggal sampel dituturkeun, sarta konsentrasi sabenerna sampel dicandak.

Punten perhatikeun:

software husus geus dimekarkeun pikeun analisis data, nu bisa disadiakeun dina pamundut.

11. Sensitipitas, akurasi sarta precision

Sensitipitas Uji:1,5 pb

wates deteksi:

Jaringan sasatoan……………………………………………………1.5ppb Susu……………………………………………………..15ppb Akurasi:

Jaringan sato………………………………………… 80±15%

Susu…………………………………………………… 80±10%

Precision:

Koéfisién variasi kit ELISA kirang ti 10%.

12. Bewara

12.1 Nilai rata-rata tina nilai absorbansi anu dicandak pikeun standar sareng sampel bakal dikirangan upami réagen sareng conto henteu diatur kana suhu kamar (20-25 ℃).

12.2 Ulah ngantep microwells garing antara hambalan pikeun nyegah reproducibility gagal tur ngajalankeun lengkah saterusna langsung saatos ketok wadah microwells.

12.3 Ngocok unggal réagen gently saméméh pamakéan.

12.4 Jauhkeun kulit anjeun tina stop solution sabab 0.5MH2SO4solusi.

12.5 Entong nganggo kit anu kadaluwarsa.Ulah tukeur réagen tina bets béda, atawa nu sejenna bakal leupaskeun sensitipitas.

12.6 Simpen kit ELISA dina 2-8 ℃, ulah beku.Segel pelat microwell sésana, Hindarkeun sinar panonpoé langsung salila sakabéh inkubasi.Disarankeun nutupan piring microtiter.

12.7 Solusi substrat kudu ditinggalkeun lamun robah warna ka warna.Réagen tiasa janten goréng upami nilai absorbansi (450/630nm) tina standar enol kirang ti 0,5 (A450nm <0,5).

12.8 Réaksi coloration kudu 15min sanggeus ditambahan leyuran A jeung leyuran B. Jeung anjeun bisa manjangkeun rentang waktu inkubasi ka 20min atawa leuwih lamun warna lampu teuing pikeun ditangtukeun.Henteu langkung ti 30 menit, sabalikna, pondokkeun waktos inkubasi kalayan leres.

12.9 Suhu réaksi optimal nyaéta 37 ℃.Suhu anu langkung luhur atanapi langkung handap bakal nyababkeun parobahan sensitipitas sareng nilai nyerep.

13. Panyimpenan

Kaayaan gudang: 2-8 ℃.

Mangsa neundeun: 12 bulan.

 


  • saméméhna:
  • Teras:

  • Tulis pesen anjeun di dieu sareng kirimkeun ka kami