продукт

1. Фон

Тилосинмакролид антибиотик, ул антибактериаль һәм анти-микоплазма буларак кулланыла.Каты МРЛлар булдырылмаган, чөнки бу препарат кайбер төркемнәрдә җитди йогынты ясарга мөмкин.

Бу комплект ELISA технологиясенә нигезләнгән яңа продукт, ул тиз инструменталь анализ белән чагыштырганда тиз, җиңел, төгәл һәм сизгер һәм бер операциядә 1,5 сәгать кенә кирәк, ул операция хатасын һәм эш интенсивлыгын сизелерлек киметә ала.

2. Тест принцибы

Бу комплект турыдан-туры көндәшлеккә сәләтле ELISA технологиясенә нигезләнгән.Микротитер скважиналары антиген кушылу белән капланган.Ampleрнәктәге Тилосин калдыклары антитела өчен микротитер тәлинкәсендә капланган антиген белән көндәшлек итә.Анти-антитела дип аталган фермент кушылганнан соң, төсне күрсәтү өчен TMB субстраты кулланыла.Ampleрнәкнең абсорбциясе андагы тилосин белән тискәре мөнәсәбәттә, Стандарт Кәкре белән чагыштырганда, эретү факторы белән тапкырланганнан соң, үрнәктә тилосин калдыклары саны исәпләнә ала.

3. Кушымталар

Бу комплект хайван тукымасында (тавык, дуңгыз ите, үрдәк) һәм сөт, бал, йомырка һ.б.дагы тилосин калдыкларын санлы һәм сыйфатлы анализлауда кулланылырга мөмкин.

4. Кросс реакцияләр

Тилосин ……………………………………… ..100%

Тилмикосин ………………………………………… <2%

5. Кирәкле материаллар

5.1 Equipmentиһазлар:

---- Микротитер тәлинкә спектропотометры (450нм / 630нм)

---- Әйләнүче парга әйләндергеч яки азот киптерү кораллары

---- гомогенизатор

---- Шейкер

---- Centентрифуга

---- Аналитик баланс (индуктивлык: 0.01г)

---- Чыгарылган пипетка: 10мл

---- Резина пипетка лампасы

---- Күләмле фласс: 10мл

---- Полистирол центрифуга торбалары: 50мл

---- Микропипетлар: 20-200мл, 100-1000мл

250мл-мультипипетта

5.2 Реагентлар:

----Натрий гидроксиды (NaOH, AR)

---- Натрий биарбонаты (NaHCO_3,AR)

---- Натрий карбонаты (NaCO₃, AR)

---- Трихлороацетик кислотасы (AR)

---- Ацетонитрил (AR)

---- Этил asetat (AR)

┅┅n-Hexane (AR)

---- Дионлаштырылган су

6. Комплект компонентлары

l Антиген белән капланган 96 скважина белән микротитер тәлинкәсе

l Стандарт карарлар (5 шешә, 1мл / шешә)

0ppb, 0.5ppb, 1.5ppb, 4.5ppb, 13.5ppb

l Стандарт контроль: (1мл / шешә)1 сәгать

l Фермент конжугаты 1мл …………… ..… ..… кызыл капка

l Антитело эремәсе 7мл ………………. …… яшел капка

l 7мл чишелеш …………………….…. …… ак капка

l Чишелеш В 7мл ... …………………………… .. капка

l 7мл чишелешне туктатыгыз. ………………. ………

l 20 × концентрацияләнгән юу эремәсе 40мл

………………………………… ..… үтә күренмәле капка

l 4 × концентрацияләнгән чыгару эремәсе 50мл

…………………………………………

7. Реагентлар әзерләү:

Чишелеш 1:0,1мол / Л NaOH эремәсе

0,4г NaOH белән 100мл деонизацияләнгән су белән үлчәгез һәм тулысынча кушыгыз.

Чишелеш 2: 1мол / L NaOH эремәсе

4г NaOH белән 100мл деонизацияләнгән су белән үлчәгез һәм тулысынча кушылыгыз.

Чишелеш 3: Карбонат буфер тозы

Чишелеш1: 0,2М ПБ

51,6г На эрегез₂HPO₄· 12Х₂O, 8,7г NaH₂PO₄· 2Х₂О деонизацияләнгән су белән 1000млга эретегез.

Чишелеш2: Чыгару чишелеше

2 × концентрацияләнгән чыгару эремәсен 1: 1 күләмендә деонизацияләнгән су белән эретегез (мәсәлән, 10мл 2 × чыгару эремәсе + 10мл деонизацияләнгән су), үрнәк алу өчен кулланылачак,бу чишелеш 4 1 1 ай эчендә сакланырга мөмкин.

Чишелеш3: Чишелешне юыгыз

20 × концентрацияләнгән юу эремәсен 1:19 күләмендә деонизацияләнгән су белән эретегез (мәсәлән, 5мл 20 × юу эремәсе + 95мл деонизацияләнгән сутәлинкәләрне юу өчен кулланылачак.Бу чишелешне 4 айда 1 айга сакларга мөмкин.

8. ampleрнәк әзерлек

8.1 Эш алдыннан хәбәрләр һәм саклык чаралары:

а) Зинһар, эксперимент процессында бер тапкыр бирелгән киңәшләрне кулланыгыз, һәм төрле реагентны сеңдергәндә киңәшләрне үзгәртегез.

б) Барлык приборларның да чиста булуына инаныгыз.

в) тукымалар үрнәген туңдырмада саклагыз.

г) әзерләнгән үрнәкне берьюлы анализлау өчен кулланырга кирәк.

8.2 Хайван тукымасы (тавык, дуңгыз ите һ.б.)

---- Гомогенизатор белән үрнәкне гомогенизацияләгез;

---- 50мл полистирол центрифуга торбасына 2,0 ± 0,05 гомогенат алыгыз;2мл 0,2М ПБ өстәргә (чишелеш1), эретү өчен селкетегез, аннары 8мл этил asetat кушыгыз һәм 3 минутка каты селкетегез;

---- Аеру өчен центрифуга: 3000г / тирә температура / 5мин.

---- 4мл супернант органик фазаны 10мл пыяла торбага күчерегез, азот газ агымы астында 50-60 ℃ су мунчасы белән коры;

---- Коры калдыкны 1мл н-гексан белән эретегез, вортексны 30-нчы елларга эретегез, аннары 1мл чыгару эремәсе кушыгыз (чишелеш2), вортекс 1мин.аеру өчен центрифуга: 3000г / тирә температура / 5мин

---- Супернатант n-гексан фазасын бетерегез;анализ өчен 50μл субстрат су фазасын алыгыз.

Эретү факторы: 1

8.2 Сөт

---- 100μл чимал сөт үрнәген алыгыз, 900μл чыгару эремәсе белән кушыгыз (чишелеш2), һәм тулысынча кушыгыз.

---- Анализ өчен әзерләнгән чишелешнең 50μлын алыгыз.

Эретү факторы: 10

9. Тикшерү процессы

9.1 Анализ алдыннан хәбәр итегез

9.1.1Барлык реагентлар һәм микроэлементлар бүлмә температурасында булуына инаныгыз (20-25 ℃).

9.1.2Калган барлык реагентларны 2-8гә кайтарыгыз℃кулланылганнан соң.

9.1.3Микродулкаларны дөрес юу - анализлау процессында мөһим адым;ул ELISA анализының репродуктивлыгы өчен мөһим фактор.

9.1.4 А.яктылыкны бушатыгыз һәм инкубация вакытында микроэлементларны каплагыз.

9.2

9.2.1 Барлык реагентларны бүлмә температурасында (20-25 ℃) 30 минуттан артык алыгыз, кулланганчы йомшак селкетегез.

9.2.2 Микроэлементларны чыгарып, калганнарын шунда ук 2-8 at капчык капчыгына кайтарыгыз.

9.2.3 Эретелгән юу эремәсе кулланылганчы бүлмә температурасында булырга тиеш.

9.2.4Сан:Micәр микроэлемтә позициясе номерланган, барлык стандартлар һәм үрнәкләр икеләтә эшләнергә тиеш.Стандартларны һәм үрнәк позицияләрен язып алыгыз.

9.2.5Add стандарт чишелеш / үрнәк һәм антитела эремәсе: 50µл стандарт чишелеш өстәргә ((комплект белән тәэмин ителгән)) яки тиешле скважиналарга әзерләнгән үрнәк.50µл антитела эремәсе кушыгыз (комплект белән тәэмин ителгән).Тәлинкәне кул белән селкетеп, йомшак кына катнашыгыз һәм 30 минутка 37 at каплагыз.

9.2.6Washу: Капкачны йомшак кына алыгыз һәм сыеклыкны коедан чистартыгыз һәм микроэлемтәләрне 250µл эретелгән юу эремәсе белән юыгыз (чишелеш3) 10-5 аралыгында 4-5 тапкыр.Калдык суны сеңдергеч кәгазь белән сеңдерегез (калган һава күпере кулланылмаган оч белән бетерелергә мөмкин).

9.2.7Фермент коньягаты өстәргә: 100мл фермент коньягаты эремәсе кушыгыз (комплект белән тәэмин ителгән) һәр скважинага йомшак кына кушыгыз һәм 30 минут эчендә 37 incub каплагыз.Washу адымын кабатлагыз.

9.2.8Төсләр: А 50µл эремәсе кушыгыз (комплект белән тәэмин ителгән) һәм 50µл В эремәсе (комплект белән тәэмин ителгән) һәр коега.Йомшак катнашыгыз һәм 15 минут эчендә 37 at каплагыз.

9.2.9Asureлчәү: 50µл тукталыш чишелешен өстәргә (комплект белән тәэмин ителгән) һәр коега.Йомшак катнашыгыз һәм сеңдерүне 450нмда үлчәгез (Ике дулкын озынлыгы 450 / 630нм белән тәкъдим ителә. Тукталыш эремәсен кушканнан соң 5 минут эчендә нәтиҗәне укыгыз).

10. Нәтиҗә

10.1 Процент үзләштерү

Стандартлар һәм үрнәкләр өчен алынган сеңдерү кыйммәтләренең уртача кыйммәтләре беренче стандартның (нуль стандарты) үзләштерү кыйммәтенә бүленә һәм 100% ка тапкырлана.Нуль стандарты шулай итеп 100% тәшкил итә һәм үзләштерү кыйммәтләре процентларда китерелә.

B

Абсорбция (%) = —— × 100%

B0

В —— абсорбция стандарты (яки үрнәк)

B0 —— абсорбанс нуль стандарты

10.2 Стандарт сызык

---- Стандарт сызык сызу өчен: стандартларның үзләштерү кыйммәтен у күчәре, тилосин стандартлары эремәсе концентрациясенең ярым логарифмик р-о кебек алыгыз.

---- Калибрлау сызыгыннан укып була торган һәр үрнәкнең (ppb) тилосин концентрациясе, һәрбер үрнәкнең тиешле эретү факторы белән арттырыла, һәм үрнәкнең концентрациясе алына.

Зинһар, игътибар итегез:

сорау буенча бирелә торган мәгълүмат анализы өчен махсус программа эшләнде.

11. Сәнгатьчәнлек, төгәллек һәм төгәллек

Тест сизгерлеге:1.5ppb

Ачыклау лимиты:

Хайваннар тукымасы …………………………. …………… 1.5ppb Сөт …………………………………………… .....… ..15ppb Төгәллек:

Хайван тукымасы ………………………… ... ………… 80 ± 15%

Сөт ………………………………… .. ………. …… 80 ± 10%

Төгәллек:

ELISA комплектының үзгәрү коэффициенты 10% тан ким түгел.

12. Игътибар итегез

12.1 Стандартлар һәм үрнәкләр өчен алынган үзләштерү кыйммәтләренең уртача кыйммәтләре реагентлар һәм үрнәкләр бүлмә температурасына көйләнмәгән булса (20-25 ℃) кимиячәк.

12.

12.3 useәр реагентны кулланганчы әкрен генә селкетегез.

12.4 Тереңне тукталыш эремәсеннән ерак тот, чөнки ул 0,5МХ₂SO₄чишелеш.

12.5 Комплектларны искермәгез.Төрле партияләрнең реагентларын алыштырмагыз, югыйсә ул сизгерлекне төшерер.

12.6 ELISA комплектларын 2-8 at саклагыз, туңмагыз.Ял микродулкынлы плиталарны мөһерләгез, барлык инкубация вакытында туры кояш нурларыннан сакланыгыз.Микротитер тәлинкәләрен капларга киңәш ителә.

12.7 Субстрат эремәсе төскә әйләнсә, ташланырга тиеш.Әгәр дә нуль стандартының үзләштерү бәясе (450 / 630nm) 0,5 (A450nm <0,5) ким булса, реагентлар начар булырга мөмкин.

12.8 Төсләр реакциясенә А эремәсе һәм В эремәсе кушылганнан соң 15 минут кирәк, һәм төс билгесез булса, инкубация вакыты 20 минутка яки аннан да күбрәккә озайтылырга мөмкин.Беркайчан да 30миннан артмагыз, киресенчә, инкубация вакытын тиешенчә кыскартыгыз.

12.9 Оптималь реакция температурасы 37 is.Higherгары яки түбән температура сизгерлек һәм сеңдерү кыйммәтләренең үзгәрүенә китерәчәк.

13. Саклау

Саклау торышы: 2-8 ℃.

Саклау вакыты: 12 ай.